一种生产α-蛇麻烯的重组解脂耶氏酵母菌及其构建方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种生产α‑蛇麻烯的重组解脂耶氏酵母菌及其构建方法和应用，所述重组解脂耶氏酵母菌是在解脂耶氏酵母基因组中插入优化的α‑蛇麻烯合酶编码基因ACHS2和tHMGR编码基因后得到。本发明专利技术重组解脂耶氏酵母菌能够高效合成α‑蛇麻烯，构建方法高效，操作简单，此外本发明专利技术提供的收集产物的方法采用边发酵边萃取的方法，及时的将生产的α‑蛇麻烯萃取至有机相中，缓解了胞内溶解α‑蛇麻烯的压力，有效提高α‑蛇麻烯的产量，为人工细胞合成α‑蛇麻烯奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】
一种生产α-蛇麻烯的重组解脂耶氏酵母菌及其构建方法和应用
本专利技术属于生物工程领域，具体涉及一种生产α-蛇麻烯的重组解脂耶氏酵母及其构建方法和应用。
技术介绍
萜类化合物，又称类异戊二烯，是普遍存在于植物界的一类化合物，包含了超过50000个分子大小、结构和生物功能各异的分子。根据分子中异戊二烯单位的数目将萜类可分为：半萜、单萜、倍半萜、二萜、二倍半萜、三萜、四萜、多萜等。萜类化合物在生命活动中扮演着重要角色，除此之外，萜类化合物在医药、能源、食品等领域具有重要的应用价值。因此在自然界中挖掘这些数目繁多、结构多样的萜类，并实现其广泛的应用价值是非常有必要的。传统萜类化合物的规模化制备主要为植物提取法以及化学合成法。然而，植物提取法受严格的地理和气候条件的限制；而对于大多数结构复杂的萜类化合物，化学合成法往往步骤繁琐，收率低。因此，寻找新的萜类生产途径，是今后萜类工业化生产的必然发展趋势。近年来随着合成生物学的快速发展，以微生物作为底盘细胞来实现萜类化合物的绿色高效转化引起越来越多的关注。α-蛇麻烯(也称为α-石竹烯,α本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生产α-蛇麻烯的重组解脂耶氏酵母菌，其特征在于，所述重组解脂耶氏酵母菌是在解脂耶氏酵母基因组中插入优化的α-蛇麻烯合酶编码基因ACHS2和tHMGR编码基因后得到。/n

【技术特征摘要】
1.一种生产α-蛇麻烯的重组解脂耶氏酵母菌，其特征在于，所述重组解脂耶氏酵母菌是在解脂耶氏酵母基因组中插入优化的α-蛇麻烯合酶编码基因ACHS2和tHMGR编码基因后得到。


2.根据权利要求1所述的生产α-蛇麻烯的重组解脂耶氏酵母菌，其特征在于，所述重组解脂耶氏酵母菌是在解脂耶氏酵母基因组中插入优化的α-蛇麻烯合酶酶编码基因ACHS2的表达盒和tHMGR编码基因表达盒后得到。


3.根据权利要求1所述的生产α-蛇麻烯的重组解脂耶氏酵母菌，其特征在于，所述优化的α-蛇麻烯合酶编码基因如SEQIDNO.1所示；所述tHMGR编码基因如SEQIDNO.2所示。


4.根据权利要求1所述的生产α-蛇麻烯的重组解脂耶氏酵母菌，其特征在于，所述解脂耶氏酵母为YarrowialipolyticaPo1fΔku70。


5.根据权利要求2所述的生产α-蛇麻烯的重组解脂耶氏酵母菌，其特征在于，所述ACHS2表达盒的启动子优选为解脂耶氏酵母的PTEFin启动子、PTEF启动子或PEXP启动子；所述ACHS2终止子为解脂耶氏酵母的TXPR2T终止子、TCYC1t终止子或Tlip1t终止子。


6.根据权利要求2所述的生产α-蛇麻烯的重组解脂耶氏酵母菌，其特征在于，所述tHMGR表达盒的启动子为解脂耶氏酵母的PTEFin启动子、PTEF启动子或PEXP启动子；所述tHMGR终止子为解脂耶氏酵母的TXPR2T终止子、T...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄和，郭琪，施天穹，孙小曼，彭倩倩，
申请(专利权)人：南京师范大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32