淀粉酶制造技术

本发明专利技术涉及与亲本α

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】淀粉酶
[0001]序列表
[0002]此申请包括以根据“专利合作条约(PCT)下的国际专利申请中核苷酸和氨基酸序列表的表示标准”ST.25的ASC II文本(.txt)文件的计算机可读形式(CRF)的核苷酸和氨基酸序列表。序列表下文识别并且因此通过引用以其整体并入本申请说明书并且用于所有目的。
[0003]文件名创建日期大小161160-SequenceListing_ST25.txt2018年5月22日5.65KB(5,786字节)
专利

[0004]本专利技术涉及α-淀粉酶的变体，其与亲本α-淀粉酶相比具有增加的外淀粉酶活性。本专利技术还涉及制备变体α-淀粉酶的方法以及所述变体α-淀粉酶在烘焙、洗涤剂、个人护理产品、在纺织品的加工、在纸浆和纸加工、在生产乙醇、木质纤维素乙醇或糖浆以及在油田和采矿业中用作减粘剂(viscosity breaker)的用途。
[0005]专利技术背景
[0006]面包数千年来是人类营养的主要内容。面包通常是通过将面粉、水、盐、酵母和/或其他食物添加剂混合以制成面团或糊状物而制成的；然后将面团烘焙以制成面包。已知酶可用于烘焙，因为酶对烘焙过程的作用可以与化学替代品的作用相似或比之更好。几种不同的酶可用于制作面包，例如已知淀粉酶有助于随着时间保持新鲜度(抗老化或硬度)并随着时间保持弹性。面包老化是由支链淀粉的结晶引起的，其在烘焙后在淀粉颗粒中发生。面包老化时，其失去面包屑的柔软性和水分，从而失去弹性。
[0007]因此，依然需要一种淀粉酶，其可以在比目前可得的更长的时间内提供新鲜的面包，或者需要一种淀粉酶，其可以随时间提供比新鲜的更好的面包。
[0008]所述问题的一种解决方案是具有满足或超过这些工业要求的α-淀粉酶活性的变体多肽。此外，α-淀粉酶变体还可用于动物饲料，洗涤剂，个人护理产品，纺织品的加工、纸浆和纸加工，生产乙醇，生产木质纤维素乙醇，生产糖浆，或在油田和采矿业中用作减粘剂。

