阿帕替尼作为平滑肌表型转化抑制剂的用途制造技术

本发明专利技术属于医药领域，涉及阿帕替尼作为平滑肌表型转化抑制剂的用途。本发明专利技术提出Apatinib对PDGFRβ有抑制作用，因此Apatinib可以抑制平滑肌表型转换，从而预防和/或治疗血管损伤后再狭窄。此外，Apatinib并无通常心血管药物或其他平滑肌表型转换抑制剂的细胞毒作用，因此可以预期其安全性。其可以作为治疗平滑肌参与的相关疾病如血管再狭窄、肿瘤等疾病的药物而广泛应用。

【技术实现步骤摘要】
阿帕替尼作为平滑肌表型转化抑制剂的用途
本专利技术属于医药领域，尤其涉及阿帕替尼作为平滑肌表型转化抑制剂的用途。
技术介绍
阿帕替尼，英文名称为Apatinib，别名为甲磺酸阿帕替尼；阿帕替尼甲磺酸盐；CS-1160；N-[4-(1-氰基环戊基)苯基]-2-[(4-吡啶基甲基)氨基]-3-吡啶甲酰胺；YN968D1；[阿帕替尼游离]；APATINIBFREEBASE(YN968D1FREEBASE)。其分子量为397.47232，分子式为C24H23N5O，CAS号为811803-05-1。结构式为Apatinib在目前已有的研究中主要作为血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)的抑制剂，即抑制VEGFR-2。Apatinib通过高度选择性竞争细胞内VEGFR-2的ATP结合位点，阻断下游信号转导，抑制酪氨酸激酶的生成从而抑制肿瘤组织新血管的生成，最终达到治疗肿瘤的目的。因此上述药物均被广泛应用于胃癌等肿瘤相关的研究中。血管平滑肌细胞(VSMC)的表型可分为分化程度较高的收缩型和分化程度较低的分泌型，这两种表型代表了共存于血管壁内一系列不同表现型的两个极端类型，且表达不同的基因和蛋白。正常成人动脉血管的VSMC以收缩型为主，其主要功能是维持血管的弹性和收缩血管。收缩型VSMC增殖、迁移能力差或无，胞体呈梭形或带状，含大量肌丝和结构蛋白；而分泌型VSMC主要存在于胚胎中期血管和病理血管中，其主要功能是增殖、迁移入内膜以及合成细胞外基质蛋白。VSMC从收缩型向分泌型转换的过程称为VSMC的表型转换。研究表明丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、PI-3-K、环一磷酸腺苷(cAMP)这三种信号传导途径参与VSMC的表型转换，通过的受体包括VEGFR、血小板源性生长因子受体(PDGFR)等。VSMC的异常增殖和迁移是高血压、肺动脉高压等血管疾病发生发展的共同病理特征，同时也是引起血管损伤后再狭窄的重要原因，而VSMC表型转化在VSMC增殖和迁移过程中发挥了重要作用。根据VSMC两种表型表达蛋白的不同可以找到表型转换时相应的标志物。其中α平滑肌肌动蛋白(α-smoothmuscleactin，α-SMA)在收缩型细胞中优势表达，是VSMC分化的早期特征性标志物。目前应用于科研中的抑制血管损伤后再狭窄的药物有数种，其中最为常见的有：血管紧张素转换酶(简写为ACE)抑制剂螺普利和西拉普利，药物涂层支架(DES)使用的涂层药物[如抗栓剂(如肝素、水蛭素)、抗炎症药物、抗细胞增殖剂(如雷帕霉素、紫杉醇]等。已有的研究表明Apatinib可以通过促进细胞凋亡，在肿瘤疾病中发挥治疗作用，同时可能引起高血压。
技术实现思路
为改善上述技术问题，本专利技术提供一种PDGFRβ的磷酸化和PDGFRβ下游信号通路的抑制剂，其包括阿帕替尼。根据本专利技术的实施方案，所述抑制剂用于抑制平滑肌表型转换。根据本专利技术的实施方案，所述平滑肌表型转换包括由收缩型向分泌型转换。根据本专利技术的实施方案，所述抑制剂用于预防和/或治疗血管损伤后再狭窄。根据本专利技术的实施方案，所述血管损伤后再狭窄包括PCI再狭窄、支架内再狭窄、旁路移植后再狭窄等。根据本专利技术的实施方案，所述抑制剂中阿帕替尼的浓度为50nM至200nM。本专利技术还提供阿帕替尼在制备PDGFRβ的磷酸化和PDGFRβ下游信号通路的抑制剂中的用途。本专利技术还提供一种抑制PDGFRβ的磷酸化和PDGFRβ下游信号通路的方法，包括将阿帕替尼施用于有此需要的个体。