一种酿酒酵母绝对定量的探针及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种酿酒酵母绝对定量的探针及其应用，属于生物领域、发酵领域、检测领域。本发明专利技术的酿酒酵母定量探针和试剂盒，能够实现酿酒酵母的总量检测，用于检测和酿酒酵母定量时不需要使用昂贵仪器，可在2.5h内快速完成定量工作。同时，本发明专利技术所使用的样品不必须进行核酸提取。基于本发明专利技术的探针、检测试剂盒用于酿酒酵母定量，具有快速、方便、便宜、准确的特点。的特点。的特点。

【技术实现步骤摘要】
一种酿酒酵母绝对定量的探针及其应用


[0001]本专利技术涉及一种酿酒酵母绝对定量的探针及其应用，属于生物领域、发酵领域、检测领域。

技术介绍

[0002]酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)具有悠久的食品发酵使用历史，被广泛应用于酒精类食品的生产过程，例如中国白酒、葡萄酒、白兰地、朗姆酒等。发酵过程中酒精的生产效率决定了工业化生产的效益，同时酒精属于初级代谢产物，发酵过程中酒精随着酿酒酵母的生长而代谢积累，因此实时跟踪酿酒酵母的生物量对判断发酵批次稳定性以及发酵参数调控具有重要的指导意义。但目前传统发酵食品体系多多数是多菌种共发酵体系，通过简单的OD比色法无法判断样本中酿酒酵母的含量，虽然荧光定量PCR法结合特异性引物或探针可以实现混菌系统中酿酒酵母的定量，但是需要高额的设备和高要求的操作环境。因此，为方便、快速、准确地跟踪样本中酿酒酵母的生长变化趋势，有必要开发相应的酿酒酵母定量方法以及试剂盒。
[0003]G四链体/血红素模拟酶活检测的原理在于G四链体可以与血红素形成具有过氧化氢酶活性的DNA模拟酶，可催化本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一组探针，其特征在于，包括信号探针和淬灭探针；信号探针序列包括SEQ ID NO.1所示序列；淬灭探针序列包括SEQ ID NO.2所示的序列。2.检测试剂盒，其特征在于，含有权利要求1所述的信号探针和淬灭探针。3.根据权利要求2所述的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还含有如下任意一种或多种：血红素、缓冲液、2,2
‑
连氮基
‑
双
‑
(3
‑
乙基苯并二氢噻唑啉
‑6‑
磺酸)二铵盐、H2O2。4.一种酿酒酵母定量方法，其特征在于，所述方法使用了权利要求1所述的探针，或者权利要求2
‑
3任一所述的检测试剂盒。5.根据权利要求4所述的定量方法，其特征在于，所述方法包括：待测样品中DNA发生解链；加入过量信号探针，与待测样本的目标核苷酸片段结合形成双链，使G四链体裸漏在序列之外；加入足量淬灭探针与未结合的信号探针形成双链，破坏G四链体结构；利用裸漏在外G四链体与血红素反应形成具有过氧化氢酶活性的G四链体/血红素模拟酶，结合过氧化氢酶的活性表征酿酒酵母的生物量。6.根据权利要求4所述的定量方法，其特征在于，所述方法为绝对定量或者相对定量；可选地，所述方法为绝对定量时，还包括：建立过氧化氢酶活性或者与过氧化氢酶活性呈相关性的指标，与酿酒酵母的生物量的标准曲线；检测待测样品时...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴群，徐岩，杜如冰，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：