一种检测绵羊肌肉脂肪含量的试剂、引物、试剂盒和应用制造技术

本发明专利技术涉及一种检测绵羊肌肉脂肪含量的试剂、引物、试剂盒和应用，属于分子生物学技术领域。本发明专利技术提供了检测SPARCL1基因基因型的试剂在检测绵羊肌肉脂肪含量中的应用。本发明专利技术所述应用能够为在固定群体里寻找脂肪含量相对较高的绵羊个体提供一种快速有效的方法，为提高绵羊肉质品质的育种提供依据。提高绵羊肉质品质的育种提供依据。提高绵羊肉质品质的育种提供依据。

【技术实现步骤摘要】
一种检测绵羊肌肉脂肪含量的试剂、引物、试剂盒和应用


[0001]本专利技术涉及分子生物学
，具体涉及一种检测绵羊肌肉脂肪含量的试剂、引物、试剂盒和应用。

技术介绍

[0002]绵羊在我国具有悠久的饲养历史，羊肉也是我国居民日常生活中必不可少的肉类食品。羊肉具有高蛋白，低胆固醇的特点，其营养丰富，口感细腻，具有健脾，补血等益处。随着我国经济进步，居民生活水平不断提高，餐饮业的蓬勃发展，羊肉越来越受大众的欢迎。羊肉需求量增加的同时，人们对肉质的要求也随之升高。近年来，育种工作者们逐渐将研究方向转移至绵羊肉质方面性状的改善，利用分子育种方法，通过探知影响绵羊肉质性状的候选基因的作用机理，为绵羊提高肉质质量的育种提供理论依据。
[0003]羊肉品质受多种因素影响，其中肌内脂肪含量是重要影响因素之一，增加肌内脂肪含量能够显著影响肉质的嫩度、风味、纹理等从而提升口感。但目前并没有从分子水平探究与绵羊体内肌内脂肪含量相关的基因的相关报道，进而不能为优质绵羊的育种工作提供理论基础和科学依据。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种检测绵羊肌肉脂肪含量的试剂、引物、试剂盒和应用。本专利技术所述应用能够为在固定群体里寻找脂肪含量相对较高的个体绵羊提供一种快速有效的方法，为提高绵羊肉质品质的育种提供依据。
[0005]本专利技术提供了检测SPARCL1基因基因型的试剂在检测绵羊肌肉脂肪含量中的应用。
[0006]优选的是，所述检测SPARCL1基因基因型的位点位于SPARCL1基因第10外显子。
[0007]优选的是，所述检测SPARCL1基因基因型的位点为绵羊基因组的第chr.6101,996,482、chr.6101,996,488和chr.6101,996,542位。
[0008]本专利技术还提供了一种用于检测绵羊肌肉脂肪含量的检测SPARCL1基因基因型的试剂，所述试剂用于检测绵羊基因组的第chr.6101,996,482、chr.6101,996,488和chr.6101,996,542位的基因型。
[0009]本专利技术还提供了一种用于检测绵羊肌肉脂肪含量的检测SPARCL1基因基因型的引物，所述引物包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
[0010]本专利技术还提供了一种用于检测绵羊肌肉脂肪含量的检测SPARCL1基因基因型的试剂盒，所述试剂盒包括用于检测绵羊基因组的第chr.6101,996,482、chr.6101,996,488和chr.6101,996,542位的基因型的试剂。
[0011]本专利技术还提供了一种检测绵羊肌肉脂肪含量的方法，包括以下步骤：检测绵羊基因组的第chr.6101,996,482、chr.6101,996,488和chr.6101,996,542位的基因型，绵羊肌
肉脂肪含量由高到低对应的基因型依次为CT-TT-GG、CC-TT-CG、CC-TT-GG、TT-TT-GG。
[0012]本专利技术还提供了一种基于上述技术方案所述引物的检测绵羊肌肉脂肪含量的方法，包括以下步骤：
[0013]利用上述技术方案所述引物，对待测样品进行PCR扩增，得到PCR产物；
[0014]将PCR产物直接进行Sanger测序，统计基因型组合，绵羊肌肉脂肪含量由高到低对应的基因型依次为CT-TT-GG、CC-TT-CG、CC-TT-GG、TT-TT-GG。
[0015]优选的是，所述扩增每20μL反应体系包括2
×
MasterMix 10μL，引物各0.4μL，待测样品1μL和余量的ddH2O。
[0016]优选的是，所述扩增的反应条件为：94℃5min；95℃30s，60℃30s，72℃16s，35个循环；72℃8min；最后温度降到12℃。
[0017]本专利技术提供了检测SPARCL1基因基因型的试剂在检测绵羊肌肉脂肪含量中的应用。针对SPARCL1基因第10外显子DNA片段突变进行基因型组合分析，本专利技术筛选得到了用于检测绵羊肌肉脂肪含量的相关基因位点，并提出了检测SPARCL1基因基因型的试剂在检测绵羊肌肉脂肪含量中的应用。与传统的单基因型选择相比，准确性更高，对于筛选脂肪含量高的绵羊个体具有显著优势，节省饲养成本，提高优势肉羊选育。
