玉米转基因事件MON 95379及其检测方法和用途技术

本发明专利技术提供了一种转基因玉米事件MON 95379，包含事件MON 95379的植物、植物细胞、种子、植物部分、后代植物和商品产品。本发明专利技术还提供了对事件MON 95379具有特异性的多核苷酸，及使用和检测事件MON 95379的方法以及包含事件MON 95379的植物、植物细胞、种子、植物部分、后代植物和商品产品。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】玉米转基因事件MON95379及其检测方法和用途相关申请的引用本申请要求于2018年7月30日提交的美国临时申请号62/711,810的权益，所述申请以引用的方式整体并入本文。序列表的并入名称为MONS463WO_ST25的文件中所含有的序列表为75千字节(在Microsoft中测得)，创建于2019年7月26日，以电子方式一起提交并且以引用的方式并入。
本专利技术涉及存在于玉米事件MON95379中和/或从中分离的重组DNA分子。本专利技术还涉及含有玉米事件MON95379的转基因玉米植物、植物部分和种子、细胞和农产品，以及使用它们并检测玉米事件MON95379的存在的方法。含有玉米事件MON95379DNA的转基因玉米植物、部分、种子和细胞表现出对鳞翅目家族的昆虫侵染的抗性。
技术介绍
玉米(玉蜀黍)是重要的农作物，并且是世界许多地区的主要食物来源。生物技术方法已应用于玉米，用来改善农艺性状和产品质量。一种这样的农艺性状是昆虫抗性，其通过插入玉米植物基因组中的异源昆虫毒素(也称为转基因)的表达来实现。这种转基因在转基因植物、植物部分、种子或细胞中的表达可能受许多不同因素的影响，这些因素包括驱动转基因表达的盒中所用的元件以及盒中那些元件之间的相互作用。对于包含两个或更多个表达盒的转基因插入，这进一步复杂化，其中每个表达盒具有赋予单独性状的转基因，这也称为多基因转基因事件。商业上有用的多基因转基因事件要求转基因插入中的每个转基因以对每种性状必需的方式表达。为此，首先在植物中设计并测试单个表达盒，然后针对每种性状选择表现出最佳昆虫活性而不会由于表达而导致阴性表型的表达盒。接下来，将针对一种性状的所选表达盒与针对另一种性状的所选表达盒组合成单个构建体。使用不同取向设计多个构建体，以提供最佳抗性并防止出现阴性表型或负面农艺学，诸如降低产量。测试构建体以确保所有表达盒一起良好发挥功能，并且正确表达每个转基因。然后，将表达盒的选定组合和取向用作单个转基因插入物以产生数百个转基因事件，每个事件是在不同基因组位置随机插入构建体的结果。每个转基因事件在其分子谱和染色体插入点方面都是独特的。由于事件创建中涉及的可变性，每个独特的事件都必须经过多代植物来分析-在每个步骤中评估分子特征、蛋白质表达功效和农艺学-以便选出用于商业用途的优良事件。事件在转基因植物、植物部分、种子或细胞中的表现及其有效性可能受到转基因插入的基因组位置的影响。具体地，相对于整合位点或染色质结构，顺式和/或反式因素会影响事件的有效性。事件可以具有相同的转基因插入，但是在各种种质中或在特定的生长条件下，跨组织和发育阶段具有不同的转基因表达水平和表现。在一些事件之间也可能存在不希望有的表型或农艺差异。因此，有必要产生和分析大量的单个植物转化事件，以便选择相对于所需性状具有优良特性的事件，以及使其适于商业目的所需的最佳表型和农业特征。此外，要创建用于商业用途的多基因事件，需要经过多年来在多个地点和多种条件下的严格的分子表征、温室测试和田间试验，因此可以收集广泛的农艺、表型和分子数据。科学家和农艺师随后必须对所生成的数据进行分析，以选出用于商业目的事件。一旦被选出，则可以使用植物育种方法将这种事件作为具有多个昆虫抗性性状的单个基因座渗入适于特定局部生长条件的新种质中，并通过与赋予与本专利技术的事件所赋予的性状不同的性状的其他不同的事件进行育种而堆叠/组合。
技术实现思路