技术实现思路

[0009]本专利技术人惊奇地发现，与亲本酶的活性相比，在α-淀粉酶的氨基酸序列中引入氨基酸修饰增加了变体的外淀粉酶活性。
[0010]因此，本专利技术涉及根据SEQ ID No.1的α-淀粉酶的变体多肽，其包含与根据SEQ ID No.1的序列至少80％相同的氨基酸序列并且具有α-淀粉酶活性，其中与根据SEQ ID No.1的α-淀粉酶相比，所述变体多肽具有增加的外淀粉酶活性。
[0011]在一个实施方案中，与根据SEQ ID No.1的氨基酸序列相比，所述变体包含至少一个氨基酸修饰，其可以是氨基酸取代。
[0012]在一个实施方案中，所述至少一个氨基酸修饰是在选自以下的氨基酸残基位置编号：SEQ ID No.1编号中的2、3、4、21、22、25、26、29、32、35、45、53、59、68、76、82、88、90、91、
96、105、117、126、128、134、141、152、160、175、197、200、234、236、243、256、257、258、261、264、270、292、311、380、416、423、433和435。
[0013]在一个实施方案中，所述至少一个氨基酸修饰是选自以下的氨基酸取代：SEQ ID No.1编号中的K2H、Y3R、S4T、P21E、P21W、G22Q、I25W、W26G、T29G、Q32R、P35K、I45M、G53A、S59P、F68P、K76R、R82N、E88Y、V90G、V90M、N91T、A96T、A105W、L117R、Y126V、W128Y、V134A、A141T、K152M、G160E、G160V、W175N、F197A、F197K、V200S、W234C、Y236H、F243A、F243K、F243T、D256A、N257R、T258C、P261C、P261F、V264R、G270Y、I292A、I292E、V311L、N380L、G416Q、G423M、A433W和V435S。
[0014]在一个实施方案中，与根据SEQ ID No.1的氨基酸序列相比，所述变体多肽包含氨基酸修饰的组合。
[0015]所述氨基酸修饰的组合是可选自以下的氨基酸取代的组合：SEQ ID No.1编号中的
[0016](a)G22Q、P35K、S59P、W128Y、D256A；
[0017](b)G22Q、W128Y、W175N、V200S、A433W；
[0018](c)G22Q、P35K、S59P、D256A；
[0019](d)G22Q、W175N、V200S、D256A、A433W；
[0020](e)W128Y、W175N、D256A；
[0021](f)G22Q、S59P、V200S、D256A、A433W；
[0022](g)G22Q、W175N、V200S、D256A；
[0023](h)G22Q、S59P；
[0024](i)G22Q、P35K、W128Y、W175N、V200S、D256A、A433W；
[0025](j)G22Q、P35K、S59P、W128Y、A433W；
[0026](k)G22Q、W128Y、W175N、D256A；
[0027](l)P35K、W128Y、V200S、D256A；
[0028](m)G22Q、S59P、W175N、V200S、A433W；
[0029](n)G22Q、S59P、W128Y、V200S、A433W；
[0030](o)G22Q、S59P、W175N、V200S、D256A、A433W；
[0031](p)G22Q、S59P、W128Y、D256A；
[0032](q)S59P、V200S、D256A、A433W；
[0033](r)P35K、S59P、W128Y、W175N、V200S、D256A、A433W；
[0034](s)G22Q、S59P、W128Y、D256A、A433W；
[0035](t)G22Q、S59P、W128Y、W175N、V200S、433W；
[0036](u)G22Q、W128Y、W175N、A433W；
[0037](v)S59P、W128Y、V200S；
[0038](w)P35K、S59P、V200S、A433W；
[0039](x)S59P、W128Y、V200S、D256A；
[0040](y)S59P、W128Y、V200S、A433W；和
[0041](z)W128Y、V200S、A433W。
[0042]在一个实施方案中，所述变体多肽是全长氨基酸序列的片段。
[0043]在一个实施方案中，所述变体多肽包含所述至少一个变体多肽和具有淀粉酶活性的第二多肽的杂合体，其中所述杂合体具有α-淀粉酶活性。
[0044]本专利技术还涉及一种包含所述变体多本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.根据SEQ ID No.1的α-淀粉酶的变体多肽，其包含与根据SEQ ID No.1的序列至少80％相同的氨基酸序列并且具有α-淀粉酶活性，其中与根据SEQ ID No.1的α-淀粉酶相比，所述变体多肽具有增加的外淀粉酶活性。2.权利要求1的变体多肽，其中与根据SEQ ID No.1的氨基酸序列相比，所述变体包含至少一个氨基酸修饰。3.权利要求2的变体多肽，其中所述至少一个氨基酸修饰是氨基酸取代。4.权利要求2或3的变体多肽，其中所述至少一个氨基酸修饰在选自以下的氨基酸残基位置编号：SEQ ID No.1编号中的2、3、4、21、22、25、26、29、32、35、45、53、59、68、76、82、88、90、91、96、105、117、126、128、134、141、152、160、175、197、200、234、236、243、256、257、258、261、264、270、292、311、380、416、423、433和435。5.权利要求2或3的变体多肽，其中所述至少一个氨基酸修饰是选自以下的氨基酸取代：SEQ ID No.1编号中的K2H、Y3R、S4T、P21E、P21W、G22Q、I25W、W26G、T29G、Q32R、P35K、I45M、G53A、S59P、F68P、K76R、R82N、E88Y、V90G、V90M、N91T、A96T、A105W、L117R、Y126V、W128Y、V134A、A141T、K152M、G160E、G160V、W175N、F197A、F197K、V200S、W234C、Y236H、F243A、F243K、F243T、D256A、N257R、T258C、P261C、P261F、V264R、G270Y、I292A、I292E、V311L、N380L、G416Q、G423M、A433W和V435S。6.权利要求1的变体多肽，其中与根据SEQ ID No.1的氨基酸序列相比，所述变体多肽包含氨基酸修饰的组合。7.权利要求6的变体多肽，其中所述氨基酸修饰的组合是选自以下的氨基酸取代的组合：SEQ ID No.1编号中的(a)G22Q、P35K、S59P、W128Y、D256A；(b)G22Q、W128Y、W175N、V200S、A433W；(c)G22Q、P35K、S59P、D256A；(d)G22Q、W175N、V200S、D256A、A433W；(e)W128Y、W175N、D256A；(f)G22Q、S59P、V200S、D256A、A433W；(g)G22Q、W175N、V200S、D256A；(h)G22Q、S59P；(i)G22Q、P35K、W128Y、W175N、V200S、D256A、A433W；(j)G22Q、P35K、S59P、W128Y、A433W；(k)G22Q、W128Y、W175N、D256A；(l)P35K、W128Y、V200S、D256A；(m)G22Q、S59P、W175N、V200S、A433W；(n)G22Q、S59P、W128Y、V200S、A433W；(o)G22Q、S59P、W175N、V200S、D256A、A433W；(p)G22Q、S59P、W128Y、D256A；(q)S59P、V200S、D256A、A433W；(r)P35K、S59P、...

【专利技术属性】
技术研发人员：H，
申请(专利权)人：巴斯夫欧洲公司，
类型：发明
国别省市：