一种动物血液连续分离方法技术

本发明专利技术公开了一种动物血液连续分离方法，包括以下步骤：S1.采血：收集动物血液并加入抗凝剂；S2.血液分管：将S1处理后的血液分别加入两组试管中，得第一血液、第二血液；S3.提取动物血液中的DNA；S4.提取动物血液中的超氧化物歧化酶。本发明专利技术在对血液进行DNA提取和超氧化物歧化酶提取时，通过先对血液进行分管处理，得第一血液和第二血液，然后在分别对第一血液和第二血液单独进行分离，从而降低了两者之间的影响，增加了提取的纯度。

【技术实现步骤摘要】
一种动物血液连续分离方法
本专利技术属于动物血液分离
，具体涉及一种动物血液连续分离方法。
技术介绍
血液是流动在动物的血管和心脏中的一种红色不透明的黏稠液体。血液由血浆和血细胞组成，一升血浆中含有900—910克的水，65—85克的蛋白质和20克的低分子物质，低分子物质中有多种电解质和有机化合物，血细胞包括红细胞和白细胞和血小板三类细胞。红细胞平均寿命为120天，白细胞寿命为9—13天，血小板寿命为8—9天。血液的功能包含血细胞功能和血浆功能两部分，有运输、调节人体温度、防御、调节人体渗透压和酸碱平衡四个功能。目前现有的动物血液连续分离方法还存在一些问题：在提取DNA和超氧化物歧化酶时，没有对血液进行单独处理，两者之间的操作可能存在相互影响，降低了提取的纯度，为此我们提出一种动物血液连续分离方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种动物血液连续分离方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种动物血液连续分离方法，包括以下步骤：>S1.采血：收集动本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种动物血液连续分离方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1.采血：收集动物血液并加入抗凝剂；/nS2.血液分管：将S1处理后的血液分别加入两组试管中，得第一血液、第二血液；/nS3.提取动物血液中的DNA；/nS4.提取动物血液中的超氧化物歧化酶；所述S1中的抗凝剂的制备方法包括以下步骤：/n步骤一、分别量取肝素钠和蒸馏水，然后将肝素钠充分溶于蒸馏水中，得抗凝剂母液；/n步骤二、用1ml注射器稀释所述抗凝剂母液，得待烘抗凝剂稀释液；/n步骤三、用所述1ml注射器向5ml注射器内定量注入所述待烘抗凝剂稀释液；/n步骤四、将装有所述待烘抗凝剂稀释液的所述5ml注射器在35-65℃下烘干，得抗...

【技术特征摘要】
1.一种动物血液连续分离方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.采血：收集动物血液并加入抗凝剂；
S2.血液分管：将S1处理后的血液分别加入两组试管中，得第一血液、第二血液；
S3.提取动物血液中的DNA；
S4.提取动物血液中的超氧化物歧化酶；所述S1中的抗凝剂的制备方法包括以下步骤：
步骤一、分别量取肝素钠和蒸馏水，然后将肝素钠充分溶于蒸馏水中，得抗凝剂母液；
步骤二、用1ml注射器稀释所述抗凝剂母液，得待烘抗凝剂稀释液；
步骤三、用所述1ml注射器向5ml注射器内定量注入所述待烘抗凝剂稀释液；
步骤四、将装有所述待烘抗凝剂稀释液的所述5ml注射器在35-65℃下烘干，得抗凝剂；所述步骤二具体为：先用蒸馏水将所述抗凝剂母液稀释，然后用1ml注射器定量吸取稀释后的所述抗凝剂母液，再吸取蒸馏水至1ml，得所述待烘抗凝剂稀释液；所述步骤三之后、所述步骤四之前还包括：旋转所述5ml注射器，使所述待烘抗凝剂稀释液均匀附着于所述5ml注射器的管壁之上；所述S3种提取动物血液中的DNA的具体步骤包括：
步骤一、取第一血液；
步骤二、血液稀释：在第一血液样本中加入KCl溶液，第一血液与KCl溶液的体积比为1：5，颠倒混匀；
步骤三、去除红细胞：向步骤二中的溶液中加入与第一血液体积相同的甲醇-乙酸混合液，颠倒混匀，离心弃上清，得到残留细胞团；向细胞团中加入5倍第一血液体积的甲醇-乙酸混合液，吹散混匀，离心弃上清，重复2-3次，直至上清液变无色；
步骤四、裂解白细胞沉淀蛋白：将得到的细胞团转入2ml微量离心管中，加入适量的双蒸水混匀，离心弃上清，加入细胞裂解液0.5ml、12μl浓度为222mg/ml的蛋白酶K，60℃孵育4小时；再加入120μl6M的乙酸铵混匀、离心；所述细胞裂解液是0.02MTris-HCl、1.2mMEDTA、1.5％SDS的混合液；
步骤五、分离纯化DNA：用无水乙醇沉淀DNA，并用72％乙醇洗涤沉淀；所述步骤五分离纯化DNA是吸取0.4ml上清液，加入2倍体积的预冷无水乙醇，轻轻混匀，待出现絮状沉淀后，离心弃上清；再加入1.5ml72％乙醇洗涤沉淀，离心弃上清；干燥沉淀，加入25-55μlTE溶解DNA。


2.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：任春阳，谢羽绒，
申请(专利权)人：南京泽维尔生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32