一种黑果荚蒾提取物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种黑果荚蒾提取物及其制备方法和应用，该黑果荚蒾提取物中的多酚类物质含量不低于50％。该黑果荚蒾提取物的制备方法包含以下步骤：(1)粗提取物的制备；(2)浸膏一的制备；(3)浸膏二的制备；(4)总多酚提取物的制备，该方法可以对多酚物质进行有效提取，产物收率高，工艺稳定，简便易行。所得黑果荚蒾提取物具有较强的醛糖还原酶抑制活性，可制备为预防和/或缓解糖尿病并发症的药物。

【技术实现步骤摘要】
一种黑果荚蒾提取物及其制备方法和应用
本专利技术涉及一种黑果荚蒾提取物及其制备方法和应用，尤其涉及一种可制备为预防和/或缓解糖尿病并发症药物的黑果荚蒾提取物及其制备方法和应用。
技术介绍
糖尿病是以血糖水平升高为特征的全身代谢疾病。据国际糖尿病联盟(InternationalDiabetesFederation，IDF)统计，2019年全球约有4.63亿糖尿病患者，而我国约有1.164亿，是糖尿病患者最多的国家。随着糖尿病病情的发展，持续高血糖所诱发的糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变和糖尿病神经病变等慢性并发症是糖尿病致死、致残的主要原因。多元醇代谢通路(polyolpathway，PP)的激活与糖尿病并发症的发生、发展有着密切的联系。醛糖还原酶(AldoseReductase，AR)是多元醇通路的关键限速酶。在高血糖浓度环境下，醛糖还原酶被激活，细胞内的葡萄糖被还原成山梨醇，大量的山梨醇不易通过细胞膜而在细胞内大量聚集，进而导致细胞处于高渗状态并引起一系列代谢混乱。该通路的活化正是糖尿病并发症产生的主要原因，所以以醛糖还原酶为靶点，寻找抑制其活性的物质可有效降低糖尿病并发症的发生概率。黑果荚蒾(ViburnummelanocarpumP.S.Hsu)为忍冬科荚蒾属植物，落叶灌木，分布于江苏、安徽、浙江东、江西等地，其果实作为传统中药，可用于治疗炎症及创伤性出血。现代研究表明，部分荚蒾属植物果实中含有的多酚类物质，如欧洲荚蒾和地中海荚蒾，具有较强的防治慢性疾病的作用。目前尚未有关于黑果荚蒾果实化学成分及其生物活性的报道，这在很大程度上限制了黑果荚蒾果实的开发和利用。
技术实现思路
专利技术目的：本专利技术第一目的是提供一种可制备为预防和/或缓解糖尿病并发症药物的黑果荚蒾提取物，第二目的是提供一种所述黑果荚蒾提取物的制备方法，第三目的是提供一种所述黑果荚蒾提取物在制备醛糖还原酶抑制剂药物中的应用。技术方案：本专利技术的黑果荚蒾提取物中的多酚类物质含量不低于50％。其中，所述黑果荚蒾提取物的提取原材料为成熟期的黑果荚蒾果实，该生长期的黑果荚蒾果实，果皮皮层松软易破碎，果实中多酚类物质丰富，可以提高提取物中多酚类物质的有效含量。本专利技术还公开了所述黑果荚蒾提取物的制备方法，该制备方法包含以下步骤：(1)粗提取物的制备；(2)浸膏一的制备：将步骤(1)所得粗提取物先用石油醚、环己烷或正己烷提取，再用甲醇或乙醇提取，然后浓缩；(3)浸膏二的制备：将步骤(2)所得浸膏一经树脂一处理，然后浓缩；(4)总多酚提取物的制备：将步骤(3)所得浸膏二经树脂二处理，然后浓缩。其中，步骤(1)中所述粗提取物的制备方法为将黑果荚蒾果实去核后，以体积分数50％～95％的乙醇-水提取2-4次，料液比为1g：4mL～1g：12mL，然后浓缩；步骤(2)中所述各次提取的提取次数分别为2-4次，所述粗提取物与各提取溶剂的用量比分别为1g：3mL～1g：15mL；步骤(3)中所述浸膏二的制备方法为将步骤(2)所得浸膏一经HPD-100、XDA-1或LSA-7大孔树脂处理，以体积分数为5％～90％的乙醇-水进行梯度洗脱，然后收集体积分数20％～60％的乙醇-水洗脱物，最后浓缩；步骤(4)中所述总多酚提取物的制备方法为将步骤(3)所得浸膏二经100-200目聚酰胺树脂处理，以体积分数为10％～90％的甲醇-水进行梯度洗脱，然后收集体积分数30％～60％的甲醇-水洗脱物，最后浓缩，得到所述总多酚提取物。本专利技术的提取方法通过多步骤的提取与除杂，从黑果荚蒾果实的复杂天然产物类型中，快速准确地提取多酚类物质。将大孔树脂柱色谱法及聚酰胺柱色谱法的优势相结合，能够有效地富集黑果荚蒾果实中的多酚类物质，且获得最大收率。制备方法简便，且易于连续操作以及工艺放大，所用试剂低毒、环保，具有用于工业化提取黑果荚蒾果实中多酚类物质的潜力。本专利技术最后公开了所述黑果荚蒾提取物在制备醛糖还原酶抑制剂药物中的应用。