抗细胞衰老制剂及其制备方法和应用、细胞及其构建方法技术

本发明专利技术涉及一种抗细胞衰老制剂及其制备方法和应用、细胞及其构建方法。该抗细胞衰老制剂含有过表达人FGF2基因的永生化哺乳动物胚胎成纤维细胞的细胞培养上清或细胞培养上清的提取物。本发明专利技术使用哺乳动物成纤维永久细胞构建过表达FGF2基因的永久细胞，以此培养，获取细胞培养上清或细胞培养上清的提取物来制备抗细胞衰老制剂。通过严格的功能实验验证，发现该制剂具有明确的抵抗细胞衰老、维持干细胞分化潜能的作用，通过使用该制剂，可以使得皮肤触感更加光滑、弹性增加、皱纹减少，具有明显的抗衰效果。

【技术实现步骤摘要】
抗细胞衰老制剂及其制备方法和应用、细胞及其构建方法
本专利技术涉及化妆品
，尤其是涉及一种抗细胞衰老制剂及其制备方法和应用、细胞及其构建方法。
技术介绍
衰老是细胞进入终末分化后的一种不可逆的相对稳定状态。衰老细胞的主要特征包括：(1)细胞停止分裂；(2)表达特异性的衰老相关半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase，SA-β-Gal)；(3)细胞核内染色质凝集、端粒缩短；(4)大量合成一些基质重构蛋白、趋化因子和炎性因子，也被称为衰老相关分泌表型。衰老细胞的基因表达和性状发生改变，往往失去正常细胞的功能。不仅如此，衰老细胞还能激活炎症反应引起组织损伤，甚至具有发生癌变的潜能。1965年，美国LeonardHayflick等发现体外培养的人胚胎成纤维细胞经历有限次(约50次)分裂后即进入衰老状态。细胞所能经历的分裂次数也被称为Hayflick界限。Hayflick界限的存在说明正常人体细胞的寿命都是有限的。引起细胞衰老的原因有多种，例如细胞持续复制分裂使得端粒逐渐缩短，造成染色体稳定性下降本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗细胞衰老制剂，其特征在于，含有过表达人FGF2基因的永生化哺乳动物胚胎成纤维细胞的细胞培养上清或细胞培养上清的提取物。/n

【技术特征摘要】
1.一种抗细胞衰老制剂，其特征在于，含有过表达人FGF2基因的永生化哺乳动物胚胎成纤维细胞的细胞培养上清或细胞培养上清的提取物。


2.如权利要求1所述的抗细胞衰老制剂，其特征在于，所述永生化哺乳动物胚胎成纤维细胞是NIH-3T3细胞。


3.如权利要求1或2所述的抗细胞衰老制剂，其特征在于，所述人FGF2基因是以人cDNA为模板，以序列如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示的扩增引物扩增出的；和/或
所述人FGF2基因是以重组表达载体的形式存在于所述永生化哺乳动物胚胎成纤维细胞中。


4.如权利要求3所述的抗细胞衰老制剂，其特征在于，所述重组表达载体是将以人cDNA为模板、以序列如SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示的带有双酶切位点的扩增引物扩增出的基因片段双酶切后插入至同样双酶切的pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro质粒载体中得到的。


5.如权利要求1～2及4中任一项所述的抗细胞衰老制剂，其特征在于，所述抗细胞衰老制剂是将所述细胞培养上清或所述细胞培养上清的提取物溶于甘油中制备得到。


6.一种权利要求1～5中任一项所述的抗细胞衰老制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
培养过表达人FGF2基因的永生化哺乳动物胚胎成纤维细胞；
收集细胞培养上清，使用该细胞培养上清或其提取物制备抗细胞衰老制剂。


7.如权利要求6所述的抗细胞衰老制剂的制备方法，其特征在于，所述培养过表达...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩荣飞，郗雪艳，郭阳，杜伯雨，
申请(专利权)人：湖北医药学院，
类型：发明
国别省市：湖北;42