一种生物氧化4-甲基愈创木酚制备天然香兰素的方法技术

本发明专利技术公开了一种生物氧化4

【技术实现步骤摘要】
一种生物氧化4-甲基愈创木酚制备天然香兰素的方法


[0001]本专利技术属于发酵工程
，具体涉及一种生物氧化4-甲基愈创木酚制备天然香兰素的方法。

技术介绍

[0002]香兰素是从芸香科植物香荚兰豆中提取的一种重要香料，具有强烈而又独特的香荚兰豆香气，是香料中产量最大的品种之一，是调配巧克力、冰淇淋、口香糖、糕点及烟草香精的重要原料。
[0003]目前市场上的香兰素主要来源于化学合成，具体有木质素法、愈创木酚-乙醛酸法等多条途径。但随着社会的发展，人们更加追求健康环保的生活，天然香料的市场接受度越来越高，开发一个纯天然的生物过程实现香兰素的生产已经成为了研究开发的热点。现有技术中的天然香兰素的生产方法主要为阿魏酸路线与丁香酚路线。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种生物氧化4-甲基愈创木酚制备天然香兰素的方法。
[0005]本专利技术的另一目的在于提供一种用于上述方法的巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium OMK-72。
[0006]本专利技术的技术方案如下：...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种生物氧化4-甲基愈创木酚制备天然香兰素的方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)将巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium OMK-72依次经固体斜面培养基和种子培养基培养后，获得种子培养液；巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium OMK-72于2020年8月31日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO：M 2020457；(2)将该种子培养液接种于发酵培养基中培养，至菌体生长至对数早期后加入1.8-2.2g/L的4-甲基愈创木酚诱导相关酶的表达，并培养至发酵结束；(3)在步骤(2)所得的培养液中一次性或分批加入4-甲基愈创木酚，同时在通气条件下充分搅拌反应，该步骤中每次加入4-甲基愈创木酚的浓度为4.5-5.5g/L；(4)将步骤(3)所得的物料经离心获得上清液，将该上清液经过陶瓷膜获得清液，将该清液过树脂柱吸附，再用乙醇洗脱，获得洗脱液；(5)将上述洗脱液进行蒸发浓缩，再进行结晶，接着经干燥，即得天然香兰素。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)从低温保藏的甘油管中划线所述巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium OMK-72于固体斜面培养基上，于28-30℃静置培养24-48h后得到活化菌种；将所得的活化菌种接种于种子培养基中，于28-30℃且200-250rpm条件下震荡培养至对数早期，即得种子培养液；(2)将步骤(1)所得的种子培养液按5-10％的体积比接种于发酵培养基中，于pH 6.5-8.0，28-30℃，搅拌转速100-600rpm，通气量1∶0.5的条件下培养3-6h，至菌体生长至对数早期加入1.8-2.2g/L的4-甲基愈创木酚，继续发酵36-48h，获得培养液；(3)在步骤(2)所得的培养液中一次性或分批加入4-甲基愈创木酚，同时在搅拌转速300-600rpm，通气量1∶0.5的条件下转化反应，该步骤中每次加入4-甲基愈创木酚的浓度为4.5-5.5g/L；(4)将步骤(3)所得的物料经离心获得上清液，将该上清液经过陶瓷膜获得清液，将该清液过树脂柱吸附，再用乙醇洗脱，获得洗脱液；(5)将步骤(4)所得的洗脱液转移至蒸馏瓶中蒸去适量乙醇，适当浓缩，在合适的条件下结晶，干燥，...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾世超，赵晓岚，郭雅珊，林晓慧，蔡海芳，刘超霞，邢晨光，刘刚，
申请(专利权)人：厦门欧米克生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：