一种转录因子MaMYB44及其在激活MaGBSSI-3基因上调表达中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种转录因子MaMYB44，其是由核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的基因编码的蛋白质。本发明专利技术还提供了转录因子MaMYB44的编码基因和应用。本发明专利技术的转录因子MaMYB44能够与香蕉果实直链淀粉合成酶基因MaGBSSI

【技术实现步骤摘要】
一种转录因子MaMYB44及其在激活MaGBSSI
‑
3基因上调表达中的应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种转录因子MaMYB44及其在激活MaGBSSI
‑
3基因上调表达中的应用。

技术介绍

[0002]淀粉是影响香蕉产量、品质、营养和风味的关键因子，而淀粉合成酶(Granule
‑
bound starch synthase，GBSS)是决定淀粉合成的关键酶之一。目前，GBSSI基因表达模式已在香蕉(匡云波和赖钟雄,2012；Miao et al.,2014)、水稻(Zhou et al.,2016；Zhang et al.,2019)、玉米(Zeng et al.,2015)、小麦(陈虎等,2017)、马铃薯(杨素等,2018)等多种作物中报道，但该基因在淀粉生物合成中表达调控的机制还不清楚。
[0003]MYB(v
‑
myb avian myeloblastosis viral oncogene homolog)转录因子在植物中广泛存在，其参与植物生长发育、代谢、胁迫响应、花色素合成等多重生物过程的表达调控(Mccarthy et al.,2010；Petroni et al.,2011；Yang et al.,2012；James et al.,2017；Zhang et al.,2019)，但未见MYB转录因子能够与GBSSI基因互作且参与淀粉合成的相关报道。因此，开展香蕉MYB转录因子与香蕉GBSSI基因的研究对调控淀粉合成或提高作物产量、改善淀粉品质、培育优质香蕉新品种具有重要意义。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于克服现有技术中的不足，提供一种可激活香蕉果实直链淀粉合成酶基因MaGBSSI
‑
3上调表达的转录因子MaMYB44及其编码基因和应用。
[0005]本专利技术的第一个方面是提供一种转录因子MaMYB44，其是由核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的基因编码的蛋白质。
[0006]本专利技术的第二个方面是提供一种转录因子MaMYB44基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
[0007]本专利技术的第三个方面是提供一种重组载体，其包含原始载体和本专利技术第二个方面所述的转录因子MaMYB44基因。
[0008]其中，所述原始载体可以采用基因重组领域中常用的载体，例如病毒、质粒等。本专利技术对此不进行限定。在本专利技术的一个具体实施方式中，所述原始载体采用pGreenII 62SK载体质粒，但应当理解的是，本专利技术还可以采用其他质粒、或者病毒等。
[0009]优选地，所述原始载体为pGreenII 62SK载体质粒，SEQ ID NO:1所示核苷酸序列位于pGreenII 62SK载体质粒的Sac I和EcoR I两限制性内切酶位点之间。
[0010]本专利技术的第四个方面是提供如本专利技术第一个方面所述的转录因子MaMYB44、或者本专利技术第二个方面所述的转录因子MaMYB44基因、或者本专利技术第三个方面所述的重组载体在激活香蕉果实直链淀粉合成酶基因MaGBSSI
‑
3上调表达中的应用。
[0011]其中，本专利技术第一个方面所述的转录因子MaMYB44与香蕉果实直链淀粉合成酶基
因MaGBSSI
‑
3启动子互作，从而激活香蕉果实直链淀粉合成酶基因MaGBSSI
‑
3上调表达。
[0012]关于香蕉果实直链淀粉合成酶基因MaGBSSI
‑
3启动子，其已在“申请号：201610477933.9，专利技术名称：驱动直链淀粉合成酶基因GBSSI
‑
3在香蕉果实中特异表达的启动子及其应用”的中国专利中公开，其核苷酸序列如该专利核苷酸序列表的SEQ ID NO:1所示，具体参见该专利。
[0013]本专利技术的第五个方面是提一种用于扩增转录因子MaMYB44基因的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示。
[0014]本专利技术的转录因子MaMYB44能够与香蕉果实直链淀粉合成酶基因MaGBSSI
‑
3启动子区结合，能够与MaGBSSI
‑
3基因启动子互作，激活MaGBSSI
‑
3基因上调表达，例如将转录因子MaMYB44基因和香蕉果实直链淀粉合成酶基因MaGBSSI
‑
3启动子导入香蕉果实中，双荧光素酶活性检测、GUS染色及其表达量分析均发现香蕉果实直链淀粉合成酶基因MaGBSSI
‑
3被显著激活上调表达，这对调控淀粉含量或提高作物产量、改善淀粉品质、培育优质香蕉新品种具有重要意义，为改良香蕉或其他植物淀粉品质提供了候选转录因子资源。
附图说明
[0015]图1为MaGBSSI
‑
3基因启动子自激活和酵母单杂交验证，A：MaGBSSI
‑
3基因启动子自激活实验，B：MaMYB44与MaGBSSI
‑
3基因启动子酵母单杂交互作验证。p53 promoter：阳性对照启动子，MaGBSSI
‑
3promoter：MaGBSSI
‑
3基因启动子，AD
‑
Rec
‑
p53+p53 promoter：阳性对照组合，AD+Empty
‑
MaGBSSI
‑
3promoter：阴性对照组合，MaMYB44+MaGBSSI
‑
3promoter：转录因子MaMYB44和MaGBSSI
‑
3基因启动子互作验证。
[0016]图2为MaGBSSI
‑
3promoter全长克隆和pGreenII 0800
‑
MaGBSSI
‑
3promoter双酶切验证电泳图，A：为MaGBSSI
‑
3promoter全长克隆电泳结果图，B：为pGreenII 0800
‑
MaGBSSI
‑
3promoter双酶切验证电泳结果图，M：DL2000 DNA Marker，泳道1：为MaGBSSI
‑
3promoter全长克隆电泳结果，泳道2：为pGreenII 0800
‑
MaGBSSI
‑
3promoter重组质粒Xho I和Sma I双酶切电泳结果。
[0017]图3为MaMYB44全长克隆和pGreenII 62SK
‑
MaMYB44双酶切验证电泳结果图，A：MaMYB44全长克隆电泳结果图，B：为pGreenII 62SK
‑
MaMYB44双酶切验证电泳结果图，M：DL2000 DNA Marker，泳道1：为MaMYB44全长克隆电泳结果，泳道2：为pG本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种转录因子MaMYB44，其特征在于，其是由核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的基因编码的蛋白质。2.一种转录因子MaMYB44基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。3.一种重组载体，其特征在于，其包含原始载体和权利要求2所述的转录因子MaMYB44基因。4.根据权利要求3所述的重组载体，其特征在于，所述原始载体为pGreenII62SK载体质粒，SEQ ID NO:1所示核苷酸序列位于pGreenII 62SK载体质粒的Sac I和EcoR I两限制性内切酶位点之间。5.如权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：苗红霞，孙佩光，金志强，徐碧玉，刘菊华，赵东方，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院热带生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：