检测神经退行性变的测定制造技术

本发明专利技术提供了测量样本中单磷酸化或多磷酸化p217+tau蛋白的量的方法。还提供了检测或诊断tau蛋白病变的方法、确定tau蛋白病变的治疗的有效性的方法以及确定受试者是否适用于抗p217+tau抗体疗法的方法。还描述了在该方法中使用的抗体以及包含该抗体的试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】检测神经退行性变的测定
本专利技术涉及用于检测神经退行性变的组合物和方法。具体地，本专利技术涉及测量生物样本中的单磷酸化或多磷酸化p217+tau蛋白物质的量的方法及其用途，以及在这些方法中使用的抗体和试剂盒。
技术介绍
阿尔茨海默病(AD)是退行性脑障碍，其特征在于渐进性的记忆、认知、推理、判断和情感稳定性的丧失，该丧失逐渐导致极度精神衰退和最终的死亡。AD是老年人中进行性精神障碍(痴呆)的非常常见的病因，并且被认为是美国第四大最常见的医学死因。AD已在全世界的种族群体中观察到，并且代表目前和未来的主要公共健康问题。患有AD的个体的脑表现出称作老年(或淀粉样蛋白)斑块、淀粉样蛋白血管病(淀粉样蛋白在血管中沉积)和神经原纤维缠结的特征性病变。一般在患有AD的患者中对于记忆和认知功能重要的人脑几个区域中发现大量的这些病变，特别是淀粉样斑块和成对螺旋细丝的神经原纤维缠结。神经原纤维缠结主要由超磷酸化tau蛋白的聚集体构成。tau的主要生理功能为微管聚合和稳定。tau与微管的结合通过tau的微管结合区的正电荷与微管网架上的负电荷之间的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测量样本中的p217+tau肽的方法，包括：/n(i)使所述样本与针对p217+tau表位的捕获抗体接触以捕获所述样本中的所述p217+tau肽，以及/n(ii)使所捕获的p217+tau肽与针对包含tau蛋白的氨基酸残基119至126的表位的第一检测抗体和针对含有tau蛋白的氨基酸残基7至20的表位的第二检测抗体中的至少一者接触，从而分别测量p217+tau肽的量和长p217+tau肽的量中的至少一者，/n其中所述氨基酸的编号参照SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180305 US 62/6385241.一种测量样本中的p217+tau肽的方法，包括：
(i)使所述样本与针对p217+tau表位的捕获抗体接触以捕获所述样本中的所述p217+tau肽，以及
(ii)使所捕获的p217+tau肽与针对包含tau蛋白的氨基酸残基119至126的表位的第一检测抗体和针对含有tau蛋白的氨基酸残基7至20的表位的第二检测抗体中的至少一者接触，从而分别测量p217+tau肽的量和长p217+tau肽的量中的至少一者，
其中所述氨基酸的编号参照SEQIDNO:1中所示的氨基酸序列。


2.根据权利要求1所述的方法，包括使所捕获的p217+tau肽与所述第一检测抗体和所述第二检测抗体接触，从而分别测量所述p217+tau肽的量和所述长p217+tau肽的量，并且任选地确定所述长p217+tau肽的量与所述p217+tau肽的量的比率。


3.根据权利要求2所述的方法，还包括
(i)通过从所述p217+tau肽的量减去所述长p217+tau肽的量来确定短p217+tau肽的量，以及
(ii)任选地确定所述短p217+tau肽的量与所述p217+tau肽的量的比率或所述长p217+tau肽的量与所述短p217+tau肽的量的比率。


