人A1星形胶质细胞的制造方法、人A1星形胶质细胞及被测物质的评价方法技术

本发明专利技术的课题在于提供一种包括从除了人A1星形胶质细胞以外的人星形胶质细胞诱导人A1星形胶质细胞的人A1星形胶质细胞的制造方法；通过上述人A1星形胶质细胞的制造方法获得的人A1星形胶质细胞；及使用了人A1星形胶质细胞的被测物质的评价方法。根据本发明专利技术，可提供一种人A1星形胶质细胞的制造方法，其包括在TNFα及IFNγ的存在下培养除了人A1星形胶质细胞以外的人星形胶质细胞的工序a。细胞以外的人星形胶质细胞的工序a。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】人A1星形胶质细胞的制造方法、人A1星形胶质细胞及被测物质的评价方法


[0001]本专利技术涉及一种人A1星形胶质细胞的制造方法及人A1星形胶质细胞。而且，本专利技术涉及一种使用了所制造的人A1星形胶质细胞的被测物质的筛选方法。

技术介绍

[0002]作为构成脑的神经胶质细胞的一种的星形胶质细胞发挥针对神经元的营养供给、突触形成或消除等、维持中枢神经系统的稳态的各种作用，且从疾病的机理阐明或创药的观点备受瞩目。
[0003]已知星形胶质细胞通过神经疾病或衰老而被活化。近年报导有活化星形胶质细胞中存在神经障碍性A1星形胶质细胞和神经保护性A2星形胶质细胞这两种(非专利文献1及专利文献1)。从能够在抑制神经损伤的药剂的筛选中利用等创药研究方面考虑，人的A1星形胶质细胞的价值大。
[0004]关于星形胶质细胞的活化，非专利文献1中记载有通过TNFα、IL-1α、C1q这三种成分将小鼠的(未被活化)星形胶质细胞诱导成A1星形胶质细胞。但是，报道有小鼠与人的星形胶质细胞存在种差(非专利文献2)，且尚不明确在人星形胶质细胞中是否也能够同样地诱导。
[0005]专利文献2中记载有诸如TNFα或IFNγ之类的炎症细胞因子参与星形胶质细胞的活化的建议、通过TNFα、IFNγ及MPTP这三种成分对小鼠的(未被活化)星形胶质细胞进行了活化。但是，星形胶质细胞的活化结果，尚不明确被诱导成A1星形胶质细胞或A2星形胶质细胞中的哪一个，并且还不明确在人星形胶质细胞中是否也产生相同的活化。
[0006]非专利文献3中记载有IFNγ及IL-1β参与人的星形胶质细胞的活化。但是，星形胶质细胞活化的结果，尚不明确被诱导成A1星形胶质细胞或A2星形胶质细胞中的哪一个。
[0007]现有技术文献
[0008]专利文献
[0009]专利文献1：美国专利申请公开US2016/0340648
[0010]专利文献2：美国专利申请公开US2010/0087504
[0011]非专利文献
[0012]非专利文献1：Nature,2017年，541卷，481-487页
[0013]非专利文献2：Neuron,2016年，89卷，1号,37-53页
[0014]非专利文献3：Glia,2014年，62卷,999-1013页

