修饰的免疫调节肽制造技术

本发明专利技术提供了源于IFI 16的热蛋白结构域的修饰的多肽及其在医学中的用途。具体地，提供多肽用于治疗与STING活性相关的疾病，包括癌症和免疫缺陷或自身免疫疾病。癌症和免疫缺陷或自身免疫疾病。癌症和免疫缺陷或自身免疫疾病。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】修饰的免疫调节肽
[0001]背景
[0002]来自微生物病原体的胞质DNA进行的先天性免疫激活是I型干扰素(IFN)和促炎性细胞因子的有效诱因。导致IFN激活的途径已在结合胞质DNA的蛋白质以及后续下游信号传导和免疫活化所需的蛋白质方面进行了广泛研究。尽管已经提出了多种候选物作为胞质DNA的传感器，但是特别是两种蛋白已被单独的实验室证明在DNA驱动的IFN应答中发挥作用。它们是环状GMP-AMP合成酶(cGAS)和IFNγ诱导因子16(IFI 16)。
[0003]IFI 16是一种胞质和核蛋白，在单链和双链DNA刺激下以及通过感染不同的疱疹病毒，人类免疫缺陷病毒1型(HIV)和细菌，已与诱导I型IFN(IFN-α和IFN-β)相关。cGAS是胞质蛋白，对于感测所有形式的结构化DNA至关重要，并被认为是微生物DNA的关键传感器。它具有产生第二个信使环状GMP-AMP(cGAMP)的酶促能力，其对接在干扰素基因的内质网结合蛋白刺激物(STING)上。这种相互作用诱导构象变化，使STING同源二聚，从ER迁移，并募集TANK结合激酶1(TBK1)。目前尚不清楚如何将TBK1主动招募到STING，但是TBK1未与STING结合会导致免疫激活受损。最近的报告表明，TBK1与STING的结合引发了一系列复杂的事件，包括STING的磷酸化以及IFN调节因子3(IRF3)的募集和激活。在Ser
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处STING磷酸化的缺乏消除了下游信号传导和免疫激活，证明了精确和直接激活STING的重要性。
[0004]对cGAS缺陷小鼠的研究证明了在先天免疫应答中具有清晰的表型。由于小鼠没有人IFI 16的直接直系同源物，因此来自IFI 16缺陷鼠标模型的数据不可用。由于缺乏确定的鼠源IFI 16直系同源物，小鼠模型不适合解析cGAS和IFI 16之间对外源DNA的先天免疫应答中潜在的相互关联。
[0005]与众所周知的cGAS在DNA传感中的作用机制相反，关于IFI 16如何与STING依赖性信号传导相关以及IFI 16是否对cGAS-STING-TBK1途径冗余的知识有限。先前的发现表明，cGAS对DNA的亲和力相对较弱(Kd在20uM范围内)，并且cGAS需要特定大小或结构DNA进行结合。因此，在一种或多种辅助因子的帮助下，cGAS对胞质DNA的有效应答似乎是合理的。
[0006]单纯疱疹病毒-1和-2(HSV-1和HSV-2)是普遍存在且具有高度传染性的DNA病毒，具有建立裂解性和潜伏性感染的能力。对HSV感染的先天免疫感知对于HSV的病毒控制至关重要，因为它可能导致摧毁包括脑炎在内的疾病。宿主蛋白STING与IFI 16协同检测HSV-1和-2，导致产生I型干扰素。但是，IFI 16在针对HSV感染的先天免疫中的作用不仅限于STING介导的应答。已显示IFI 16可通过启动炎性体形成，结合HSV启动子位点来限制HSV-1复制，并引入组蛋白修饰导致抑制病毒DNA转录。
[0007]像大多数病原体一样，HSV已产生了多种机制来避免先天免疫系统的识别。这包括IFI 16降解和I型干扰素表达的抑制。
[0008]概要
[0009]本专利技术公开了源于人IFI 16的热蛋白(pyrin)结构域的新型免疫调节肽。IFI 16的热蛋白结构域参与IFI 16和STING活性，并且本文提供的多肽能够调节这些活性，从而调节受试者的免疫原应答。本文公开的多肽的特异性免疫调节活性为调节STING活性并由此调节先天免疫应答提供了全新方法。
