一种能降解生物胺且耐盐的植物乳杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种能降解生物胺且耐盐的植物乳杆菌和包含该植物乳杆菌的一种菌剂，及它们在降解生物胺中的应用，以及在制备发酵食品中中的应用；所述植物乳杆菌在中国典型培养物保藏中心进行保藏，保藏地址为湖北省武汉市，保藏编号为CCTCC NO：M 2019757。该植物乳杆菌SHY610能降解食品中的生物胺，降解率高，对尸胺、组胺、酪胺的降解率分别达到了62.42％、74.32％和89.97％；SHY610还具有良好的耐盐特性，在含盐量高达9.00％的环境中也能够较好的生长繁殖，也适合于含盐量较高的发酵食品生产。

【技术实现步骤摘要】
一种能降解生物胺且耐盐的植物乳杆菌及其应用
本专利技术涉及微生物及食品发酵
，具体涉及一种能降解生物胺且耐盐的植物乳杆菌及其应用。
技术介绍
传统牦牛酸奶是青藏高原地区牧民用牦牛乳经传统自然发酵的方法制作而成，是青藏高原地区牧民日常食用的特有美食，具有悠久历史，经过长时间的自然选择，部分具有益生特性和优良品质的菌种被保留下来。牦牛乳中不仅含有丰富的维生素同时也包含人体所需的8种必需氨基酸，而且含有丰富的乳酸菌资源。乳酸菌是一类对宿主有益且能在碳水化合物中发酵产生大量乳酸的细菌的统称。研究表明，益生乳酸菌具有改善和调节肠道菌群、抑制致病菌的生长、调节机体血糖平衡、降低血清胆固醇、预防肿瘤发生等功效。目前我国市场销售的益生菌发酵乳制品的发酵菌种大部分采用嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌。上述两种菌种的商品化使用，使得市售酸奶中的乳酸菌无法呈现多样性。此外，我国乳制品行业大多采用国外益生菌发酵剂，成本高的同时也制约我国益生乳酸菌产业的发展。对于这些国外的菌种我国乳制品企业都没有自主知识产权，只有使用权，解决这一问题应从研发具有自主知识产权的益生乳酸菌菌种和发酵剂相关技术及产品出发。因此，合理充分利用我国青藏高原等地区的乳酸菌资源，筛选出具有优良特性的菌种，对提高我国益生菌品质和发酵食品的国际竞争力、开发自主知识产权的益生菌具有重要意义。生物胺是一类具有生物活性、含氮低分子量的有机化合物，主要由微生物的氨基酸脱羧酶对氨基酸(即组氨酸、酪氨酸、鸟氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸和色氨酸)的脱羧作用而形成的有机化合物(即组胺、酪胺、腐胺、尸胺、苯乙胺和色胺)。研究表明摄入适量浓度的生物胺能够促进生长、增强代谢活力、加强肠道免疫系统、控制血压和消除自由基等，但生物胺也是生成致癌物质和亚硝酸物质的前体，摄入的浓度过高则会对人体产生毒害作用，造成心血管疾病和神经系统的损伤等。尸胺虽然本身的毒性较低，但是它可以抑制组胺和酪胺代谢酶，使组胺和酪胺的毒性增强。目前生产上控制生物胺一般采用超高压处理、使用食品添加剂和低温保藏等方法，这些方法均能够在一定程度上减少食品中生物胺含量，但不能够降解已经产生的生物胺，而且这些方法会对食品的风味或质量产生影响。利用发酵剂来控制发酵食品中的生物胺含量具有高效安全、成本低等特点。已有研究表明，传统发酵食品中乳酸菌具有降解生物胺的能力。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对上述问题，提供一种能降解生物胺且耐盐的植物乳杆菌及其应用。本专利技术为了实现其目的，采用的技术方案是：一种能降解生物胺且耐盐的植物乳杆菌，所述植物乳杆菌在中国典型培养物保藏中心进行保藏，保藏编号为CCTCCNO：M2019757。一种菌剂，所述菌剂包含上述的植物乳杆菌。上述的植物乳杆菌或菌剂在降解生物胺中的应用。所述生物胺为尸胺、组胺和酪胺。上述的植物乳杆菌或菌剂在制备发酵食品中中的应用。所述发酵食品包括发酵乳、泡菜、豆豉、芽菜、豆瓣、大酱、鱼露、腌鱼、腊肉、火腿。本专利技术的有益效果是：提供的植物乳杆菌SHY610能降解食品中的生物胺，降解率高，对尸胺、组胺、酪胺的降解率分别达到了62.42％、74.32％和89.97％；SHY610还具有良好的耐盐特性，在含盐量高达9.00％的环境中也能够较好的生长繁殖，也适合于含盐量较高的发酵食品生产。