一种PCV2的IPMA中和抗体检测方法技术

本发明专利技术公开了一种PCV2的IPMA中和抗体检测方法，属于生物技术领域。本发明专利技术公开的一种PCV2的IPMA中和抗体检测方法，细胞反应板可提前制备，可在‑20℃长期保存；反应结果可用荧光显微镜进行观察。IPMA检测具有特异性强、敏感性高、操作简单的特点；且IPMA方法利用活病毒接种，使用的是全病毒，抗原结构更加完整，结果更具有准确性和代表性。

【技术实现步骤摘要】
一种PCV2的IPMA中和抗体检测方法
本专利技术涉及生物
，更具体的说是涉及一种PCV2的IPMA中和抗体检测方法。
技术介绍
猪圆环病毒2型(porcinecircovirustype2,PCV2)是引起仔猪断奶后多系统衰竭综合征(postweaningmultisystemicwastingsyndrome,PMWS)的主要病原，PCV2感染后在猪体内引起免疫抑制，常与猪许多病原并发或继发感染，增加了其防制难度。PCV2相关性疾病(porcinecircovirusassociateddisease,PCVAD)是一组复杂的、多因子疾病，包括PMWS、猪皮炎与肾病综合症(PDNS)、猪呼吸道综合症(PRDC)等等。目前，对PCVAD的诊断标准、致病机理以及针对病毒本身和PCVAD的防制研究还不十分清楚。基于此，建立快速准确的诊断方法和研究其感染机制对PCV2的综合防控具有重要意义。因此，提供一种PCV2的IPMA中和抗体检测方法是本领域技术人员亟需解决的问题。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供了一种本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种PCV2的IPMA中和抗体检测方法，其特征在于，具体步骤如下：/n(1)将PK15细胞消化离心后制备成含1.0×10

【技术特征摘要】
1.一种PCV2的IPMA中和抗体检测方法，其特征在于，具体步骤如下：
(1)将PK15细胞消化离心后制备成含1.0×105cells/mL的细胞悬液，每孔100μL铺到96孔板上，置于37℃5％CO2培养箱中培养12h，待细胞完全贴壁，将等体积的PCV2病毒液和临床血清37℃孵育1h，然后接种到96孔板内的PK15细胞上，培养48h待细胞长满后取出96孔板；同时设立正常接毒细胞对照孔；
(2)用预冷的无水乙醇固定，加入预冷的无水乙醇，每孔50μL，-20℃放置30min；弃去无水乙醇，PBST清洗，拍干；
(3)加入5％的脱脂奶粉进行封闭，每孔200μL，37℃温箱放置2h；PBST清洗，拍干；
(4)加入PCV2阳性抗体，用PBS按照1:400稀释，每孔加入50μL，37℃温箱放...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘兴友，王利平，李鹏，刘长忠，魏小兵，孙国鹏，岳锋，王选年，李红，张艳芳，
申请(专利权)人：新乡学院，
类型：发明
国别省市：河南;41