团聚物的去除制造技术

本公开提供了一种将团聚的物质分散在包含流感蛋白的制剂中的方法。该方法包括对制剂进行超声处理。进行超声处理。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】团聚物的去除
相关申请的交叉引用
[0001]本申请要求于2018年7月10日提交的题为“团聚物的去除”的澳大利亚申请No.2018902497的优先权。其全部内容通过引用并入本文。


[0002]本公开涉及一种将团聚物(agglomerate)分散在包含流感抗原的制剂中的方法，尤其涉及该方法在生产流感疫苗中的用途。背景
[0003]流感疫苗被认为是预防感染的最有效方法。第一种流感疫苗是全病毒制剂[1]。目前灭活的三价和四价流感疫苗(分别为TIV和QIV)的生产工艺基于对流感病毒的化学破坏或“裂解”，其始于二十世纪六十年代[2]。发现化学破坏(通过去污剂或溶剂)会降低疫苗的反应原性，但在许多情况下不会损害免疫原性。由于溶剂的高挥发性，所有市售的流感疫苗都由去污剂破坏或裂解。然而，用于破坏整个病毒颗粒的去污剂的浓度在疫苗中超过了可接受极限，因此必须除去至允许的水平。
[0004]去除去污剂的结果是所得的裂解病毒颗粒形成团聚物或团聚物质。团聚物的发生与毒株以及裂解过程中所使用的去污剂的水平/类型有关。在许多情况下，疫苗和其他药品包含残留去污剂或其他去污剂剂/化学品，以保持疫苗的适当质量属性。然而，长期以来已经确定了去污剂的存在，特别是在疫苗中使得抗原更可溶，从而更导致了免疫原性下降，因此降低了疫苗的有效性。简述
[0005]本公开提供了一种将团聚物质分散在包含流感蛋白或病毒的制剂中的方法，该方法包括对该制剂进行超声处理。
[0006]本公开还提供了一种生产流感疫苗的方法，该方法包括生产包含灭活或裂解流感病毒颗粒的制剂，并对该制剂进行超声处理。
附图说明
[0007]图1：A/Victoria/361/2011(H3N2)，A/California/07/2009(H1N1)和B/Hubei-Wujiagang/158/158/2009(B Yamagata)毒株流感病毒疫苗(IVV)IVV药物基质的光密度浊度(ODT)实验的可重复性。
[0008]图2：ODT分析超声处理在所传递的能量(焦耳/mL)和热量(37℃，30分钟)方面对H3N2 A/Victoria/361/2011IVV药物基质分散的影响。
[0009]图3：ODT分析超声处理在能量输入强度(振幅)方面对H3N2A/Victoria/361/2011IVV药物基质分散的影响。
[0010]图4：与未经处理和经PS80处理的样品相比，ODT结果证明了超声处理能有效分散团聚物，并随时间推移保持H3N2 A/Victoria/210/2009IVV药物基质的分散状态。
[0011]图5：(A)未经处理，(B)经PS80处理和(C)超声处理的H3N2A/Victoria/210/2009的
IVV药物基质的粒度分布平均强度(PSDs)(n＝5)，通过DLS在24周内进行分析。
[0012]图6：在24周内对未经处理，经去污剂(PS80)处理和超声处理的IVV药物基质(H3N2；A/Victoria/210/2009)进行单向辐射免疫扩散(SRID)分析。
[0013]图7：代表IVV药物基质(MPH)，超声处理后的IVV药物基质(经超声MPH)和在聚山梨醇酯80存在下的IVV药物基质(MPH+PS80)的EM显微照片。在0、1、2和6个月的时间点通过EM分析所有样品。
[0014]图8：四种流感季节性毒株(A/Victoria/361/2011(H3N2)，A/California/7/2009(H1N1)，B/Hubei-Wujiagang/158/2009(B Yamagata)和B/Brisbane/60/2008(B Victoria))在0、3和6个月的时间点超声(Son)处理前后的ODT结果。
