盐酸氯丙嗪在制备细胞周期素蛋白抑制剂中的用途制造技术

本发明专利技术提供了盐酸氯丙嗪在制备细胞周期素蛋白抑制剂中的用途。本发明专利技术证明盐酸氯丙嗪能够抑制结直肠癌细胞的增殖，促进其凋亡，在此过程中能明显减少细胞增殖相关的AKT和p44/p42 MAPK蛋白的磷酸化，可以降低结直肠癌细胞中细胞周期相关的cyclin D1,cyclin B1,cdc2,cdc25c,cyclin E,cyclin A2,c‑Myc的表达，增加p‑cdc(Tyr15)和p21的表达，可以降低CT26、HCT116两种细胞中细胞凋亡相关的pro‑caspase 3，Bcl2的表达，增加细胞凋亡相关的cleaved caspase 3，Bax和p53的表达。盐酸氯丙嗪不仅能够用于制备细胞周期素蛋白抑制剂，还能用于制备治疗癌症的药物，特别是治疗结直肠癌的药物，具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
盐酸氯丙嗪在制备细胞周期素蛋白抑制剂中的用途
本专利技术属于医药领域，具体涉及盐酸氯丙嗪在制备细胞周期素蛋白抑制剂中的用途。
技术介绍
细胞周期素蛋白又称细胞周期素，是细胞周期调节分子，这类蛋白质通过活化周期蛋白依赖激酶调节细胞周期各时相的转换与进行。细胞周期的主要周期素有：cyclinA,cyclinB,cyclinD及cyclinE。在G1期→S期调控蛋白为细胞周期蛋白D1(cyclinD1)以及细胞周期蛋白E(cyclinE)，s期→G2期调控蛋白为细胞周期蛋白A(cyclinA)，G2期→M期调控蛋白为细胞周期蛋白B(cyclinB)。结直肠癌是全世界癌症死亡的主要原因，每年造成大约83万人死亡。治疗结直肠癌的主要治疗方法包括手术切除、化疗、放疗、靶向治疗以及免疫治疗。虽然近些年结直肠癌的治疗有很多进步，但是对于更有效的治疗结直肠癌的方法还是有很大的需求。结直肠癌的治疗方式中，对于没有发生远处转移的早期结直肠癌，根治性手术切除是主要的治疗手段。化疗药物主要包括5-FU、甲酰四氢叶酸钙、卡培他滨、奥沙利铂、伊立替康等，但是化疗与放疗都存在骨髓毒性、消化道毒性等明显的毒副作用，且很多病人对治疗不响应或者耐药等。近年来，一些靶向药物也开始用于治疗结直肠癌，如靶向表皮生长因子受体(EGFR)的西妥昔单抗和帕尼单抗、针对血管内皮生长因子受体(VEGFR)的贝伐单抗、阿柏西普，以及蛋白激酶抑制剂瑞戈非尼等，它们给晚期结直肠癌患者带来了一些生存获益，提高了临床疗效。免疫治疗也正在被用于结直肠癌的治疗上，比如免疫检查点抑制剂PD-1单抗Pembrolizumab和Nivolumab被推荐用于具有dMMR(错配修复蛋白缺失)/MSI-H(高度的微卫星不稳定性)分子表型的结直肠癌的末线治疗。但是这些靶向治疗和免疫治疗也存在价格昂贵、病人对治疗不响应以及治疗耐药等问题。因此，需要有更多的有可能成为临床治疗结直肠癌的药物被开发出来。盐酸氯丙嗪是一个噻嗪类中枢多巴胺受体的阻断剂，可用于精神分裂症、躁狂症或其他精神病性障碍的治疗，还可以用于治疗各种原因所致的呕吐。但将其用于治疗结直肠癌的报道几乎没有。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供盐酸氯丙嗪在制备细胞周期素蛋白抑制剂中的用途。本专利技术提供了盐酸氯丙嗪在制备细胞周期素蛋白抑制剂中的用途。进一步地，所述细胞周期素蛋白为cyclinD1、cyclinB1、cyclinE、cyclinA2。进一步地，所述抑制剂用于降低cdc2、cdc25c、c-Myc的表达；和/或，增加p-cdc(Tyr15)、p21的表达。进一步地，所述抑制剂用于制备治疗癌症的药物；优选地，所述癌症为结直肠癌。进一步地，所述药物为抑制结直肠癌细胞增殖的药物；和/或，所述药物为诱导结直肠癌细胞凋亡的药物。进一步地，所述药物为降低结直肠癌细胞增殖相关的AKT蛋白、p44/p42MAPK蛋白的磷酸化的药物。进一步地，所述药物为引起结直肠癌细胞G2/M周期阻滞的药物。进一步地，所述药物为降低细胞凋亡相关的pro-caspase3，Bcl2的表达，增加细胞凋亡相关的cleavedcaspase3，Bax和P53的表达的药物。进一步地，所述药物是以盐酸氯丙嗪为活性成分，加入药学上可接受的辅料和/或辅助性成分制备而成的制剂。进一步地，所述制剂为注射制剂。