[0010]一方面，源于人IFI 16的热蛋白结构域的免疫调节多肽源于序列KKYKNIVLLKGLEV INDYHF(SEQ ID NO：6)；即，多肽可以包含序列KKYKNIVLLKGLEVINDYHF(SEQ ID NO：6)或其部分。
[0011]该多肽也可以是SEQ ID NO：1的变体。
[0012]在一优选的实施方式中，多肽是SEQ ID NO：6的变体，其中2、3、6、7、8、9、12、13、15和/或17位的一个或多个氨基酸残基保持未被取代。然而，在这些位置上的氨基酸残基也可以被不改变相应氨基酸残基的极性或电荷的任何氨基酸或氨基酸变体取代或修饰。这样的多肽通常保持诱导干扰素应答的能力，因此适合于诱导免疫应答。其他修饰可能至少部分消除多肽诱导干扰素应答的能力。
[0013]在另一优选的实施方式中，多肽是SEQ ID NO：6的变体，其中1、2、6、7、8、9、11、12、13、17、19和/或20位的一个或多个氨基酸残基保持未被取代。然而，在这些位置上的氨基酸残基也可以被不改变相应氨基酸残基的极性或电荷的任何氨基酸或氨基酸变体取代或修饰。这样的多肽通常保持诱导CXCL10细胞因子应答的能力，因此适合于诱导免疫应答。其他修饰可能至少部分消除多肽诱导CXCL10细胞因子应答的能力。
[0014]在另一优选的实施方式中，多肽是SEQ ID NO：6的变体，其中3、5、10、16和/或17位的一个或多个氨基酸残基被改变相应氨基酸残基极性或电荷的任何氨基酸或氨基酸变体取代或修饰。在优选的实施方式中，这些氨基酸中的一个或多个被丙氨酸取代。这样的多肽通常能够引起更强的I型干扰素或细胞因子应答。
[0015]在另一优选的实施方式中，多肽是SEQ ID NO：6的变体，其中6、7、14和/或15位的一个或多个氨基酸残基保持未被取代。然而，在这些位置上的氨基酸残基也可以被不改变相应氨基酸残基的极性或电荷的任何氨基酸或氨基酸变体取代或修饰。这样的多肽通常保持诱导CXCL10细胞因子应答的能力，因此适合于诱导免疫应答。其他修饰可能至少部分消除多肽对HSV感染的抗病毒作用。
[0016]在另一优选的实施方式中，多肽是SEQ ID NO：6的变体，其中10、11和/或17位的一个或多个氨基酸残基被改变相应氨基酸残基的极性或电荷的任何氨基酸或氨基酸变体取代或修饰。在优选的实施方式中，这些氨基酸中的一个或多个被丙氨酸取代。这样的多肽通常能够引起对HSV感染的强抗病毒应答。
[0017]一方面，提供了多肽肽类似物，其中所述多肽或多肽类似物包含以下通式的氨基酸序列：KKX3KNIVLL X
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LX
13
VINX
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YHF(SEQ ID NO：31)，其中X选自任何蛋白(天然)氨基酸残基和非蛋白(非天然)氨基酸残基，条件是X3不是酪氨酸(Y)，X
10
不是赖氨酸(K)，X
13
不是谷氨酸(E)，且X
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不是天冬氨酸(D)。
[0018]优选的实施方式包括多肽或其片段或同源物，多肽包含以下序列或由其组成：KKX3KNIVLLKGLEVINDYHF(SEQ ID NO：4)或KKYKNIVLLX
10
GLEVINDYHF(SEQ ID NO：5)、KKYKNIVLLKGLX
