一种真菌绝对定量的试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种真菌绝对定量的试剂盒及其应用，属于生物领域、发酵领域、检测领域。本发明专利技术的真菌微生物定量探针和试剂盒，能够实现所有真菌微生物的总量检测，用于检测和真菌微生物定量时不需要使用昂贵仪器，可在2.5h内快速完成定量工作。同时，本发明专利技术所使用的样品不必须进行核酸提取。基于本发明专利技术的探针、检测试剂盒用于真菌微生物定量，具有快速、方便、便宜、准确的特点。准确的特点。准确的特点。

【技术实现步骤摘要】
一种真菌绝对定量的试剂盒及其应用


[0001]本专利技术涉及一种真菌绝对定量的试剂盒及其应用，属于生物领域、发酵领域、检测领域。

技术介绍

[0002]传统发酵食品酿造过程中有复杂的微生物菌群参与，其中真菌是重要的功能微生物。这些微生物与最终产品的品质密切相关，在发酵过程中，真菌微生物参与一系列的底物降解和产物合成相关的生理生化反应，将原料中的可利用糖原，蛋白质等大分子转化为醇类，醛类，酸类，酯类等风味成分，赋予产品独特的风味和感官特征。因此，实时跟踪发酵过程中真菌微生物的生长变化趋势对发酵过程控制，酿造工艺优化具有重要的指导意义。
[0003]目前，许多方法被用来对微生物进行绝对定量，例如以磷酸脂肪酸检测(PLFA)，ATP检测，生物量碳检测(MBC)为代表的基于生物物质标记的检测方法；以高通量测序，共聚焦显微镜，流式细胞术，荧光定量PCR为代表的基于生物基因标记的定量方法。但目前的检测方法均存在不足：基于生物物质标记的检测方法在物种分辨率较低，不能区分微生物的种类，只能测定所有微生物的总量。基于生物基因标记的定量方法一般具有较高的检本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一组探针，其特征在于，包括信号探针和淬灭探针；信号探针序列包括SEQ ID NO.1所示的序列；淬灭探针序列包括SEQ ID NO.2所示的序列。2.检测试剂盒，其特征在于，含有权利要求1所述的信号探针和淬灭探针。3.根据权利要求2所述的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还含有如下任意一种或多种：血红素、缓冲液、2,2-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)二铵盐、H2O2。4.一种真菌微生物定量方法，其特征在于，所述方法使用了权利要求1所述的探针，或者权利要求2-3任一所述的检测试剂盒。5.根据权利要求4所述的定量方法，其特征在于，所述方法包括：待测样品中DNA发生解链；加入过量信号探针，与待测样本的目标核苷酸片段结合形成双链，使G四链体裸漏在序列之外；加入足量淬灭探针与未结合的信号探针形成双链，破坏G四链体结构；利用裸漏在外G四链体与血红素反应形成具有过氧化氢酶活性的G四链体/血红素模拟酶，结合过氧化氢酶的活性表征真菌微生物的生物量。6.根据权利要求4所述的定量方法，其特征在于，所述方法为绝对定量或者相对定量；可选地，所述方法为绝对定量时，还包括：建立过氧化氢酶活性或者与过氧化氢酶活性呈相关性的指标，与真菌微生物的生物量的标准曲线；检测待测样品时，将检测到的过氧化氢酶活性或者与过氧化氢酶活性呈相...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴群，徐岩，杜如冰，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：