【技术实现步骤摘要】
一种粒细胞集落刺激因子重组蛋白、缀合物及其应用
本专利技术涉及一种重组蛋白或者重组蛋白的缀合物，特别涉及粒细胞集落刺激因子(G-CSF)重组蛋白以及缀合物，制备所述重组蛋白和缀合物的方法以及其在中性粒细胞减少症的治疗方面的应用。
技术介绍
中性粒细胞减少是肿瘤放化疗中常见的不良反应，是引起化疗延迟和减量的首要原因，也是导致放疗暂停的重要原因，随之引起的中性粒细胞减少性发热(febrileneutropenia，FN)可危及生命，是最重要的肿瘤急症之一。人粒细胞集落剌激因子(G-CSF),是一种来源于单核细胞和纤维组织母细胞的长链多肽糖蛋白，能够通过特异性结合细胞髓细胞表面的受体，刺激嗜中性粒细胞的前体进行分裂，促进血液中的中性粒细胞数增加。目前市面上存在多种商业化的G-CSF制剂被用于治疗中性粒细胞减少症，如非格司亭(filgrastim)(商品名为)、雷诺司亭(lenograstim)(商品名为和)、那曲司亭(nartograstim)(商品名为)等和国产药物瑞白等。然而，天然的G-CSF全长174个氨基酸...
【技术保护点】
1.一种粒细胞集落刺激因子(G-CSF)重组蛋白，其包括粒细胞集落刺激因子活性多肽以及包含Sortase酶识别位点的多肽区段P，所述活性多肽与所述多肽区段P直接连接或者通过接头L连接，所述多肽区段P优选连接于所述活性多肽的C端或者N端，更优选C端；所述Sortase酶例如是Sortase A或Sortase B；优选的，所述多肽区段P包含Sortase A的核心识别位点LPXTG，其中X是任意氨基酸，例如LPETG、LPETGG或LPETGGG；还优选的，所述多肽区段P还包含与Sortase酶识别位点连接的亲和标签，例如，所述多肽区段P选自LPETGGHHHHHH和LPET...
【技术特征摘要】
1.一种粒细胞集落刺激因子(G-CSF)重组蛋白，其包括粒细胞集落刺激因子活性多肽以及包含Sortase酶识别位点的多肽区段P，所述活性多肽与所述多肽区段P直接连接或者通过接头L连接，所述多肽区段P优选连接于所述活性多肽的C端或者N端，更优选C端；所述Sortase酶例如是SortaseA或SortaseB；优选的，所述多肽区段P包含SortaseA的核心识别位点LPXTG，其中X是任意氨基酸，例如LPETG、LPETGG或LPETGGG；还优选的，所述多肽区段P还包含与Sortase酶识别位点连接的亲和标签，例如，所述多肽区段P选自LPETGGHHHHHH和LPETGGWSHPQFEK。
2.根据权利要求1所述的重组蛋白，其中所述粒细胞集落刺激因子活性多肽源自人；优选地，所述粒细胞集落刺激因子活性多肽可包含1个或更多个氨基酸突变，条件是仍保留其活性；例如所述粒细胞集落刺激因子活性多肽包含SEQIDNO：1的第1位至第175位所示的氨基酸序列，或者与SEQIDNO：1的第1位至第175位所示的所示氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％、96％、98％、99％或更高的一致性。
3.根据权利要求1或2所述的重组蛋白，其中所述接头L为包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10个或更多个氨基酸的肽段；优选地，所述接头L为包含甘氨酸(Gly，G)、丝氨酸(Ser，S)、丙氨酸(Ala，A)和/或苏氨酸(Thr，T)的柔性肽段，例如，(GS)w(GGS)x(GGGS)y(GGGGS)z，其中w、x、y和z分别选自0至50的整数，例如0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20，还优选地，w、x、y和z不同时为0；
更优选地，所述接头L的序列为：GGGGSGGGGSGGGGS(SEQIDNO：3)。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的重组蛋白，其包含如SEQIDNO：1所示的序列，或者由如SEQIDNO：2所示的核酸分子编码。
5.一种缀合物，其中亲水聚合物分子连接至权利要求1至4中任一项所述重组蛋白的末端，所述末端例如N末端或者C末端，优选地经转肽反应连接至所述Sortase酶识别位点。
6.根据权利要求5的缀合物，其中所述亲水聚合物分子选自多糖和聚亚烷基二醇，如聚丙二醇和聚乙二醇；所述聚亚烷基二醇可以是末端封端的，例如经烷氧基如甲氧基封端的；和/或所述聚亚烷基二醇是直链的或支链的；所述聚亚烷基二醇的分子量可以是>＝1、>＝10、>＝20、>＝3...
【专利技术属性】
技术研发人员：阎海霞，高洁，王双，康红智，
申请(专利权)人：北京辅仁瑞辉生物医药研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。