附图说明
[0018]图1为本专利技术提供的测序结果图；
[0019]图2为本专利技术提供的第一个突变位点峰图；
[0020]图3为本专利技术提供的第二个突变位点峰图；
[0021]图4为本专利技术提供的第三个突变位点峰图；
[0022]图5为本专利技术提供的目的片段电泳图。
具体实施方式
[0023]本专利技术提供了检测SPARCL1基因基因型的试剂在检测绵羊肌肉脂肪含量中的应用。在本专利技术中，所述检测SPARCL1基因基因型的位点位于SPARCL1基因第10外显子。
[0024]本专利技术前期工作，克隆包括SPARCL1基因第10外显子的全部DNA序列，以绵羊血液为试验样品，利用直接测序技术检测SPARCL1基因第10外显子多态性，形成不同基因型并进行组合，根据不同组合基因型对应的肉质性状数据进行连锁分析，找出优势组合基因型，为优质绵羊育种工作提供理论依据。在本专利技术中，所述检测SPARCL1基因基因型的位点为绵羊基因组的第chr.6101,996,482、chr.6101,996,488和chr.6101,996,542位。在本专利技术中，所述SPARCL1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示：TGACCCAACAGGGAAGCCCTCTTTCTCATTCTTGATCCTAAATTTCCAAGATACTCTGATGGACCCCACTTGAGTCAAATGCCCACAATCGGGTAGCCCAGTGGTAAGATCTAGGTTGCATAAACATGATTCTTGGGGTGCATCCGATAAATTTAGGGTGGAGGGAGGACAGTTCCTAGTGAAGGAGGAAACCTTATCCATTGACATTCAAAAAGCTGCATCTTGCCCATAAATGGTTTATTTCATTTGTAGCTTTTCATGAATGTACTATGTATTTGCTATCCTTGGCAACCTTGTGAAAGAAAAGCACCCTTGGTGATCAGAAGAGTTCACTTTTCGTACCCTGGTTACCCAGTTAACTGGCTGCCATTTGTCTCATTGCAGGGTCCTGACCCACTCTGAGCTY(T/C)GCGCCY(T/C)TTGCGAGCATCTCTCGTGCCCATGGAACACTGCATAACGCGCTTCTTTGAAGAS(G/C)TGTGACCCCAACAAGGATAAGCACATCACCCTGCAGGAGTGGGGCCACTGCTTTGAAATTAAAGAAGGTAAATTGACCATCA
GCCCAGGGAGAG，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测SPARCL1基因基因型的试剂在检测绵羊肌肉脂肪含量中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测SPARCL1基因基因型的位点位于SPARCL1基因第10外显子。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述检测SPARCL1基因基因型的位点为绵羊基因组的第chr.6101,996,482、chr.6101,996,488和chr.6101,996,542位。4.一种用于检测绵羊肌肉脂肪含量的检测SPARCL1基因基因型的试剂，其特征在于，所述试剂用于检测绵羊基因组的第chr.6101,996,482、chr.6101,996,488和chr.6101,996,542位的基因型。5.一种用于检测绵羊肌肉脂肪含量的检测SPARCL1基因基因型的引物，其特征在于，所述引物包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。6.一种用于检测绵羊肌肉脂肪含量的检测SPARCL1基因基因型的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括用于检测绵羊基因组的第chr.6101,996,482、chr.6101,996,488和...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖成，曹阳，马惠海，刘宇，赵中利，金海国，
申请(专利权)人：吉林省农业科学院，
类型：发明
国别省市：