【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于进行定量实时PCR的反应混合物、方法和试剂盒本专利技术涉及反应混合物，其提供用于进行定量实时PCR的反应批次，以及涉及用于进行定量实时PCR的方法和涉及试剂盒。现有技术聚合酶链反应（PCR）是一种非常灵敏的生物分析方法。借助于酶，即DNA聚合酶，基于作为模板的DNA序列扩增DNA。在此，在各个循环中形成的产物用作各自下一个循环的模板。待复制的DNA在此被称为模板（模板DNA）。此外，需要所谓的引物，其在DNA的单链上分别规定DNA合成的起点。DNA合成在使用脱氧核苷酸的情况下通过温度稳定的DNA聚合酶被催化。对于各个PCR循环，首先进行双链DNA变性（解链），然后再进行引物杂交，即引物可结合到单链DNA的互补序列片段上（引物退火）。接着，DNA聚合酶附着，并且在所谓的延伸步骤（延伸）中发生引物的互补延伸。这些各个步骤由温度循环来控制。PCR的一个实施方案是实时PCR（qPCR），在其中可以借助于荧光探针来追踪反应进程。在此，实时PCR允许定量模板DNA的起始量。通常，为此需要在并行反应批次中随同进行的参比测量。除定量参比测量外，在...
【技术保护点】
1.反应混合物，其提供用于进行定量实时PCR的反应批次以定量至少一种DNA片段（20；30；90），其特征在于，所述反应混合物包含/n-至少一种靶DNA（11；21），其至少部分与待定量的DNA片段（20；30；90）对应，和/n-至少一种参比DNA（12；22），其具有特定的序列和特定的量，和/n-至少两种具有不同序列的不同荧光探针，它们在不同波长下生成信号，和/n-引物和脱氧核苷酸和DNA聚合酶，/n并且其中，靶DNA（11；21）和参比DNA（12；22）具有相同的引物结合位点（13、14；23、24）和不同的探针结合位点（17、18；27、28），并且其中，所述荧光...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180803 DE 102018213027.21.反应混合物，其提供用于进行定量实时PCR的反应批次以定量至少一种DNA片段（20；30；90），其特征在于，所述反应混合物包含
-至少一种靶DNA（11；21），其至少部分与待定量的DNA片段（20；30；90）对应，和
-至少一种参比DNA（12；22），其具有特定的序列和特定的量，和
-至少两种具有不同序列的不同荧光探针，它们在不同波长下生成信号，和
-引物和脱氧核苷酸和DNA聚合酶，
并且其中，靶DNA（11；21）和参比DNA（12；22）具有相同的引物结合位点（13、14；23、24）和不同的探针结合位点（17、18；27、28），并且其中，所述荧光探针的至少一种被设置用于与引物结合位点（13、14；23、24）之外的靶DNA片段（17；27）结合并且所述荧光探针的至少一种被设置用于与引物结合位点（13、14；23、24）之外的参比DNA片段（18；28）结合。
2.根据权利要求1所述的反应混合物，其特征在于，靶DNA（11；21）的GC含量和参比DNA（12；22）的GC含量以至多15％的偏差是相同的。
3.根据权利要求1或权利要求23所述的反应混合物，其特征在于，靶DNA（11；21）和参比DNA（12；22）的碱基对长度以至多15％的偏差是相同的。
4.根据前述权利要求中任一项所述的反应混合物，其特征在于，靶DNA（11；21）和/或参比DNA（12；22）和/或引物和/或脱氧核苷酸和/或DNA聚合酶以冻干形式被提供。
5.根据前述权利要求中任一项所述的反应混合物，其特征在于，参比DNA（12；22）的量以与待定量的DNA片段（20；30；90）的检测极限对应的浓度存在。
6.根据前述权利要求中任一项所述的反应混合物，其特征在于，所述方法被设置用于检测和任选地定量来自基因组的DNA片段（20），其中，靶DNA（11）和参比DNA（12）以1:1的比率以特定的量包含在所述反应批次中。
7.用于进行定量实时PCR的方法，其特征在于，使用至少一种根据权利要求1至6中任一项所述的反应混合物进行PCR过程，并且其中，添加具有待定量的DNA片段（20）的样品，并且其中，检测所述至少两种荧光探针的荧光信号。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，由所述荧光探针的信号的比率来确定测试结果。
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【专利技术属性】
技术研发人员：S·库尔默，T·弗兰克，
申请(专利权)人：罗伯特·博世有限公司，
类型：发明
国别省市：德国;DE
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