蒙药塔布森-2的提取工艺响应面优化方法与检测方法技术

本发明专利技术公开了一种蒙药塔布森

【技术实现步骤摘要】
蒙药塔布森-2的提取工艺响应面优化方法与检测方法


[0001]本专利技术属于中药化学领域，尤其涉及一种蒙药塔布森-2的提取工艺的响应面优化方法及其质量检测方法。

技术介绍

[0002]塔布森-2又名“二味杜仲汤”源自蒙医典籍《蒙医金匮》，是蒙医常用的治疗骨科疾病的常用方剂，由杜仲和蓝刺头组成，具有壮骨、接骨愈伤之功效。临床研究发现，该蒙药方剂可提高去卵巢大鼠离体骨骨密度、骨组织生物力学性能，提高骨抵御外力冲击的能力，可显著增加实验大鼠离体骨矿含量指标，对去卵巢所致骨质疏松症有明显治疗作用(详见论文：《蒙药二味杜仲汤对去卵巢大鼠骨代谢无机元素影响的实验研究》，董重阳，内蒙古医学院硕士论文，201005)，对绝经后骨质疏松症所致骨痛疗效显著，无不良反应，总有效率达90％(详见论文：《蒙药二味杜仲汤治疗绝经后骨质疏松症骨痛的临床研究》，刘晋等，中国民族医药杂志，第22卷第08期，第18-19页，20160518)。方中杜仲为杜仲科植物杜仲(Eucommia u1moides Oliv.)的干燥树皮，性甘，温，归肝、肾经，具有补肝肾，强筋骨，安胎的功效本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蒙药塔布森-2的提取工艺的响应面优化方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)原料制备：将药材杜仲、蓝刺头粉碎后过筛，得杜仲粉末和蓝刺头粉末；(2)筛选主效因子的中心水平：以提取时间、提取次数、料液比为变量进行单因素实验，筛选出影响塔布森-2提取液中绿原酸及松脂醇二葡萄糖苷含量的中心水平；(3)响应面优化：根据步骤(2)的实验结果，以料液比、提取次数、提取时间为影响因素，以塔布森-2提取液中绿原酸及松脂醇二葡萄糖苷含量的综合量值为测定指标，按照Box-Behnken响应面进行实验设计；(4)通过Design Expert软件对步骤(3)的数据进行多元回归分析，建立二次多元回归模型方程；(5)对二次多元回归模型方程进行方差和显著性分析，根据对回归方程失拟的P值检验失拟是否显著，确定二次回归方程是否适当；根据显著性检验，确定回归方程是否显著，根据模型决定系数R2，模型的修正后决定系数Adj R2与模型的预测决定系数Pred R2来确定模型的预测价值；(6)利用Design Expert软件根据二次多元多元回归模型进行绘图分析自变量和响应值Y的关系，得到回归方程的响应面图，进而得到优化后的水提工艺以使塔布森-2提取液中绿原酸及松脂醇二葡萄糖苷含量最高。2.根据权利要求1所述的一种蒙药塔布森-2的提取工艺的响应面优化方法，其特征在于，步骤(2)中的实验方法为：将步骤(1)中得到的杜仲粉末和蓝刺头粉末，按照重量比1:1混合均匀，置于容器中，控制加水量，浸泡30min后，回流提取，控制提取次数，控制每次的提取时间，过滤，合并药液，得塔布森-2提取液。3.根据权利要求1所述的一种蒙药塔布森-2的提取工艺的响应面优化方法，其特征在于，所述步骤(3)中各主效因子的水平范围：提取次数为1～4次，提取时间为15～55min，料液比为1:8～1:16。4.根据权利要求1所述的一种蒙药塔布森-2的提取工艺的响应面优化方法，其特征在于：所述步骤(5)中二次多元回归模型方程为：Y＝90.25+2.64A+6.24B－9.91C+2.79AB－0.84AC+4.46BC－15.98A2－13.43B2－10.44C2；其中，A为料液比，B为提取次数，C为提取时间。5.根据权利要求1所述的一种蒙药塔布森-2的提取工艺的响应面优化方法，其特征在于，步骤(6)中优化后的水提工艺为：将药材杜仲、蓝刺头粉碎后过筛，得杜仲粉末和蓝刺头粉末；将杜仲粉末和蓝刺头粉末，按照重量比1:1混合均匀，置于容器中，加入相当于杜仲粉末和蓝刺头粉末总重的20倍水，浸泡30min后，100℃下回流提取2次，每次30min，过滤，合并药液，得塔布森-2提取液。6.一种蒙药塔布森-2的质量检测方法，其特征在于：包括指纹图谱法和一测多评法，所述指纹图谱法用于构建蒙药塔布森-2的指纹图谱；所述蒙药塔布森-2指纹图谱中9个特征组分为绿原酸，新绿原酸、京尼平苷酸、松脂醇二葡萄糖苷，京尼平苷，异绿原酸A、1,5-O-双咖啡酰基奎宁酸，异绿原酸C，紫云英苷；以京尼平苷酸为内参物，一测多评法明确蒙药塔布森-2指纹图谱中9个特征组分位置及含量；所述构建蒙药塔布森-2的指纹图谱，包括以下步骤：
步骤1：混合对照品溶液的制备：制备含绿原酸，新绿原酸，京尼平苷酸，松脂醇二葡萄糖苷，京尼平苷，异绿原酸A，1,5-O-双咖啡酰基奎宁酸，异绿原酸C，紫云英苷的混合对照品溶液；步骤2：供试溶液的制备：将不同产地杜仲、蓝刺头药材粉碎，通过40～50目筛，得杜仲和蓝刺头粉末，将杜仲粉末和蓝刺头粉末按照重量比为1:1，置于容器中，加入相当于杜仲粉末和蓝刺头粉末总重的20倍纯水，浸泡30min后，100℃下回流提取2次，每次30min，通过180～200目筛网过滤，合并两次药液，经0.45μm微孔滤膜过滤，得到供试溶液；步骤3：取经步骤1中制备的混合对照品溶液10μL与步骤2中制备的供试品溶液10μL注入高效液相色谱仪，进行色谱条件检测分析，并记录混合对照品溶液的指纹图谱和供试品溶液的指纹图谱；步骤4：将供试品溶液的指纹图谱加载到中药色谱指纹图谱相似度评价软件，经多点校正后进行全谱峰匹配，生成共有模式；所述一测多评法，包括以下步骤：S01：取上述步骤1中混合对照品溶液1、2、10、25、35、40、50、55μL进样注入高效液相色谱仪，分别记录不同进...

【专利技术属性】
技术研发人员：薛培凤，李娜，董馨，马飞祥，李春燕，陆景坤，杨帆，王曦悦，王坤，王智，
申请(专利权)人：内蒙古医科大学，
类型：发明
国别省市：