技术实现思路

[0015]专利技术要解决的技术课题
[0016]从创药研究的方面考虑，人的A1星形胶质细胞的价值大，并要求用于轻松地获得人的A1星形胶质细胞的方法。如上所述，关于星形胶质细胞的活化及诱导获得了一定的成
果，但尚未发现用于可靠地从人星形胶质细胞诱导成人A1星形胶质细胞的方法。本专利技术应解决的课题在于提供一种包括从除了人A1星形胶质细胞以外的人星形胶质细胞诱导人A1星形胶质细胞的人A1星形胶质细胞的制造方法。本专利技术应解决的课题在于还提供一种通过上述人A1星形胶质细胞的制造方法获得的人A1星形胶质细胞。本专利技术应解决的课题在于还提供一种使用了上述人A1星形胶质细胞的被测物质的评价方法。
[0017]用于解决技术课题的手段
[0018]本专利技术人等为了解决上述课题而进行了深入研究的结果，发现通过在TNFα及IFNγ的存在下培养除了人A1星形胶质细胞以外的人星形胶质细胞而能够将上述人星形胶质细胞诱导成人A1星形胶质细胞。本专利技术根据这些发现而完成。
[0019]即，根据本专利技术，可提供以下专利技术。
[0020]＜1＞一种人A1星形胶质细胞的制造方法，其包括在TNFα及IFNγ的存在下培养除了人A1星形胶质细胞以外的人星形胶质细胞的工序a。
[0021]＜2＞根据＜1＞所述的人A1星形胶质细胞的制造方法，其还在选自包括IL-1α、IL-1β及C1q的组中的至少一个细胞因子和/或补体的存在下进行上述工序a。
[0022]＜3＞根据＜1＞或＜2＞所述的人A1星形胶质细胞的制造方法，其在下述任一种的存在下进行上述工序a。
[0023](1)TNFα、IFNγ、IL-1α、IL-1β
[0024](2)TNFα、IFNγ、IL-1α、C1q
[0025](3)TNFα、IFNγ、IL-1β、C1q
[0026](4)TNFα、IFNγ、IL-1α、IL-1β、C1q
[0027](5)TNFα、IFNγ
[0028]＜4＞根据＜1＞至＜3＞中任一项所述的人A1星形胶质细胞的制造方法，其中，
[0029]上述工序a包括：工序a1，将能够分化成人多能干细胞或人星形胶质细胞的细胞分化成除了人A1星形胶质细胞以外的人星形胶质细胞；及工序a2，在TNFα及IFNγ的存在下培养在工序a1中获得的除了人A1星形胶质细胞以外的人星形胶质细胞。
[0030]＜5＞根据＜1＞至＜4＞中任一项所述的人A1星形胶质细胞的制造方法，其中，
[0031]在上述工序a中培养的除了人A1星形胶质细胞以外的人星形胶质细胞为人A2星形胶质细胞。
[0032]＜6＞根据＜1＞至＜5＞中任一项所述的人A1星形胶质细胞的制造方法，其中，
[0033]上述工序a为无血清培养基中的培养。
[0034]＜7＞根据＜1＞至＜6＞中任一项所述的人A1星形胶质细胞的制造方法，其中，
[0035]在上述工序a中，TNFα在培养基中的浓度为0.01ng/mL～30ng/mL。
[0036]＜8＞根据＜1＞至＜7＞中任一项所述的人A1星形胶质细胞的制造方法，其中，
[0037]在上述工序a中，IFNγ在培养基中的浓度为0.1ng/mL～20ng/mL。
[0038]＜9＞根据＜1＞至＜8＞中任一项所述的人A1星形胶质细胞的制造方法，其中，
[0039]在上述工序a中，TNFα在培养基中的浓度与IFNγ在培养基中的浓度之比为100:1～1:100。
[0040]＜10＞一种人A1星形胶质细胞，其为通过＜1＞至＜9＞中任一项所述的人A1星形胶质细胞的制造方法而获得的经分离的人A1星形胶质细胞。
[0041]＜11＞一种被测物质的评价方法，其包括使＜10＞所述的人A1星形胶质细胞与被测物质接触。
[0042]＜12＞根据＜11＞所述的被测物质的评价方法，其中，
[0043]在使＜10＞所述的人A1星形胶质细胞与被测物质接触之后，对上述人A1星形胶质细胞所具有的神经障碍性的变化进行评价。
[0044]专利技术效果
[0045]根据本专利技术，能够从人星形胶质细胞制造人A1星形胶质细胞。本专利技术的人A1星形胶质细胞及本专利技术的被测物质的评价方法在创药研究等中有用。
附图说明
[0046]图1中示出在特定组合的化合物的存在下培养人星形胶质细胞之后的状态。
[0047]图2中示出在特定组合的化合物的存在下培养人星形胶质细胞(从星形胶质细胞前体细胞诱导)之后的状态。
[0048]图3中示出在特定组合的化合物的存本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种人A1星形胶质细胞的制造方法，其包括在TNFα及IFNγ的存在下培养除了人A1星形胶质细胞以外的人星形胶质细胞的工序a。2.根据权利要求1所述的人A1星形胶质细胞的制造方法，其还在选自由IL-1α、IL-1β及C1q组成的组中的至少一个细胞因子和/或补体的存在下进行所述工序a。3.根据权利要求1或2所述的人A1星形胶质细胞的制造方法，其在下述任一种的存在下进行所述工序a，(1)TNFα、IFNγ、IL-1α、IL-1β；(2)TNFα、IFNγ、IL-1α、C1q；(3)TNFα、IFNγ、IL-1β、C1q；(4)TNFα、IFNγ、IL-1α、IL-1β、C1q；(5)TNFα、IFNγ。4.根据权利要求1至3中任一项所述的人A1星形胶质细胞的制造方法，其中，所述工序a包括：工序a1，使能够分化成人多能干细胞或人星形胶质细胞的细胞分化成除了人A1星形胶质细胞以外的人星形胶质细胞；及工序a2，在TNFα及IFNγ的存在下培养在工序a1中获得的除了人A1星形胶质细胞以外的人星形胶质细胞。5.根据权利要求1至4中任一项所述的人A1星形胶质细胞的制造方法，其中，在所述工序a中培养的除了人A1星形胶质细...

【专利技术属性】
技术研发人员：小林速人，远藤摄，锅谷彰，申义庚，
申请(专利权)人：富士胶片株式会社，
类型：发明
国别省市：