本专利技术提供了一种新型转基因玉米事件-MON95379，其提供对玉米鳞翅目害虫的杀虫控制。本专利技术还提供了包含事件MON95379的转基因植物、植物细胞、种子、植物部分和商品产品。在另一个实施方案中，本专利技术提供了对事件MON95379具有特异性的多核苷酸以及包含事件MON95379的植物、植物细胞、种子、植物部分、后代植物和商品产品。在又一个实施方案中，提供了与事件MON95379有关的方法。因此，一方面，本专利技术提供了一种重组DNA分子，其包含选自由以下组成的组的核苷酸序列：SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6、SEQIDNO:7、SEQIDNO:8、SEQIDNO:9、SEQIDNO:10及其完整互补序列。在一个实施方案中，重组DNA分子源自种子样品中的玉米事件MON95379，所述种子样品包含已以ATCC登录号PTA-125027寄存的所述事件。本专利技术的另一方面提供了一种DNA分子，其包含足够长的多核苷酸区段以用作DNA探针，该DNA探针在严格的杂交条件下与样品中的玉米事件MON95379DNA特异性杂交，其中检测到在所述严格的杂交条件下所述DNA分子的杂交可诊断所述样品中玉米事件MON95379DNA的存在。在某些实施方案中，样品包括玉米植物、玉米植物细胞、玉米种子、玉米植物部分、玉米后代植物、经过加工的玉米种子、包含玉米的动物饲料、玉米油、玉米面、玉米粉、玉米片、玉米糠、由玉米制成的面食、玉米生物质以及使用玉米和玉米部分生产的燃料产品。本专利技术的又一方面提供了一种DNA分子对，其包含第一DNA分子和不同于第一DNA分子的第二DNA分子，当与包含玉米事件MON95379模板DNA的样品一起用于扩增反应中时，这对DNA分子充当DNA引物，以产生可诊断所述样品中所述玉米事件MON95379DNA的存在的扩增子，其中所述扩增子包含选自由以下组成的组的核苷酸序列：SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6、SEQIDNO:7、SEQIDNO:8、SEQIDNO:9和SEQIDNO:10。本专利技术的另一个实施方案是一种检测样品中可诊断玉米事件MON95379DNA的DNA区段的存在的方法，所述方法包括：a)使样品与充当探针并在严格的条件下与玉米事件MON95379特异性杂交的DNA分子接触；b)使所述样品和所述DNA分子经受严格的杂交条件；及c)检测所述样品中所述DNA分子与所述DNA的杂交，其中所述检测可诊断所述玉米事件MON95379DNA在所述样品中的存在。本专利技术的又一个实施方案是一种检测样品中可诊断玉米事件MON95379DNA的DNA区段的存在的方法，所述方法包括：a)使所述样品与本专利技术的DNA分子对接触；b)进行足以产生DNA扩增子的扩增反应；及c)检测所述反应中所述DNA扩增子的存在，其中所述DNA扩增子包含选自由以下组成的组的核苷酸序列：SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6、SEQIDNO:7、SEQIDNO:8、SEQIDNO:9和SEQIDNO:10。本专利技术的另一个实施方案是一种玉米植物、玉米植物部分、玉米细胞或其部分，其包含重组多核苷酸分子，所述重组多核苷酸分子包含选自由以下组成的组的核苷酸序列：SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQI本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种重组DNA分子，其包含选自由以下组成的组的核苷酸序列：SEQ ID NO:1、SEQ IDNO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10及其完整互补序列。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180730 US 62/711,8101.一种重组DNA分子，其包含选自由以下组成的组的核苷酸序列：SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6、SEQIDNO:7、SEQIDNO:8、SEQIDNO:9、SEQIDNO:10及其完整互补序列。


