一种乳中母乳低聚糖的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种乳中母乳低聚糖的检测方法，包括如下步骤：A)将乳样品采用沉淀剂沉淀蛋白，过滤，得到试样溶液；B)将试样溶液采用滤膜和净化柱净化处理，得到待测液；C)将待测液采用阴离子交换色谱进行测定，得到乳中母乳低聚糖的含量。本发明专利技术提供的采用沉淀剂沉淀蛋白，而后过滤和净化处理后，采用离子交换色谱测定乳中母乳低聚糖，前处理方法简单，快速，定量准确，结果稳定可靠。

【技术实现步骤摘要】
一种乳中母乳低聚糖的检测方法
本专利技术涉及分析检测
，尤其是涉及一种乳中母乳低聚糖的检测方法。
技术介绍
母乳低聚糖(humanmilkoligosaccharides，HMOs)是人类母乳中的第三大固体组分，仅次于乳糖和脂肪，其具有重要的生物学功能，不仅对肠道病原微生物起到抗感染的作用，还能维持肠道微生态的平衡。目前FDA和EFSA已批准2’-FL和LNnT在婴儿配方食品中使用，新西兰预计2020年批准2’-FL在婴儿配方食品中单独使用或与LNnT联合使用，国内也在积极推进法规。开发含HMOs婴配粉并进行质量控制，必须建立乳粉中母乳低聚糖的准确的定量检测方法。目前HMOs的定量测定方法有高效液相色谱法、超高效液相色谱法-荧光检测法(UHPLC-FLD)、液相色谱-质谱/质谱(LC-MS/MS)、多孔石墨化碳-液相色谱-质谱/质谱(PCG-LC-MS/MS)毛细管电泳-电喷雾电离-质谱/质谱(CE-ESI-MS/MS)、高效阴离子交换色谱-脉冲电化学检测法(HPAEC-PAD)等，但大多数方法测定的目标样本是母乳，奶粉中母乳低聚本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种乳中母乳低聚糖的检测方法，包括如下步骤：/nA)将乳样品采用沉淀剂沉淀蛋白，过滤，得到试样溶液；/nB)将试样溶液采用滤膜和净化柱净化处理，得到待测液；/nC)将待测液采用阴离子交换色谱进行测定，得到乳中母乳低聚糖的含量。/n

【技术特征摘要】
1.一种乳中母乳低聚糖的检测方法，包括如下步骤：
A)将乳样品采用沉淀剂沉淀蛋白，过滤，得到试样溶液；
B)将试样溶液采用滤膜和净化柱净化处理，得到待测液；
C)将待测液采用阴离子交换色谱进行测定，得到乳中母乳低聚糖的含量。


2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述母乳低聚糖为3’-唾液酸乳糖、6’-唾液酸乳糖和乳糖-N-四糖中一种或多种。


3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述乳样品包括液态乳或将乳粉溶于水得到的乳粉溶液。


4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤A)所述沉淀剂为酸溶液或有机溶剂；所述酸溶液为磺基水杨酸溶液或醋酸溶液，所述有机溶剂为乙醇或乙腈；优选的，所述沉淀剂为磺基水杨酸溶液；更优选的，所述磺基水杨酸溶液的浓度为1～5wt％。


5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤A)所述乳样品和沉淀剂的质量比为1:1～1:2。


6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤A)所述过滤之前还包括采用超声提取或振荡提取，优选地，所述超声提取或振荡提取的时间为5～15min。


7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤B)所述滤膜为0.45μm滤膜；所述净化柱为DionexOnGuardIIRP净化柱；所述净化柱的规格为1mL或2.5mL；所述净化柱依次采用甲醇和水进行活化。


8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤C)所述阴离子交换色谱的色谱柱为DIONEXCarboPacTMPA1柱或DionexCarboPacPA20；检测器为电化学检测器；流动相流速为0.8～1.0mL/min，柱温为30-35℃，进样体积为10～50μL。


9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤C)所述阴离子交换色谱的流动相为A为去离子水，B为NaOH溶液，C为NaAc和NaOH混合溶液，D为NaAc溶液。


10.根据权利要求9所述的检测方法，其特征在于，流动相B为200～250mmol/L的NaOH溶液；C为1.0mol/LNaAc和100mmol/LNaOH溶液，D为90-100mmol/L的NaAc溶液。


11.根据权利要求10所述的检测方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：喻斌斌，叶文慧，刘彪，张立君，周名桥，
申请(专利权)人：内蒙古伊利实业集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：内蒙古;15