一种发酵法生产维生素B2的方法技术

本发明专利技术公开了一种发酵法生产维生素B2的方法，它包括配制种子培养基、配制发酵培养基、配制一号补料培养基、配制二号补料培养基和发酵培养，所述的发酵培养包括制备种子液和生产发酵，在生产发酵过程中，根据发酵液中葡萄糖浓度自动流加入葡萄糖水溶液，控制发酵液中葡萄糖浓度为1

【技术实现步骤摘要】
一种发酵法生产维生素B2的方法


[0001]本专利技术属于生物制药
，尤其是一种发酵法生产维生素B2的方法。

技术介绍

[0002]维生素B2别名核黄素，是维生素B族中的成员之一，主要功能是在氨基酸、脂肪酸和碳水化合物的代谢中起作用，是生命活动极其重要的物质，它在人体内不能合成，必须从外界摄取。人缺乏维生素B2将导致口角炎，舌炎，眼炎、结膜炎、阴囊炎等维生素B2缺乏症。维生素B2产品治疗癌症方面日益受到人们的注意，酪酸脂（以维生素B2为原料生产）在日本广泛用于治疗动脉硬化、高血压、糖尿病等顽固的慢性疾病，且有良好反应。
[0003]目前，国内针对微生物发酵生产维生素B2的文献资料较多，但大多数是实验室工艺水平。而且发酵配方复杂，有机氮源过多，发酵过程需氧量大，代谢溢流严重，放罐结束时发酵液固含量高，不利于提取，糖耗高。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于克服上述现有技术中的不足，提供一种发酵法生产维生素B2的方法，该方法培养基配方合理，发酵过程营养供给均匀，糖不积累，保证了菌丝活力，减弱糖代谢溢流，发酵水平高，发酵液固含量低。
[0005]本专利技术的目的是这样实现的：一种发酵法生产维生素B2的方法，它包括配制种子培养基、配制发酵培养基、配制一号补料培养基、配制二号补料培养基和发酵培养，其特征在于：所述的种子培养基包含如下组分：葡萄糖10-20g/L，废糖蜜5-10g/L，酵母浸粉5-10g/L，玉米浆5-10g/L，磷酸二氢钾1-5g/L，硫酸镁1-5g/L，消泡剂0.1-0.6ml/L；所述的发酵培养基包含如下组分：葡萄糖15-30g/L，废糖蜜5-10g/L，酵母粉5-10g/L，豆粕粉1-5g/L，玉米浆10-20g/L，尿素1-5g/L，磷酸二氢钾1-5g/L，硫酸镁1-5g/L，消泡剂0.1-0.6ml/L；所述的一号补料培养基是含量为400-600g/L的葡萄糖水溶液；所述的二号补料培养基包含如下组分：豆粕粉10-20g/L，尿素1-5g/L，玉米浆10-20g/L，消泡剂0.1-0.6ml/L；所述的发酵培养包括如下步骤：（1）按比例将种子培养基投入种子罐内，灭菌完成后接入摇瓶培养液进行通气搅拌培养，控制温度为36-40℃、溶解氧饱和度为30-50%，培养时间5-10小时，制得种子液；（2）按比例将发酵培养基投入发酵罐内灭菌，其中，葡萄糖单独灭菌加入，用氨水调pH值6.0-7.0，移入培养好的种子液进行通气搅拌培养，控制温度为36-40℃、溶解氧饱和度为20-40%；在发酵过程中，根据发酵液中葡萄糖浓度自动流加入一号补料培养基，控制发酵液中葡萄糖浓度为1-5g/L，放罐前1小时停止补料，控制葡萄糖浓度为0g/L放罐；在发酵过程中，
在发酵10小时之后至放罐前10小时自动流加入二号补料培养基，二号补料培养基加入体积量为发酵培养基体积量的5%。
[0006]优选的，所述的种子罐为300L种子罐，所述的发酵罐为3.2m3发酵罐。
[0007]优选的，步骤（1）中，搅拌机的转速为200-300rpm；步骤（2）中，搅拌机的转速为100-150rpm。
[0008]优选的，步骤（1）中，通气量为1-2V/V
•
min；步骤（2）中，通气量为1-1.5V/V
•
min。
[0009]与现有技术相比，本专利技术的有益效果如下：（1）本专利技术的方法是优化发酵基础料配方，调整部分氮源至补料加入，创新性的开发氮源分批流加工艺，保证氮源均匀供给，维持菌丝活力。
[0010]（2）本专利技术的方法是优化补糖工艺，采取糖限制性流加方式，减弱糖代谢溢流，增加磷酸戊糖途径，提高维生素B2发酵水平，最终实现发酵含量提高15%，发酵液固含量降低20%，为提取工序固液分离带来极大益处。
具体实施方式
[0011]下面通过实施例对本专利技术技术方案进行详细的描述。以下具体实施例仅用于更加清楚地说明本专利技术的技术方案，因此只作为示例，而不能以此来限制本专利技术的保护范围。
[0012]实施例1：按葡萄糖15g/L，废糖蜜7.5g/L，酵母浸粉7.5g/L，玉米浆7.5g/L，磷酸二氢钾3g/L，硫酸镁3g/L，泡敌0.2ml/L和余量水的比例配制种子培养基。
