α-L-岩藻糖苷酶活性测定方法、α-L-岩藻糖苷酶诊断试剂及应用技术

本发明专利技术提供了一种α‑L‑岩藻糖苷酶活性测定方法、试剂及应用，涉及人体内酶含量的检测技术领域，具体方法包括：采用4‑氨基苯基β‑D‑吡喃半乳糖苷作为底物；加入α‑L‑岩藻糖苷酶，将4‑氨基苯基β‑D‑吡喃半乳糖苷水解生成对氨基酚；加入Cu

【技术实现步骤摘要】
α-L-岩藻糖苷酶活性测定方法、α-L-岩藻糖苷酶诊断试剂及应用
本专利技术涉及人体内酶含量的检测
，尤其是涉及α-L-岩藻糖苷酶活性测定方法及其应用。
技术介绍
α-L-岩藻糖苷酶(α-L-Fucosidase，AFu)是一种催化含岩藻糖基的糖蛋白、糖脂等生物活性大分子水解酶的溶酶体酸性水解酶，分类名为α-L-岩藻糖苷岩藻糖水解酶(EC3.2.1.51)。其广泛分布于人体组织细胞、血液和体液中。参与体内糖蛋白、糖脂和寡糖的代谢。由于肝癌患者α-L-岩藻糖苷酶明显升高，它被认为是原发性肝癌的一种新的肿瘤标记物。现有临床检验中主要是使用基于检测产物的紫外可见吸光度的CNPF底物法。其检测原理为：样品中的AFu催化MG-2-氯-对硝基苯酚-α-L-盐藻糖苷水解生成MG和2-氯-对硝基酚(CNP)，CNP形成的速率与AFu活性呈比例，在405nm处检测吸光度的变化率，即可计算出样品中AFu的活性。上述临床检测方法主要存在以下缺陷：使用紫外可见分光光度计作为检测器，其检测灵敏度一般，易受检测介质干扰；难以实验可视化分析，仅本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种α-L-岩藻糖苷酶活性测定方法，其特征在于，包括以下步骤：/n采用4-氨基苯基β-D-吡喃半乳糖苷作为底物；/n加入α-L-岩藻糖苷酶，将4-氨基苯基β-D-吡喃半乳糖苷水解生成对氨基酚；/n向溶液中加入Cu

【技术特征摘要】
1.一种α-L-岩藻糖苷酶活性测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
采用4-氨基苯基β-D-吡喃半乳糖苷作为底物；
加入α-L-岩藻糖苷酶，将4-氨基苯基β-D-吡喃半乳糖苷水解生成对氨基酚；
向溶液中加入Cu2+、Ag+或者Hg2+的中性溶液，反应一段时间；
然后加入发光QDs，反应一段时间；
利用分子荧光分光光度计检测反应后溶液的荧光信号，或者在365nm紫外灯照射下，裸眼读取溶液颜色变化。


2.根据权利要求1所述的α-L-岩藻糖苷酶活性测定方法，其特征在于，所述发光QDs为CdTeQDs或者CdSeQDs。


3.根据权利要求2所述的α-L-岩藻糖苷酶活性测定方法，其特征在于，所述CdTeQDs的制备方法包括以下步骤：
将CdCl2和柠檬酸三钠溶解在水中，向以上溶液中加入巯基丙酸；
调节以上溶液pH至碱性；
然后，将Na2TeO3和KBH4加入以上溶液中，回流，至溶液呈红色，在紫外灯下呈现出强烈的红色荧光；
最后，通过沉淀和离...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈飘飘，应斌武，辛兆丹，耿佳，周娟，
申请(专利权)人：四川大学华西医院，成都华西精准医学产业技术研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51