一种纳米荧光标记的人工细菌及其制备方法技术

本发明专利技术提供一种人工细菌及其制备方法，将纳米材料标记到人工细菌生物载体上，具体涉及一种特异性强、快速简便的沙门氏菌纳米荧光标记方法。本发明专利技术选择安全性高、厌氧靶向性强的沙门氏菌YB1作为细菌生物载体，采用还原剂三(2-羧乙基)膦(TCEP)将沙门氏菌YB1外膜蛋白表面上的二硫键(S-S)温和还原为巯基(SH)，将富含游离-SH的沙门氏菌YB1与负载ICG且表面带有马来酰亚胺基团的磷脂-聚合物纳米探针(INPs)进行化学交联，构建具有荧光成像能力的YB1-INPs。本发明专利技术的方法将纳米荧光探针INPs稳定地标记到沙门氏菌YB1表面，能够避免因交叉交联降低纳米探针与细菌表面反应的效率，所得YB1-INPs能够满足基础研究及临床上对跟踪、监测细菌及实时评估肿瘤治疗效果的切实需求。菌及实时评估肿瘤治疗效果的切实需求。菌及实时评估肿瘤治疗效果的切实需求。

【技术实现步骤摘要】
一种纳米荧光标记的人工细菌及其制备方法


[0001]本专利技术涉及纳米医学领域，尤其涉及一种纳米荧光标记的人工细菌及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]肿瘤是人类亟待攻克的顽疾之一，近年来人们利用改造的工程细菌来治疗肿瘤，取得了很好的疗效，用减毒细菌的肿瘤靶向性定向释放治疗基因已成为肿瘤基因治疗领域的新亮点，其中鼠伤寒沙门氏菌是这些细菌中的一个典型代表。鼠伤寒沙门氏菌作为兼性厌氧的革兰氏阴性菌，具有潜在的肿瘤靶向性和肿瘤杀伤能力，还具有遗传操作简易等优点。来坷炯(“鼠伤寒沙门氏菌YB1抑制肿瘤转移机理研究”，2018年，厦门大学硕士学位论文)报道了一株鼠伤寒沙门氏菌YB1，其经过基因改造后具有严格厌氧特性的减毒菌株，它具有极佳的肿瘤靶向性和抑制肿瘤转移的能力。
[0003]虽然细菌疗法因其有靶向肿瘤、侵袭肿瘤细胞、可塑性强等优点受到了研究人员的广泛关注，但是细菌疗法的治疗机理不清、可控性弱等问题，限制了其作为肿瘤治疗药物的开发和应用。因此，需要寻找一种安全高效的方法来跟踪、监测细菌，并且评估其治疗的效果。在细菌表面加入纳米材料为细本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种人工细菌，所述人工细菌的表面标记有纳米荧光探针(INPs)，所述INPs是通过表面的马来酰亚胺基团与经还原剂处理后的沙门氏菌表面的巯基化学交联；所述INPs包括两性化合物、单层脂类分子、近红外光热转换试剂和疏水性多聚物；所述两性化合物含有马来酰亚胺基团；所述细菌为沙门氏菌。2.一种纳米荧光探针标记沙门氏菌的方法，所述方法包括将纳米荧光探针(INPs)表面的马来酰亚胺基团与经还原剂处理后的沙门氏菌表面的巯基化学交联，所述INPs包括亲水性外壳、中间层和疏水性内壳，所述亲水性外壳含有两性化合物，所述两性化合物含有马来酰亚胺基团，所述中间层含有单层脂类分子，所述疏水性内壳含有近红外光热转换试剂和疏水性多聚物；所述两性化合物穿插于所述中间层形成疏水性外壳；所述近红外光热转换试剂吸附在疏水性多聚物上，形成疏水性内壳。3.根据权利要求1所述的人工细菌或权利要求2所述的方法，所述两性化合物为二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-羧基聚乙二醇(DSPE-PEG)或二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-马来酰胺(DSPE-PEG-Mal)，优选为DSPE-PEG-Mal；所述单层脂类分子包括卵磷脂脂或脑磷脂，优选为植物卵磷脂，进一步优选为大豆卵磷脂。4.根据权利要求1所述的人工细菌或权利要求2所述的方法，所述近红外光热转换试剂包括吲哚菁绿(ICG)、金纳米棒、碳纳米管中任一一种或多种，优选为ICG；所述疏水性多聚物选自聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)、聚乳酸、聚己内酯，优选为PLGA。5.根据权利要求1所述的人工细菌或权利要求2所述的方法，所述INPs还包括化疗药物，所述化疗药物吸附于所述两性化合物的脂端及单层脂类分子上，所述化疗药物包括阿霉素、表阿霉素、紫杉醇、去...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡林涛，邢婕华，尹婷，郑明彬，罗英梅，陈泽，
申请(专利权)人：深圳先进技术研究院，
类型：发明
国别省市：