4.一种测量样本中的p217+tau肽的方法：
(i)使所述样本与针对p217+tau表位的捕获抗体接触以捕获所述样本中的p217+tau肽，并且使所述样本与针对tau蛋白的氨基酸150和250之间的表位的磷酸化非依赖性捕获抗体接触以捕获所述样本中的总tau肽，所述表位优选地为包含tau蛋白的氨基酸159至163的表位；
(ii)进行以下操作中的至少一者：
a.使所捕获的p217+tau肽与针对包含tau蛋白的氨基酸残基119至126的表位的第一检测抗体接触，从而测量p217+tau肽的量，使所捕获的总tau肽与所述第一检测抗体接触，从而测量总tau肽的量，并且确定所述p217+tau肽的量与所述总tau肽的量的比率；以及
b.使所捕获的p217+tau肽与针对包含tau蛋白的氨基酸残基7至20的表位的第二检测抗体接触，从而测量长p217+tau肽的量，并且使所捕获的总tau肽与所述第二检测抗体接触，从而测量总长tau肽的量，并且确定所述长p217+tau肽的量与所述总长tau肽的量的比率，
其中所述氨基酸的编号参照SEQIDNO:1中所示的氨基酸序列。


5.根据权利要求4所述的方法，还包括通过从所述p217+tau肽的量减去所述长p217+tau肽的量来确定短p217+tau肽的量，通过从所述总tau肽的量减去所述总长tau肽的量来确定总短tau肽的量，并且确定所述短p217+tau肽的量与所述总短tau肽的量的比率。


6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述样本是来自受试者的生物样本，所述生物样本选自来自所述受试者的血液、脑匀浆或脑脊髓液(CSF)。


7.根据权利要求6所述的方法，其中所述生物样本是血液。


8.根据权利要求6所述的方法，其中所述生物样本是CSF。


9.根据权利要求6所述的方法，其中所述生物样本已使用反相高效液相色谱(rpHPLC)进行分级。


10.根据权利要求6所述的方法，还包括：
a.确定所述受试者是否患有tau蛋白病变或是否有发展成tau蛋白病变的风险；
b.确定所述受试者是否适用于使用抗p217+tau抗体的治疗；
c.确定所述受试者中的tau蛋白病变的治疗的有效性；或者
d.监测受试者中的使用抗p217+tau抗体的治疗，
其中所述确定或监测包括将来自所述受试者的所述p217+tau肽的量、所述长p217+tau肽的量、所述短p217+tau肽的量以及它们的比率中的至少一者与对应基线值进行比较。


11.根据权利要求10所述的方法，包括监测受试者中的使用抗p217+tau抗体的治疗，所述方法包括：
(i)从所述受试者中获得生物样本；
(ii)将所述生物样本分离成含有不含所述抗p217+tau抗体的p217+tau肽的第一样本，以及含有结合至所述抗p217+tau抗体的p217+tau肽的第二样本；
(iii)优选地通过rpHPLC分离所述第二样本以获得含有不含抗p217+tau抗体的p217+tau肽的第三样本；
(iv)使所述第一样本和所述第三样本中的每一者与针对p217+tau表位的捕获抗体接触以捕获所述第一样本和所述第三样本中的每一者中的p217+tau肽，
(v)进行以下操作中的至少一者：(a)使所捕获的p217+tau肽与针对包含tau蛋白的氨基酸残基119至126的表位的第一检测抗体接触，从而测量所述第一样本和所述第三样本中的每一者中的p217+tau肽的量，以及(b)使所捕获的p217+tau肽与针对包含tau蛋白的氨基酸残基7至20的表位的第二检测抗体接触，从而测量所述第一样本和所述第三样本中的每一者中的长p217+tau肽的量，任选地(c)通过从所述第一样本和所述第三样本中的每一者中的所述p217+tau肽的量减去所述长p217+tau肽的量来确定短p217+tau肽的量；
(vi)基于所述第一样本和所述第三样本中的每一者中的所述p217+tau肽的量、所述长p217+tau肽的量、所述短p217+tau肽的量以及它们的比率中的至少一者来监测使用所述抗p217+tau抗体的所述治疗。


12.根据权利要求10所述的方法，包括监测受试者中的使用抗p217+tau抗体的治...

【专利技术属性】
技术研发人员：H·C·科尔布，G·特里亚纳巴尔泽，J·R·斯莱蒙，
申请(专利权)人：詹森药业有限公司，
类型：发明
国别省市：比利时;BE