源自基因敲除猪的血液产品及其用途制造技术

提供了一种源自基因敲除猪的血液产品，以及该血液产品的应用。该血液产品与人血清中免疫球蛋白结合降低，对克服超急性免疫排斥反应有作用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】源自基因敲除猪的血液产品及其用途
本申请属于基因工程
，具体涉及利用CRISPR/Cas9载体组合获得的源自基因敲除猪的血液产品及其用途。
技术介绍
现代医学不断进步，输血在临床上被大量使用，但同样面临越来越多的问题，包括艾滋病、乙肝、丙肝等高发的传染病导致严重的输血风险。血液需求不断增多而献血量相对减少，血源资源日渐紧张。可以用动物红细胞(RBCs)研发出人RBCs输血的替代品。猪红细胞(pRBCs)已广泛用于异种输血红细胞的研发，pRBCs和人RBCs具有大量的相似性。同时，饲养在无特定病原体和生物安全条件下，pRBCs不携带人类的病原微生物。pRBCs不表达MHC抗原，即猪白细胞抗原(SLA)，因此降低了免疫原性。pRBCs没有细胞核，也不可能携带猪内源性逆转录病毒。但是直接将野生型pRBCs用于临床输血还会导致很多问题。将野生型pRBCs输注到灵长类动物体中会产生一致的超急性排斥反应。例如，由于野生型pRBCs表达了人类具有天然溶血抗体的Gal和非Gal抗原，能够通过抗体-抗原结合和/或补体激活直接导致血细胞的裂解。因此目本文档来自技高网...

【技术保护点】
源自基因敲除猪的血液产品，所述基因敲除猪的GGTA1基因、CMAH基因和β4GalNT2基因被敲除，其中所述β4GalNT2基因中编码8号外显子中一个或多个氨基酸的一个或多个核苷酸缺失，从而使得所述β4GalNT2基因被敲除。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180507 CN 2018104260186源自基因敲除猪的血液产品，所述基因敲除猪的GGTA1基因、CMAH基因和β4GalNT2基因被敲除，其中所述β4GalNT2基因中编码8号外显子中一个或多个氨基酸的一个或多个核苷酸缺失，从而使得所述β4GalNT2基因被敲除。


根据权利要求1所述的血液产品，其中所述GGTA1基因中编码3号外显子中一个或多个氨基酸的一个或多个核苷酸缺失，从而使得所述GGTA1基因被敲除。


根据权利要求1-2中任一项所述的血液产品，其中所述CMAH基因中编码6号外显子中一个或多个氨基酸的一个或多个核苷酸缺失，从而使得所述CMAH基因被敲除。


根据权利要求1-3中任一项所述的血液产品，其中所述基因敲除猪通过使用CRISPR/Cas9载体组合制备。


根据权利要求4所述的血液产品，其中所述GGTA1基因的3号外显子、所述CMAH基因的6号外显子以及所述β4GalNT2基因的8号外显子作为CRISPR/Cas9所靶向的部分。


根据权利要求4-5中任一项所述的血液产品，其中所述CRISPR/Cas9载体组合包括GGTA1-CRISPR/Cas9载体、CMAH-CRISPR/Cas9载体和β4GalNT2-CRISPR/Cas9载体，所述GGTA1-CRISPR/Cas9载体含有SEQIDNo：1所示的特异性靶向GGTA1基因的SgRNA核苷酸序列，所述CMAH-CRISPR/Cas9载体含有SEQIDNo：2所示的特异性靶向CMAH基因的SgRNA核苷酸序列，且所述β4GalNT2-CRISPR/Cas9载体含有SEQIDNo：3所示的特异性靶向β4GalNT2基因的SgRNA核苷酸序列。


根据权利要求6所述的血液产品，其中所述GGTA1-CRISPR/Cas9载体包含SEQIDNo：4所示的核苷酸序列，所述CMAH-CRISPR/Cas9载体包含SEQIDNo：5所示的核苷酸序列，且所述β4GalNT2-CRISPR/Cas9载体包含SEQIDNo：6所示的核苷酸序列。

【专利技术属性】
技术研发人员：戴一凡，杨海元，王盈，
申请(专利权)人：创观苏州生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32