基因疗法的方法技术

本发明专利技术提供了用于基因和/或细胞编辑的组合物和方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】基因疗法的方法本申请根据35U.S.C.§119(e)要求2018年4月30日提交的美国临时专利申请号62/664,930和2018年4月30日提交的美国临时专利申请号62/664,932的优先权。前述申请通过引用并入本文。本专利技术是在美国国立卫生研究院授予的R01DK048252-21政府支持下完成的。政府在本专利技术中具有一定的权利。以电子方式提交的文本文件说明书在此以电子方式提交的文本文件的内容通过引用整体并入本文：序列表的计算机可读格式副本(文件名：SEQLIST.txt；记录日期：2019年4月29日；档案大小：116KB)。
本专利技术涉及基因和/或细胞疗法领域。具体地，公开了通过选择成功修饰的细胞用于治疗性基因和/或细胞疗法的组合物和方法。
技术介绍
在整个说明书中引用了数个出版物和专利文件，以记载与本专利技术有关的现有技术。这些引用中的每一个都通过全文引用并入本文。影响表达细胞色素p450(CYP)蛋白的细胞的许多遗传性和获得性疾病都适合基因和/或细胞疗法。从概念上讲，通过基因编辑纠正致本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于在受试者中选择性放大和/或扩增细胞群的方法，所述方法包括以下步骤：/na)抑制细胞中的细胞色素p450(CYP)酶、细胞色素p450还原酶(POR)和/或β-连环蛋白(CTNNB1)；以及/nb)向具有通过步骤a)产生的细胞的受试者施用原毒素，/n其中所述原毒素在通过步骤a)产生的细胞中不转化为毒性代谢物，从而允许所述受试者内的所述细胞放大和/或扩增。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180430 US 62/664,932;20180430 US 62/664,9301.一种用于在受试者中选择性放大和/或扩增细胞群的方法，所述方法包括以下步骤：
a)抑制细胞中的细胞色素p450(CYP)酶、细胞色素p450还原酶(POR)和/或β-连环蛋白(CTNNB1)；以及
b)向具有通过步骤a)产生的细胞的受试者施用原毒素，
其中所述原毒素在通过步骤a)产生的细胞中不转化为毒性代谢物，从而允许所述受试者内的所述细胞放大和/或扩增。


2.根据权利要求1所述的方法，其进一步包括在步骤b)之前将转基因导入所述细胞。


3.根据权利要求1所述的方法，其中所述细胞是肝细胞。


4.根据权利要求1所述的方法，其中步骤a)在体外进行，并且在步骤b)之前将所述细胞施用于所述受试者。


5.根据权利要求1所述的方法，其中步骤a)在体内进行。


6.根据权利要求1所述的方法，其中步骤a)包括向所述细胞或受试者施用抑制性核酸分子或编码抑制性核酸分子的核酸分子，其中所述抑制性核酸分子对CYP酶、POR或CTNNB1具有特异性。


7.根据权利要求6所述的方法，其中所述抑制性核酸分子是shRNA。


8.根据权利要求6所述的方法，其中步骤a)包括向所述细胞或受试者施用载体，所述载体包含编码所述抑制性核酸分子的核酸分子以及转基因。


9.根据权利要求8所述的方法，其中所述载体是病毒载体。


10.根据权利要求9所述的方法，其中所述病毒载体是AAV载体。


11.根据权利要求8所述的方法，其中所述载体是整合载体。


12.根据权利要求11所述的方法，其中所述整合载体缺乏启动子。


13.根据权利要求1所述的方法，其中步骤a)包括通过基因编辑使CYP酶、POR和/或CTNNB1失活。


14.根据权利要求13所述的方法，其中步骤a)包括向所述细胞或受试者施用Cas9和对CYP酶、POR或CTNNB1基因具有特异性的指导RNA(gRNA)或编码所述gRNA的核酸分子，其中所述gRNA序列与...

【专利技术属性】
技术研发人员：马库斯·格罗佩，阿弥达·蒂亚波恩查，
申请(专利权)人：俄勒冈健康科学大学，
类型：发明
国别省市：美国;US