体外实验表明，盐酸氯丙嗪能以浓度和时间依赖的方式抑制小鼠结直肠癌细胞(CT26)、人结直肠癌细胞(HCT116和SW620)的增殖，也能够抑制HCT116和SW620细胞在6孔板里面形成克隆的能力，并使得细胞增殖相关的AKT和p44/p42MAPK蛋白的磷酸化减少。盐酸氯丙嗪还能以浓度和时间依赖的方式诱导结直肠癌细胞CT26和HCT116发生G2/M细胞周期阻滞，并降低细胞周期相关的cyclinD1,cyclinB1,cdc2,cdc25c,cyclinE,cyclinA2,c-Myc的表达，增加p-cdc(Tyr15)和p21的表达。此外，盐酸氯丙嗪还可以诱导结直肠癌细胞发生凋亡，降低细胞凋亡相关的pro-caspase3，Bcl2的表达，增加细胞凋亡相关的cleavedcaspase3，Bax和P53的表达。盐酸氯丙嗪也能降低CT26和HCT116的线粒体膜电位并增加细胞胞内活性氧含量。动物实验进一步证明，盐酸氯丙嗪能够明显抑制裸鼠体内人HCT116结直肠癌皮下瘤和Balb/c小鼠体内CT26皮下瘤的生长，并降低小鼠皮下肿瘤内肿瘤细胞的增殖(Ki67阳性细胞比例降低)，增加小鼠皮下肿瘤内肿瘤细胞的凋亡(cleavedcaspase3阳性染色细胞比例增加)。而且，相比于结直肠癌细胞，盐酸氯丙嗪对人正常肠上皮细胞和小鼠胚胎成纤维细胞的毒性较小，盐酸氯丙嗪的体内给药也对小鼠的体重没有产生明显的降低，因此安全性良好。综上所述，本专利技术发现了盐酸氯丙嗪具有潜在的抑制细胞周期素蛋白表达和治疗结直肠癌的作用，盐酸氯丙嗪不仅能够用于制备细胞周期素蛋白抑制剂，还能用于制备治疗结直肠癌的药物，具有显著的临床和社会意义。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。附图说明图1为实施例1盐酸氯丙嗪对人结直肠癌细胞SW620细胞增殖抑制率图。图2为实施例1盐酸氯丙嗪对人结直肠癌细胞HCT116细胞增殖抑制率图。图3为实施例1盐酸氯丙嗪对小鼠结直肠癌细胞CT26细胞增殖抑制率图。图4为实施例1盐酸氯丙嗪对人结肠上皮细胞HCoEpiC细胞增殖抑制率图。图5为实施例1盐酸氯丙嗪对小鼠胚胎成纤维细胞NIH-3T3细胞增殖抑制率图。图6为实施例1盐酸氯丙嗪对人结直肠癌细胞SW620和HCT116细胞克隆形成抑制图。图7为实施例1盐酸氯丙嗪对人结肠上皮细胞HCoEpiC和小鼠胚胎成纤维细胞NIH-3T3细胞克隆形成抑制图。图8为实施例1盐酸氯丙嗪对人结直肠癌细胞HCT116和小鼠结直肠癌细胞CT26的细胞增殖相关的AKT和p44/p42MAPK蛋白的磷酸化的影响图。图9为实施例2盐酸氯丙嗪对小鼠结直肠癌细胞CT26细胞周期的影响图。图10为实施例2盐酸氯丙嗪对人结直肠癌细胞HCT116细胞周期的影响图。图11为实施例2盐酸氯丙嗪对小鼠结直肠癌细胞CT26细胞周期相关蛋白表达的影响图。图12为实施例2盐酸氯丙嗪对人结直肠癌细胞HCT116细胞周期相关蛋白表达的影响图。图13为实施例3盐酸氯丙嗪对小鼠结直肠癌细胞CT26和人结直肠癌细胞HCT116凋亡的流式结果图。图14为实施例3盐酸氯丙嗪对小鼠结直肠癌细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.盐酸氯丙嗪在制备细胞周期素蛋白抑制剂中的用途。/n

【技术特征摘要】
1.盐酸氯丙嗪在制备细胞周期素蛋白抑制剂中的用途。


2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述细胞周期素蛋白为cyclinD1、cyclinB1、cyclinE、cyclinA2。


3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述抑制剂用于降低cdc2、cdc25c、c-Myc的表达；和/或，增加p-cdc(Tyr15)、p21的表达。


4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述抑制剂用于制备治疗癌症的药物；优选地，所述癌症为结直肠癌。


5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于：所述药物为抑制结直肠癌细胞增殖的药物；和/或，所述药物为诱导结直肠癌细胞凋亡的药物。


6.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏勇，
申请(专利权)人：四川大学华西医院，
类型：发明
国别省市：四川;51