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VINDYHF(SEQ ID NO：本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种多肽或多肽类似物，其特征在于，所述多肽或多肽类似物包含以下通式的氨基酸序列：KKX3KNIVLL X
10
LX
13
VINX
17
YHF(SEQ ID NO：31)，其中X选自任何蛋白氨基酸残基和非蛋白氨基酸残基，条件是X3不是酪氨酸(Y)，X
10
不是赖氨酸(K)，X
13
不是谷氨酸(E)和X
17
不是天冬氨酸(D)。2.如权利要求1所述的多肽，其特征在于，包含序列：KKX3KNIVLLKGLEVINDYHF(SEQ ID NO：4)或KKYKNIVLLX
10
GLEVINDYHF(SEQ ID NO：5)、KKYKNIVLLKGLX
13
VINDYHF(SEQ ID NO：29)或KKYKNIVLLKGLEVINX
17
YHF(SEQ ID NO：30)或KKYKNIVLLKGLEVINDYHF(SEQ ID NO：6)或其变体、或片段或同源物，其中X选自任何蛋白氨基酸残基和非蛋白氨基酸残基，条件是X3不是酪氨酸(Y)，X
10
不是赖氨酸(K)，X
13
不是谷氨酸(E)和X
17
不是天冬氨酸(D)。3.如前述权利要求中任一项所述的多肽，其特征在于，X是选自下组的氨基酸残基：A、R、N、D、B、C、E、Q、Z、G、H、I、L、K、M、F、P、S、T、W和V。4.如前述权利要求中任一项所述的多肽，其特征在于，2、6、7、11、15、16、19和20位的一个或多个上的氨基酸残基(K2、I6、V7、G
11
、I
15
、N
16
、H
19
和F
20
)中的一个或多个保持未被取代和/或未被修饰。5.如前述权利要求中任一项所述的多肽，其特征在于，2、6、7、11、15、16、19和20位的一个或多个氨基酸残基已经被丙氨酸取代。6.如前述权利要求中任一项所述的多肽，其特征在于，所述多肽选自下组：i.KKYKNIVLLKGLEVINDYHF(SEQ ID NO：6)(肽101)ii.AKYKNIVLLKGLEVINDYHF(SEQ ID NO：7)(肽A1)iii.KAYKNIVLLKGLEVINDYHF(SEQ ID NO：8)(肽A2)iv.KKAKNIVLLKGLEVINDYHF(SEQ ID NO：9)(肽A3)v.KKYANIVLLKGLEVINDYHF(SEQ ID NO：10)(肽A4)vi.KKYKAIVLLKGLEVINDYHF(SEQ ID NO：11)(肽A5)vii.KKYKNAVLLKGLEVINDYHF(SEQ ID NO：12)(肽A6)viii.KKYKNIALLKGLEVINDYHF(SEQ ID NO：13)(肽A7)ix.KKYKNIVALKGLEVINDYHF(SEQ ID NO：14)(肽A8)x.KKYKNIVLAKGLEVINDYHF(SEQ ID NO：15)(肽A9)xi.KKYKNIVLLAGLEVINDYHF(SEQ ID NO：16)(肽A10)xii.KKYKNIVLLKALEVINDYHF(SEQ ID NO：17)(肽A11)xiii.KKYKNIVLLKGAEVINDYHF(SEQ ID NO：18)(肽A12)xiv.KKYKNIVLLKGLAVINDYHF(SEQ ID NO：19)(肽A13)xv.KKYKNIVLLKGLEAINDYHF(SEQ ID NO：20)(肽A14)xvi.KKYKNIVLLKGLEVANDYHF(SEQ ID NO：21)(肽A15)xvii.KKYKNIVLLKGLEVIADYHF(SEQ ID NO：22)(肽A16)xviii.KKYKNIVLLKGLEVINAYHF(SEQ ID NO：23)(肽A17)x...

【专利技术属性】
技术研发人员：M，
申请(专利权)人：奥尔胡斯大学，
类型：发明
国别省市：