以该黑果荚蒾提取物制备的醛糖还原酶抑制剂药物可预防和/或缓解糖尿病并发症，包括糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变、糖尿病神经系统病变等。有益效果：与现有技术相比，本专利技术具有如下显著优点：(1)黑果荚蒾提取物中多酚物质含量高达50％～56％，IC50值为0.0232～0.0255mg/mL，达到微克级别；当黑果荚蒾提取物浓度在0.03mg/mL附近时，其对醛糖还原酶抑制率大于60％，当黑果荚蒾提取物浓度接近0.09mg/mL时，其对醛糖还原酶抑制率大于80％，不同规模批次提取物的抑制作用稳定，具有较强的醛糖还原酶抑制剂活性，可制备为预防和/或缓解糖尿病并发症的药物；(2)制备方法可以对多酚物质进行有效提取，提取物中总多酚含量高达50％～56％，工艺稳定、简便易行，易于连续操作以及工艺放大，所用试剂低毒、环保。附图说明图1为本专利技术的黑果荚蒾提取物采用Folin-Ciocalteu法测定总多酚含量的标准曲线；图2为本专利技术的黑果荚蒾提取物的醛糖还原酶抑制活性曲线。具体实施方式下面结合实施例和附图对本专利技术的技术方案作进一步说明。实验设备：旋转蒸发仪(上海申生科技有限公司，中国)，紫外分光光度计(Varian，美国)；实验材料：聚酰胺(100-200目，中国医药集团有限公司，中国)，HPD-100、XDA-1、LSA-7大孔吸附树脂(沧州宝恩化工有限公司和上海谱振生物科技有限公司，中国)；所用试剂和酶：D,L-甘油醛、NADPH等均购自国药集团化学试剂有限公司；醛糖还原酶来自大鼠晶状体。实施例11、黑果荚蒾粗提取物的制备取9月下旬的去核后的黑果荚蒾果实50g，用体积分数50％的乙醇-水热回流提取3次，每次2小时，料液比(g：mL)为1：8；合并提取液，减压蒸馏浓缩得粗提取物。2、黑果荚蒾浸膏一的制备用质量体积比(g：mL)为1：7的石油醚对步骤1中的粗提取物分别进行回流提取，总共3次，再用质量体积比(g：mL)为1：7的甲醇回流提取，共3次，甲醇提取液经减压浓缩后得到浸膏一。3、黑果荚蒾总多酚提取物的制备将步骤2中的浸膏一分别用水溶解后，经过大孔树脂HPD-100色谱柱，用20％-60％的乙醇-水依次进行梯度洗脱，收集30％至50％的乙醇-水混合溶液洗脱物，减压蒸馏去除溶剂后得浸膏二。将水溶解后的浸膏二经过100-200目聚酰胺色谱柱，依次用10％-90％的甲醇-水溶剂进行梯度洗脱，收集30％至60％甲醇-水溶液混合洗脱物，减压浓缩后得到黑果荚蒾的总多酚提取物。实施例21、黑果荚蒾粗提取物的制备取10月上旬的去核后的黑果荚蒾果实100g，用体积分数70％的乙醇-水热回流提取4次，每次2小时，料液比(g：mL)为1：4；合并提取液，减压蒸馏浓缩得粗提取物。2、黑果荚蒾浸膏一的制备用质量体积比(g：mL)为1：3的环己烷对步骤1中的粗提取物分别进行回流提取，总共4次，再本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种黑果荚蒾提取物，其特征在于，所述黑果荚蒾提取物中的多酚类物质含量不低于50％。/n

【技术特征摘要】
1.一种黑果荚蒾提取物，其特征在于，所述黑果荚蒾提取物中的多酚类物质含量不低于50％。


2.根据权利要求1所述的黑果荚蒾提取物，其特征在于，所述黑果荚蒾提取物的提取原材料为成熟期的黑果荚蒾果实。


3.一种权利要求1或2所述的黑果荚蒾提取物的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：
(1)粗提取物的制备；
(2)浸膏一的制备：将步骤(1)所得粗提取物先用石油醚、环己烷或正己烷提取，再用甲醇或乙醇提取，然后浓缩；
(3)浸膏二的制备：将步骤(2)所得浸膏一经树脂一处理，然后浓缩；
(4)总多酚提取物的制备：将步骤(3)所得浸膏二经树脂二处理，然后浓缩。


4.根据权利要求3所述的黑果荚蒾提取物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述粗提取物的制备方法为将黑果荚蒾果实去核后，以体积分数50％～95％的乙醇-水提取2-4次，料液比为1g：4mL～1g：12mL，然后浓缩。


5.根据权利要求3所述的黑果荚蒾提取物的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述各次提取的提取次数分别为2-4次，所述粗...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵建华，赵子阳，唐依媛，陈佳，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32