该乳杆菌是从发酵牦牛酸乳中筛选得到的，具有优良益生特性，因此该乳杆菌尤其适合于干酪和豆豉等食品的生产，对于功能性乳酸菌发酵剂的研发、建立乳酸菌菌种资源库以及一定程度解决食品安全问题具有重要的现实意义。附图说明图1为植物乳杆菌SHY610观察图，其中，(a)为菌落形态图，(b)为革兰氏染色结果。图2为植物乳杆菌SHY610的API50CH反应结果。图3为显色培养试验结果图。图4为生物胺HPLC标准品谱图，图中，1为尸胺，2为组胺，3为酪胺。图5为生物胺含量标准曲线图。图6为植物乳杆菌SHY610在不同含盐量下耐盐性结果图。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步说明，但并不因此而限制本专利技术。下述实施例中的实验方法，如无特别说明，均为常规方法。主要试剂来源或成分：碳水化合物鉴定试剂盒API50CH：品牌梅里埃；生物胺标准品购于Sigma公司；MRS肉汤:酪蛋白酶消化物10.0g/L，牛肉膏粉10.0g/L，酵母膏粉4.0g/L，葡萄糖20.0g/L，硫酸镁0.2g/L，乙酸钠5.0g/L，柠檬酸三铵2.0g/L，磷酸氢二钾2.0g/L，硫酸锰0.05g/L，吐温801.08g/L，最终pH为5.7±0.2。MRS液体培养基:酪蛋白酶消化物10.0g/L，牛肉膏粉10.0g/L，酵母膏粉4.0g/L，葡萄糖20.0g/L，硫酸镁0.2g/L，乙酸钠5.0g/L，柠檬酸三铵2.0g/L，磷酸氢二钾2.0g/L，硫酸锰0.05g/L，吐温801.08g/L，最终pH为5.7±0.2。其余试剂如未表明，均为本领域常规试剂，可商购获得。实施例1植物乳杆菌SHY610的鉴定与降解生物胺、耐盐实验1实验材料从四川省阿坝藏族羌族自治州红原县地区牧民家中采集的传统发酵牦牛酸乳分离筛选得到的乳酸菌。2实验方法2.1菌株鉴定试验将保藏在安瓿管中的乳酸菌接种到MRS肉汤中，活化两代后进行平板划线和革兰氏染色镜检，若菌株为纯种则采用细菌基因组DNA提取试剂盒提取菌株的DNA。使用细菌通用引物27F(5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’，SEQIDNo.1)和1492R(5’-TACGGYTACCTTGTTACGACTT-3’，SEQIDNo.2)、采用25μL反应体系对其16SrDNA进行PCR扩增，反应结束后利用琼脂糖凝胶电泳进行检测。合格后委托华大基因科技有限公司对PCR扩增产物进行双向测序，测序结果通过NCBI中的BLAST程序进行同源性比对分析。将该菌株命名为SHY610。2.2API试剂盒鉴定将菌株在37℃培养18h，于4000r/min、10min的条件下离心收集菌体，用无菌生理盐水洗涤菌体后重悬为菌悬液。采用碳水化合物鉴定试剂条(API50CH)鉴定菌株的生化特性，具体操作步骤参考试剂条说明书进行操作。2.3显色培养试验取活化好的菌悬液(107cfu/mL)以2％的接种量接入到显色培养基中，37℃培养48h，记录实验结果，显紫色的为阳性，显黄色即不变色的为阴性。做3组平行，空白培养基作对照组。若结果为阴性则进行下一步实验。2.4生物胺测定试验2.4.1柱前衍生2mL的生物胺标准混合溶液(尸胺、组胺、酪胺)，加入1mL2mol/LNaOH溶液、10μL苯甲酰氯，然后旋涡振荡30s，置于30℃水浴条件下避光反应40min，期间每隔10min振荡一次。反应完后用2mL饱和NaCl溶液中断反应。然后用3mL乙醚萃取，1200本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种能降解生物胺且耐盐的植物乳杆菌，其特征在于：所述植物乳杆菌在中国典型培养物保藏中心进行保藏，保藏编号为CCTCC NO：M 2019757。/n

【技术特征摘要】
1.一种能降解生物胺且耐盐的植物乳杆菌，其特征在于：所述植物乳杆菌在中国典型培养物保藏中心进行保藏，保藏编号为CCTCCNO：M2019757。


2.一种菌剂，其特征在于：所述菌剂包含权利要求1所述的植物乳杆菌。


3.权利要求1所述的植物乳杆菌或权利要求2所述的菌剂在降解生物胺中的应用。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：索化夷，曾维友，周於强，
申请(专利权)人：西南大学，重庆市江津区农业农村委员会，
类型：发明
国别省市：重庆;50