【技术实现步骤摘要】
三重检测副溶血弧菌的PCR引物组、试剂盒及其检测方法
本专利技术属于生物检测
,具体涉及一种三重检测副溶血弧菌的PCR引物组、试剂盒及其检测方法。
技术介绍
副溶血性弧菌是一种革兰氏阴性嗜盐菌,是海水和江河口环境中的固有微生物。它能通过食物和水引起人类的疾病,同时也对生长在海水和江河口环境中的动物有致病性,包括养殖的动物。副溶血性弧菌广泛存在于各种海产品中,鱼体带菌率约为20%~90%。一般情况下,海产品体内外均带菌,但当海产品作为食品被捕捞后,体外菌体迅速死亡,体内的副溶血性弧菌会很快感染整个海产品。中国水产品出口国主要集中在日本、美国、欧盟和韩国,仅这四大市场就占到了总出口量的85%左右。而这四个国家对进口水产品的安全要求中都明确规定副溶血性弧菌等致病菌一律不得检出。对原产自中国的进口水产品强制性要求进行副溶血性弧菌检测,检测结果为阳性时产品将被就地销毁,这给我国水产品的出口设置了贸易壁垒。目前副溶血性弧菌的分子生物学检测方法主要有PCR技术,包括常规PCR、多重PCR、实时荧光定量PCR等,这些方 ...
【技术保护点】
1.一种三重检测副溶血弧菌的引物组,其特征在于,包含三对引物,分别是AHPND引物上下游引物对分别是SEQ ID NO:1,SEQ ID NO:2;Para引物上下游引物对分别是SEQ IDNO:3,SEQ ID NO:4;弧菌管家基因引物上下游引物对分别是SEQ ID NO:5,SEQ ID NO:6。/n
【技术特征摘要】
1.一种三重检测副溶血弧菌的引物组,其特征在于,包含三对引物,分别是AHPND引物上下游引物对分别是SEQIDNO:1,SEQIDNO:2;Para引物上下游引物对分别是SEQIDNO:3,SEQIDNO:4;弧菌管家基因引物上下游引物对分别是SEQIDNO:5,SEQIDNO:6。
2.三重检测副溶血弧菌的试剂盒,其特征在于,含有以下试剂:
A液:
PCR反应液含2xTaqPCRMix12.5uL、权利要求1所述的三对引物,其中引物对浓度均为10uM;
B液:ddH2O100uL,作为阴性对照。
3.一种检测副溶血弧菌三重PCR检测方法,其特征在于,包括下列步骤:
(一)待测样本的核酸提取
提取待测样本的DNA,-20℃保存;
(二)PCR扩增反应体系
将10×PCR缓...
【专利技术属性】
技术研发人员:许华,李贵阳,张庆利,黄倢,宋晓玲,
申请(专利权)人:中国水产科学研究院黄海水产研究所,
类型:发明
国别省市:山东;37
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