一种仿生类细胞结构传感器及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种仿生类细胞结构传感器及其制备方法和应用，属于生物传感器技术领域。其由脂质体，在其表面的蛋白受体，包封在其中的CRISPR‑Cas系统组成。制备方法为：向脂质体中加入表面活性剂，然后加入蛋白受体，再导入CRISPR‑Cas系统，振荡，去除活性剂，即得。本发明专利技术的仿生类细胞结构传感器用于检测壳核病毒，借助病毒与仿生类细胞之间的蛋白结合，使病毒与类细胞结构进行膜融合，从而将其中的核酸序列导入类细胞结构中，触发其中CRISPR‑Cas系统的切割，较传统方法展现出更高的检测灵敏性，避免了核酸提取带来的误差和生物安全隐患，在检测壳核病毒领域，具有潜在的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种仿生类细胞结构传感器及其制备方法和应用
本专利技术属于生物传感器
，具体涉及一种仿生类细胞结构传感器及其制备方法和应用。
技术介绍
2019-nCoV是一种极具感染性的病毒，自新型冠状病毒肺炎疫情爆发以来，短短数周内，确诊感染患者病例已达到惊人的两万多例。世界卫生组织将新型冠状病毒疫情列为“国际关注的突发公共卫生事件”，引起世界各国的重大关切。因此，实现新型冠状病毒感染的早期检测对于尽早确定感染人群，降低防疫风险和提高救治效果具有重要社会和经济价值。为提高检测效率，基于冠状病毒及其RNA核酸的特点，针对其特异性开放阅读框和N基因序列特点，国家卫生健康委员会和疾病预防控制中心(CDC)在第一时间公布了基于荧光定量PCR(RT-PCR)技术的检测序列和探针。多家企业均报道其开发出对冠状病毒核酸的快速识别与检测技术，多种病毒核酸检测试剂盒也已经应用于临床。然而，新型冠状病毒的遗传物质是单股正链RNA，其遗传信息丰富，相较于双链DNA稳定性差，在人体或脊椎动物体内大量复制时极易发生突变而快速进行自然选择，并进化出超强的适应力和耐受力，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种仿生类细胞结构传感器，其特征在于，由脂质体，在脂质体表面的壳核病毒融合蛋白受体，以及包封在脂质体中的CRISPR-Cas 13a系统组成；所述CRISPR-Cas 13a系统包括特异性引物，Cas蛋白和由SEQ ID NO:1所示的探针，探针的一端标记有荧光基团，另一端标记有猝灭基团。/n

【技术特征摘要】
1.一种仿生类细胞结构传感器，其特征在于，由脂质体，在脂质体表面的壳核病毒融合蛋白受体，以及包封在脂质体中的CRISPR-Cas13a系统组成；所述CRISPR-Cas13a系统包括特异性引物，Cas蛋白和由SEQIDNO:1所示的探针，探针的一端标记有荧光基团，另一端标记有猝灭基团。


2.根据权利要求1所述仿生类细胞结构传感器，其特征在于，所述特异性引物包括由SEQIDNO:2所示的S基因sgRNA和由SEQIDNO:3所示的Orf1ab基因sgRNA，所述探针的5`端标记有Cy-5，3’端标记有BHQ-2。


3.根据权利要求1所述仿生类细胞结构传感器，其特征在于，所述脂质体与所述壳核病毒融合蛋白受体的摩尔比为300：1-10。


4.如权利要求1至权利要求3任一所述仿生类细胞结构传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
向脂质体中加入表面活性剂，溶解后，加入壳核病毒融合蛋白受体，形成蛋白脂质体后，再导入CRISPR-Cas13a系统，振荡，去除表面活性剂，即得仿生类细胞结构传感器。


5.根据权利要求4所述仿生类细胞结构传感器的制备方法，其特征在于，所述壳核病毒融合蛋白受体的制备方法为：
以PET21a载体转化BL21(DE3)感受态，热击，冰上静置后，涂布含有氨苄青霉素的LB固体平板上；
挑取表达菌株BL21(DE3)的单...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗阳，赵贤贤，张亮亮，陈晓辉，
申请(专利权)人：重庆大学，
类型：发明
国别省市：重庆;50