[0015]图9：通过DLS经六个月分析的A/Victoria/361/2011(A，B)，A/California/7/2009(C，D)，B/Hubei-Wujiagang/158/2009(E，F)和B/Brisbane/60/2008(G，H)的未处理(左)和经超声(右)IVV药物基质材料的平均粒径分布(PSD)(n＝5)。
[0016]图10：对于60、500和1000ml的各种IVV药物基质批次体积，对应于ODT≥80％的对IVV药物基质批次体积(MPH体积mL)的超声暴露时间(分钟)。
[0017]图11：对于60、500和1000ml的各种IVV药物基质批处理体积，在处理时间内对应于ODT≥80％的超声能量输入。
[0018]图12：使用流穿式设备(flow-through device)实现ODT≥80％所需的超声能量输入相对于IVV药物基质的批次体积(60、500和1000ml)。
[0019]图13：IVV药物基质中的团聚量(表示为％ODT)与HA分子上存在的预测糖基化位点数之间的线性关系。
具体实施方式
[0020]本公开描述了使用超声法有效地将团聚物质分散在流感病毒疫苗(IVV)药物物质或IVV药物产品中，并且在下文中将其称为IVV药物基质。在流感病毒H3N2株上评估了超声处理的可行性，因为与非H3N2株和B型流感病毒相比，这种甲型流感亚株表现出最大的团聚水平。
[0021]由于通常通过向制剂中添加相容的赋形剂来实现对蛋白质团聚的抑制，因此本公开内容的一个实例提供了先前未见的方法。例如，已发现糖，多元醇，氨基酸，盐，聚合物和表面活性剂等赋形剂可通过优先相互作用来稳定团聚物[(Arakawa等(1991)；Timasheff(1998)]，提高蛋白质折叠速率[Wang等(1995)；Frye和Royer(1997)]，降低溶剂可及性和构象迁移性[Kendrick等(1997)]以及增加溶剂粘度[Jacob和Schmid(1999)]。
[0022]本公开避免了对这些添加剂的需要，这些添加剂可能不利地影响疫苗的免疫原性并在接受疫苗的个体中引起不希望的副作用。
[0023]在一个实施例中，本公开提供了一种将团聚物质分散在包含流感蛋白的制剂中的方法，该方法包括对该制剂进行超声处理。
[0024]在另一个实施例中，本公开还提供了一种生产流感疫苗的方法，该方法包括生产包含灭活或裂解流感病毒颗粒的制剂，并对该制剂进行超声处理。
[0025]经超声处理的制剂可以是完整的病毒颗粒，裂解病毒颗粒，亚单位疫苗或重组疫苗。为了促进用于制剂灭菌的过滤，优选最终制剂中团聚物的百分比小于10％。
[0026]在一个实施例中，所述制剂包含流感血凝素，例如，所述制剂包含裂解的流感病毒颗粒。在一实施例中，制剂基本上不含去污剂。如本文所用的短语“基本上不含去污剂”是指具有小于0.02％的水平。例如，去污剂的含量小于200ppm。在其他例子中，去污剂的含量小于50ppm。
[0027]通常，超声处理在一定强度下进行一段时间，以使制剂中存在的至少50％团聚物分散。可以通过以下三种方式之一将本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种将团聚物质分散在包含流感蛋白的制剂中的方法，该方法包括对该制剂进行超声处理。2.根据权利要求1所述的方法，其中，制剂包含流感血凝素。3.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中制剂包含裂解病毒颗粒。4.如权利要求3所述的方法，其中制剂基本无去污剂。5.如权利要求1-4任一所述的方法，其中超声处理在一定强度下进行一段时间，以使制剂中存在的至少50％团聚物分散。6.如权利要求1-5任一所述的方法，其中超声在80％振幅的速率下进行。7.如权利要求1-6任一所述的方法，其中进行超声以转移至少90焦耳/ml的能量。8.如权利要求1至7中任一所述的方法，其中具有预测HA糖基化位点概率分数(pGly评分)≥16的H3N2...

【专利技术属性】
技术研发人员：S，
申请(专利权)人：思齐乐私人有限公司，
类型：发明
国别省市：