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AOX特异性抗体组合及其制备方法和用途技术

技术编号:26884802 阅读:41 留言:0更新日期:2020-12-29 15:40
本发明专利技术涉及植物细胞技术领域,具体公开了AOX特异性抗体组合及其制备方法和用途,所述AOX特异性抗体组合包含AOX1a、AOX1b/c、AOX1d和AOX2四个抗体。本发明专利技术获得的AOX特异性抗体组合灵敏度很高,四个AOX特异性抗体能够分别检测植物中蛋白序列高度相似的AOX蛋白。

【技术实现步骤摘要】
AOX特异性抗体组合及其制备方法和用途
本专利技术涉及植物细胞
,具体涉及AOX特异性抗体组合及其制备方法和用途。
技术介绍
光合作用是地球能量的主要来源,对光合作用的研究有助于提高农作物产量,也可能对能源短缺问题提供新的解决思路。植物光合作用涉及电子传递链,而AOX蛋白是交替氧化酶电子传递途径的末端氧化酶,参与抗氰呼吸,在植物抵抗逆境胁迫过程中发挥着非常重要的作用,因此成为研究的热点。植物的线粒体中有五个AOX蛋白:AOX1a,AOX1b,AOX1c,AOX1d和AOX2。它们具有同源性,蛋白相似度很高。目前的研究集中在AOX1a,其他四个报道很少,AOX1a是主要的,相对来说表达量较大,另外四个则很难检测,一般用的抗体都来自于UNIVERSITYOFNEBRASKA,LINCOHN,这是一个单克隆抗体,专一性很好,但这个抗体灵敏度很低,连AOX1a都难以检测。在检测AOX表达的蛋白质免疫印迹实验(WesternBlot)中,首先要先提取细胞的膜蛋白,再用1:50的稀释倍数的AOX抗体,才可以用WesternBlot来显本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.AOX特异性抗体组合,其特征在于,所述AOX特异性抗体组合包含AOX1a、AOX1b/c、AOX1d和AOX2四个抗体;/n所述抗体AOX1a的基因序列如SEQ ID NO.1所示,氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示;/n所述抗体AOX1b/c的基因序列如SEQ ID NO.2所示,氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示;/n所述抗体AOX1d的基因序列如SEQ ID NO.3所示,氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示;/n所述抗体AOX2的基因序列如SEQ ID NO.4所示,氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示。/n

【技术特征摘要】
1.AOX特异性抗体组合,其特征在于,所述AOX特异性抗体组合包含AOX1a、AOX1b/c、AOX1d和AOX2四个抗体;
所述抗体AOX1a的基因序列如SEQIDNO.1所示,氨基酸序列如SEQIDNO.5所示;
所述抗体AOX1b/c的基因序列如SEQIDNO.2所示,氨基酸序列如SEQIDNO.6所示;
所述抗体AOX1d的基因序列如SEQIDNO.3所示,氨基酸序列如SEQIDNO.7所示;
所述抗体AOX2的基因序列如SEQIDNO.4所示,氨基酸序列如SEQIDNO.8所示。


2.如权利要求1所述的AOX特异性抗体组合的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1,目的基因序列的合成,所述目的基因分别为SEQIDNO.1-SEQIDNO.4;
S2,将S1合成的目的基因SEQIDNO.1通过EcoRI和XhoI双酶切连接构建到大肠杆菌表达载体pGEX4T.3载体上,然后通过在大肠杆菌中诱导蛋白表达,获得AOX与GST的融合蛋白,标记为GST-A...

【专利技术属性】
技术研发人员:王丹凤付爱根王春宇
申请(专利权)人:西北大学
类型:发明
国别省市:陕西;61

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