一种钟器腐霉菌检测引物、LAMP检测体系、试剂盒及方法技术

本发明专利技术公开了一种钟器腐霉菌检测引物、LAMP检测体系、试剂盒及方法。检测引物包含：正向内引物FIP、反向内引物BIP、正向外引物F3、反向外引物B3和正向环引物环引物LF。比起传统的依据形态特征来鉴定钟器腐霉菌的检测技术，本发明专利技术的检测方法具备高准确性、灵敏度且操作方便，在实现了恒温扩增的同时，还为钟器腐霉的检测提供了新的技术平台。可用于生产实践中钟器腐霉的高灵敏度快速检测，可在病害侵染初期鉴定出病原物，并能够对田间土壤中的钟器腐霉菌进行检测。本发明专利技术为钟器腐霉菌的防治提供可靠的技术和理论依据。

【技术实现步骤摘要】
一种钟器腐霉菌检测引物、LAMP检测体系、试剂盒及方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种钟器腐霉菌检测引物、LAMP检测体系、试剂盒及方法。
技术介绍
钟器腐霉(Phytopythiumvexans)属于藻物界(Chromista)、卵菌门(Oomycota)、卵菌纲(Oomycetes)、霜霉目(Pythiales)、腐霉科(Pythiaceae)、疫腐霉属(Phytopythium)。钟器腐霉是一种土传性致病腐霉菌，宿主范围极其广泛，可侵染橡胶树、马铃薯、甘蔗和猕猴桃等多种经济作物及药用植物等，引发根部疾病，苗期腐烂等症状，并具世界性分布且已成为许多农作物苗期病害的重要致病菌之一。目前对该病害还没有有效的检测防治措施，所以建立钟器腐霉的快速分子检测对于其引起的疾病早期控制具有重要意义。目前，针对钟器腐霉的检测技术较少。传统的检测方法主要是平板分离法和诱饵法，并依据形态学特征对其进行鉴定。由于腐霉生长受温度影响形态不稳定且耗时长灵敏度低，给检测带来了巨大困难。随着分子生物学的发展，特别PCR技术的普及，越来越多的分子生物学技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种钟器腐霉菌检测引物，其特征在于，所述的引物包含正向内引物FIP、反向内引物BIP、正向外引物F3、反向外引物B3和反向环引物LF；/n引物序列具体如下:/nFIP:5'-GTGTAAACTAAAAATAGCTAACTTATCCACCATTATCAAGTGTAG-3'；/nBIP:5'-CGCAATTAATTTTATTGTTACTAGCATTCTATGCATACTTAATCCA-3'；/nF3:5'-ATCAGGTGCAGGTACTGG-3'；/nB3:5'-AGCTGTAATTAAAAGAGACCTATC-3'；/nLF:5’-TGAAGGTCCTGAGTGTGCAG-3’。/n

【技术特征摘要】
1.一种钟器腐霉菌检测引物，其特征在于，所述的引物包含正向内引物FIP、反向内引物BIP、正向外引物F3、反向外引物B3和反向环引物LF；
引物序列具体如下:
FIP:5'-GTGTAAACTAAAAATAGCTAACTTATCCACCATTATCAAGTGTAG-3'；
BIP:5'-CGCAATTAATTTTATTGTTACTAGCATTCTATGCATACTTAATCCA-3'；
F3:5'-ATCAGGTGCAGGTACTGG-3'；
B3:5'-AGCTGTAATTAAAAGAGACCTATC-3'；
LF:5’-TGAAGGTCCTGAGTGTGCAG-3’。


2.一种钟器腐霉菌LAMP检测体系，其特征在于，所述的检测体系包含权利要求1所述的钟器腐霉菌检测引物。


3.根据权利要求2所述的钟器腐霉菌LAMP检测体系，其特征在于，所述的钟器腐霉菌检测引物具体为：正向内引物FIP、反向内引物BIP、正向外引物F3、反向外引物B3和反向环引物LF的摩尔比为8:8:1:1:4。


4.根据权利要求2所述的钟器腐霉菌LAMP检测体系，其特征在于，所述的钟器腐霉菌检测引物具体为：1.6μm正向内引物FIP,1.6μm反向内引物BIP,0.2μm正向外引物F3,0.2μm反向外引物B3,0.8μm环引物LF。


5.根据权利要求2-4任一所述的钟器腐霉菌LAMP检测体系，其特征在于，所述的检测体系还包含：1.4mMdNTPs,1×LAMPBuffer,1×二甲酚橙，0.8M甜菜碱，8mMMgS04,8UBstDNApolymerase，1μLDNA模板，灭...

【专利技术属性】
技术研发人员：李明珠，高菡，张鑫，强毅，崔浪军，闫亚平，
申请(专利权)人：陕西师范大学，
类型：发明
国别省市：陕西;61