根据本专利技术的实施方案，通过抑制PDGFRβ的磷酸化和PDGFRβ下游信号通路达到平滑肌表型转换抑制剂的作用，从而预防和/或治疗血管损伤后再狭窄。本专利技术具有的有益效果：专利技术人意外地发现Apatinib不仅可以作为VEGFR-2抑制剂，而且同时对PDGFRβ有抑制作用，因此Apatinib可以抑制平滑肌表型转换，从而预防和/或治疗血管损伤后再狭窄。此外，Apatinib并无通常心血管药物或其他平滑肌表型转换抑制剂的细胞毒作用，因此可以预期其安全性。其可以作为治疗平滑肌参与的相关疾病如血管再狭窄、肿瘤等疾病的药物而广泛应用。附图说明图1中a为假手术+载体处理组，b为结扎+载体处理组，c为结扎+阿帕替尼处理组处理后，利用油红-苏木精(HE)染色实验检测小鼠颈动脉结扎后的血管形态。图2为不同浓度的Apatinib和载体(DMSO)利用EdU实验检测VSMC细胞增殖情况。其中第一列为DAPI染色细胞核，第二列为EdU染色细胞核，第三列为前两列的融合图；而第一行为载体处理组，第二行为PDGF-BB和载体处理组，第三行为PDGF-BB和50nM的Apatinib处理组，第四行为PDGF-BB和100nM的Apatinib处理组，第五行为PDGF-BB和200nM的Apatinib处理组。图3为VSMC细胞给予PDGF-BB处理后，分别给予Apatinib(50,100,200nM)和载体(DMSO)刺激。图中为不同浓度的Apatinib及载体后利用蛋白印迹实验检测细胞周期蛋白和抑癌蛋白的表达，VSMC细胞给予PDGF-BB处理后，细胞周期蛋白表达上升，抑癌蛋白表达下降；给予Apatinib刺激后，细胞周期蛋白表达下降，抑癌蛋白表达上升。图4为VSMC细胞给予PDGF-BB处理后，分别给予Apatinib(50,100,200nM)和载体(DMSO)刺激。图中为不同浓度的Apatinib及载体利用蛋白印迹实验检测细胞凋亡有关蛋白的表达，未见明显变化。图5为VSMC细胞给予PDGF-BB处理后，分别给予Apatinib(50,100,200nM)和载体(DMSO)刺激。图中为不同浓度的Apatinib利用transwell实验检测细胞迁移情况。图6为VSMC细胞给予PDGF-BB处理后，分别给予Apatinib(50,100,200nM)和载体(DMSO)刺激。图中为不同浓度的Apatinib利用划痕实验检测细胞增殖迁移情况。图7中小鼠颈动脉结扎后，分别给予小鼠载体和10mg/kg·dApatinib处理，图中为不同浓度的Apatinib利用免疫荧光实验检测收缩基因αSMA表达情况。图8为VSMC细胞给予PDGF-BB处理后，分别给予Apatinib(50,100，200nM)和载体(DMSO)刺激。图中为不同浓度的Apatinib利用蛋白印迹实验检测PDGFRβ磷酸化水平情况。具体实施方式下文将结合具体实施例对本专利技术的技术方案做更进一步的详细说明。应当理解，下列实施例仅为示例性地说明和解释本专利技术，而不应被解释为对本专利技术保护范围的限制。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均涵盖在本专利技术旨在保护的范围内。除非另有说明，以下实施例中使用的原料和试剂均为市售商品，或者可以通过已知方法制备。以下实施例应用细胞实验研究该药物对VSMC表型转换的抑制作用。实施例1...

【技术保护点】
1.一种PDGFR β的磷酸化和PDGFR β下游信号通路的抑制剂，其特征在于，包括阿帕替尼。/n

【技术特征摘要】
1.一种PDGFRβ的磷酸化和PDGFRβ下游信号通路的抑制剂，其特征在于，包括阿帕替尼。


2.根据权利要求1所述的抑制剂，其特征在于，所述抑制剂用于抑制平滑肌表型转换。


3.根据权利要求2所述的抑制剂，其特征在于，所述抑制剂用于预防和/或治疗血管损伤后再狭窄。


4....

【专利技术属性】
技术研发人员：黄恺，陈敏，邵文超，梁明露，胡立志，李晓光，
申请(专利权)人：华中科技大学同济医学院附属协和医院，
类型：发明
国别省市：湖北;42