基于番茄灰叶斑病抗性基因Sm的CAPS分子标记、引物、检测方法、检测试剂盒与应用技术

本发明专利技术涉及基于番茄灰叶斑病抗性基因Sm的CAPS分子标记、引物、检测方法、检测试剂盒与应用，属于植物分子生物技术领域。为解决现有番茄灰叶斑病抗性基因连锁的分子标记存在带型不稳定，特异性不强的问题，本发明专利技术提供了基于番茄灰叶斑病抗性基因Sm的CAPS分子标记及其扩增引物、包括利用该扩增引物PCR扩增和对扩增产物酶切的检测方法以及含有该扩增引物的检测试剂盒。本发明专利技术提供的CAPS分子标记带型稳定、易于区分、准确率高、特异性强；检测方法操作简捷、扩增结果精准度高、成本低，在田间抗病性鉴定中具有较高的稳定性，基因型和田间表型吻合率高达90.19％，能够应用于选育番茄灰叶斑病抗性种质资源。叶斑病抗性种质资源。叶斑病抗性种质资源。

【技术实现步骤摘要】
基于番茄灰叶斑病抗性基因Sm的CAPS分子标记、引物、检测方法、检测试剂盒与应用


[0001]本专利技术属于植物分子生物
，尤其涉及基于番茄灰叶斑病抗性基因Sm的CAPS分子标记、引物、检测方法、检测试剂盒与应用。

技术介绍

[0002]番茄是在世界范围内广泛种植的重要蔬菜之一，其在生长过程中常常会受到病虫的危害。番茄灰叶斑病(Tomato gray leaf spot)是近年来流行的一种病害，该病病原为匍柄霉(Stemphylium)真菌，为半知菌亚门丝孢纲成员，可引起多种蔬菜病害。番茄灰叶斑病在世界范围内均有发生，温暖潮湿地区尤为严重。番茄灰叶斑病爆发严重，可导致番茄减产20％～80％，影响番茄的产量和质量。
[0003]目前，已被发现并可利用的番茄灰叶斑病抗性基因只有Sm基因，为单基因不完全显性遗传。该基因虽已被转育到栽培品种中，但至今其抗性仍未被克服。近年来，前人利用一些抗病材料对番茄灰叶斑病的抗性遗传规律及分子标记也进行了初步探究。例如RFLP标记CT55、C2_At4g10050和C2_At2g14260均与Sm基因连本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于番茄灰叶斑病抗性基因Sm的CAPS分子标记，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。2.如权利要求1所述基于番茄灰叶斑病抗性基因Sm的CAPS分子标记的扩增引物，其特征在于，所述扩增引物的核苷酸序列为：正向引物序列：5
’-
GTCCGAGCAACATAGCTCCC-3
’
反向引物序列：5
’-
ATGGACCAACCTTGCAAACG-3
’
。3.一种番茄灰叶斑病抗性基因Sm的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一、以待测番茄材料的基因组DNA为模板，利用基于番茄灰叶斑病抗性基因Sm的CAPS分子标记的扩增引物进行PCR扩增，所述扩增引物的核苷酸序列为：正向引物序列：5
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GTCCGAGCAACATAGCTCCC-3
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、反向引物序列：5
’-
ATGGACCAACCTTGCAAACG-3
’
；步骤二、经PCR扩增得到如SEQ ID No.1所示CAPS分子标记的植株为携带抗性基因Sm的植株，其所得扩增产物经限制性内切酶TaqⅠ酶切，当酶切获得长度分别为589bp和208bp的两条特异性谱带时，待测番茄材料携带番茄灰叶斑病抗性基因Sm且为阳性纯合基因型；当酶切获得长度分别为589bp、208bp和797bp的三条特异性谱带时，待测番茄材料携带番茄灰叶斑病抗性基因Sm且为阳性杂合基因型；经PCR扩增未得到如SEQ ID No.1所示CAPS分子标记的植株为不携带抗性基因Sm的植株，其所得扩增产物经限制性内切酶TaqⅠ酶切，当酶切获得的是长度为797bp的一条特异性谱带时，待测番茄材料不携带番茄灰叶斑病抗性基因Sm且为阴性纯合基因型。4.根据权利要求3所述一种番茄灰叶斑病抗性基因Sm的检测方法，其特征在于，步骤一所述PCR扩增...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨欢欢，姜景彬，刘明月，许向阳，李景富，赵婷婷，张贺，孙要光，王鹤璇，
申请(专利权)人：东北农业大学，
类型：发明
国别省市：