[0013]实施例2：按葡萄糖22.5g/L，废糖蜜7.5g/L，酵母粉7.5g/L，豆粕粉3g/L，玉米浆15g/L，尿素3g/L，磷酸二氢钾3g/L，硫酸镁3g/L，泡敌0.2ml/L和余量水的比例配置发酵培养基。
[0014]实施例3：按葡萄糖浓度为500g/L和余量水的比例配制一号补料养基。
[0015]实施例4：按豆粕粉15g/L，尿素3g/L，玉米浆15g/L，泡敌0.2ml/L和余量水的比例配制二号补料养基。
[0016]实施例5：一种发酵法生产维生素B2的方法，按实施例1的比例配制种子培养基，按实施例2的比例配制发酵培养基，按实施例3的比例配制一号补料培养基；实施例4的比例配制一号补料培养基；按如下步骤进行发酵培养：（1）按比例将种子培养基投入300L种子罐内，灭菌完成后接入摇瓶培养液进行通气搅拌培养，控制温度为37-39℃、搅拌机的转速为250rpm，通气量为1-2V/V
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min，溶解氧饱和度为35-45%，培养时间7.5小时，制得种子液；（2）按比例将发酵培养基投入3.2m3发酵罐内灭菌，其中，葡萄糖单独灭菌加入，用氨水调pH值6.2-6.8，移入培养好的种子液进行通气搅拌培养，控制温度为37-39℃、搅拌机的转速为100-150rpm，通气量为1-1.5V/V
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min，溶解氧饱和度为25-35%；在发酵过程中，根据发酵液中葡萄糖浓度自动流加入一号补料培养基，控制发酵液中葡萄糖浓度为3.5g/L，放罐前1小时停止补料，控制葡萄糖浓度为0g/L放罐；在发酵过程中，在发酵10小时之后至放罐前10小时自动流加入二号补料培养基，二号补料培养基加入体积量为发酵培养基体积量的5%。
[0017]实施例6：一种发酵法生产维生素B2的方法，按实施例1的比例配制种子培养基，按实施例2的比例配制发酵培养基，按实施例3的比例配制一号补料培养基；实施例4的比例配
制一号补料培养基；按如下步骤进行发酵培养：（1）按比例将种子培养基投入300L种子罐内，灭菌完成后接入摇瓶培养液进行通气搅拌培养，控制温度为36-38℃、搅拌机的转速为220rpm，通气量为1-2V/V
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min，溶解氧饱和度为30-40%，培养时间6小时，制得种子液；（2）按比例将发酵培养基投入3.2m3发酵罐内灭菌，其中，葡萄糖单独灭菌加入，用氨水调pH值6.0-6.6，移入培养好的种子液进行通气搅拌培养，控制温度为36-38℃、搅拌机的转速为100-150rpm，通气量为1-1.5V/V
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min，溶解氧饱和度为20-30%；在发酵过程中，根据发酵液中葡萄糖浓度自动流加入一号补料培养基，控制发酵液中葡萄糖浓度为本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种发酵法生产维生素B2的方法，它包括配制种子培养基、配制发酵培养基、配制一号补料培养基、配制二号补料培养基和发酵培养，其特征在于：所述的种子培养基包含如下组分：葡萄糖10-20g/L，废糖蜜5-10g/L，酵母浸粉5-10g/L，玉米浆5-10g/L，磷酸二氢钾1-5g/L，硫酸镁1-5g/L，消泡剂0.1-0.6ml/L；所述的发酵培养基包含如下组分：葡萄糖15-30g/L，废糖蜜5-10g/L，酵母粉5-10g/L，豆粕粉1-5g/L，玉米浆10-20g/L，尿素1-5g/L，磷酸二氢钾1-5g/L，硫酸镁1-5g/L，消泡剂0.1-0.6ml/L；所述的一号补料培养基是含量为400-600g/L的葡萄糖水溶液；所述的二号补料培养基包含如下组分：豆粕粉10-20g/L，尿素1-5g/L，玉米浆10-20g/L，消泡剂0.1-0.6ml/L；所述的发酵培养包括如下步骤：（1）按比例将种子培养基投入种子罐内，灭菌完成后接入摇瓶培养液进行通气搅拌培养，控制温度为36-40℃、溶解氧饱和度为30-50%，培养时间5-10小时，制得种子液；（2）按比例...

【专利技术属性】
技术研发人员：张国银，巴一峰，丛立双，张国福，曹凤娟，隋玉海，
申请(专利权)人：赤峰制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：