2.如权利要求1所述的重组DNA分子，其中所述重组DNA分子源自玉米事件MON95379，包含所述事件的种子的代表性样品已经以ATCC登录号PTA-125027寄存。


3.一种DNA分子，其包含足够长的多核苷酸区段以用作DNA探针，所述DNA探针在严格的杂交条件下与样品中的玉米事件MON95379DNA特异性杂交，其中检测到在所述严格的杂交条件下所述DNA分子的杂交可诊断所述样品中玉米事件MON95379DNA的存在。


4.如权利要求3所述的DNA分子，其中所述样品包括玉米植物、玉米植物细胞、玉米种子、玉米植物部分、玉米后代植物、经过加工的玉米种子、包含玉米的动物饲料、玉米油、玉米面、玉米粉、玉米片、玉米糠、由玉米制成的面食、玉米生物质以及使用玉米和玉米部分生产的燃料产品。


5.一种DNA分子对，其包含第一DNA分子和不同于所述第一DNA分子的第二DNA分子，当它们与含有玉米事件MON95379模板DNA的样品一起用于扩增反应中时，充当DNA引物，以产生可诊断所述样品中所述玉米事件MON95379DNA的存在的扩增子，其中所述扩增子包含选自由以下组成的组的核苷酸序列：SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6、SEQIDNO:7、SEQIDNO:8、SEQIDNO:9和SEQIDNO:10。


6.一种检测样品中可诊断玉米事件MON95379DNA的DNA区段的存在的方法，所述方法包括：
a)使所述样品与如权利要求3所述的DNA分子接触；
b)使所述样品和所述DNA分子经受严格的杂交条件；及
c)检测所述DNA分子与所述样品中所述DNA的杂交，
其中所述检测可诊断所述样品中所述玉米事件MON95379DNA的存在。


7.一种检测样品中可诊断玉米事件MON95379DNA的DNA区段的存在的方法，所述方法包括：
a)使所述样品与如权利要求5所述的DNA分子对接触；
b)进行足以产生DNA扩增子的扩增反应；及
c)检测所述反应中所述DNA扩增子的存在，
其中所述DNA扩增子包含选自由以下组成的组的核苷酸序列：SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6、SEQIDNO:7、SEQIDNO:8、SEQIDNO:9和SEQIDNO:10。


8.一种玉米植物、玉米植物部分、玉米细胞或其部分，其包含重组多核苷酸分子，所述重组多核苷酸分子包含选自由以下组成的组的核苷酸序列：SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6、SEQIDNO:7、SEQIDNO:8、SEQIDNO:9和SEQIDNO:10。


9.如权利要求8所述的玉米植物、玉米植物部分、玉米细胞或其部分，其中当在鳞翅目昆虫害虫的饮食中提供时，所述玉米植物、玉米植物部分、玉米细胞或其部分是杀虫的。


10.如权利要求9所述的玉米植物、玉米植物部分、玉米细胞或其部分，其中所述鳞翅目昆虫害虫选自由以下组成的组：秋夜蛾(草地贪夜蛾)、玉米穗蛾(棉铃虫)、西南玉米蛀虫(西南玉米螟)、甘蔗蛀虫(蔗螟)和小玉米秆蛀虫(小玉米螟)。


11.如权利要求8所述的玉米植物、玉米植物部分、玉米细胞或其部分，其中所述玉米植物进一步被限定为包含所述玉米事件MON95379的玉米植物任何一代的后代。


12.一种保护玉米植物免受昆虫侵染的方法，其中所述方法包括在鳞翅目昆虫害虫的饮食中提供杀虫有效量的包含玉米事件MON95379的玉米植物的细胞或组织。


13.如权利要求12所述的方法，其中所述鳞翅目昆虫害虫选自由以下组成的组：秋夜蛾(草地贪夜蛾)、玉米穗蛾(棉铃虫)、西南玉米蛀虫(西南玉米螟)、甘蔗蛀虫(蔗螟)和小玉米秆蛀虫(小玉米螟)。


14.一种产生昆虫抗性玉米植物的方法，所述方法包括：
a)使两种不同的玉米植物进行有性杂交，其中所述两种不同的玉米植物中的至少一种包含转基因玉米事件MON95379DNA；
b)从所述杂交的后代对种子或组织取样；
c)检测在来自步骤b)的所述样品中可诊断玉米事件MON95379DNA的DNA区段的存在，以鉴定包含玉米事件MON95379DNA的后代；及
d)选择包含玉米事件MON9537...

【专利技术属性】
技术研发人员：H·M·安德森，S·L·布朗，R·A·卡瓦尔霍，A·A·卡斯特罗，K·M·邓克曼，A·J·埃文斯，S·弗拉辛斯基，C·格里菲斯，沈天翔，T·R·史密斯，H·M·温德勒，
申请(专利权)人：孟山都技术公司，
类型：发明
国别省市：美国;US