一种生化反应试管及基因扩增试剂盒制造技术

技术编号:26750825 阅读:18 留言:0更新日期:2020-12-18 20:54
本实用新型专利技术公开了一种生化反应试管,包括管体及盖体,管体上设有固定受托部;管体包括两腔体,在盖体扣紧管体密闭后,两腔体的顶部能相互连通;第一腔体的底部相比第二腔体的底部至少凸出3mm,当管体底部被插入生化反应仪器内时,能从第一腔体的底面或邻近底面的侧面对腔体内溶液的生化反应结果进行光学信号采集检测。本实用新型专利技术还公开了一种基因扩增试剂盒本实用新型专利技术的生化反应试管可以解决核酸扩增产物的污染问题。

【技术实现步骤摘要】
一种生化反应试管及基因扩增试剂盒
本技术属于生物工程领域,具体地说,是关于一种生化反应试管及其基因扩增试剂盒。
技术介绍
在常规的小型生化反应中,一般是单个的试管内设置一个腔体并放置一种溶液,当需要多个溶液参与反应时,将不同试管的溶液吸取后加入其它反应试管。当存在一些特殊原因如试剂污染时,可在试管内设置一个挡板将试管分隔为两部分,分别将A/B两个溶液放置在同一个试管的不同腔体内,在不开盖的情况下将A/B溶液进行混合反应,避免了试剂外泄污染。核酸扩增如PCR反应的最大特点是具有较大的扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,当实验室样本和扩增目标经常出现大量相同的情况时,核酸气溶胶污染在实验区域内不断累积,污染风险不断增加,假阳性的发生频率也会越来越高。PCR技术的高扩增效率产生的核酸气溶胶污染,会导致检测结果的假阳性。假阳性意味着实验不可信,并且直接造成实验室经济损失。更严重的是,如果形成气溶胶污染,则可引起整个PCR实验室的污染,甚至要关闭实验室。PCR扩增产物污染是最主要最常见的污染。极微量的PCR产物污染就可造成假阳性。最可能造成PCR产物污染的形式是气溶胶污染。气溶胶是悬浮于气体介质中粒径一般为0.001μm~1000μm的固体、液体微小粒子形成的胶溶状态散体系。核酸气溶胶即DNA/RNA气溶胶,是分散并悬浮在气体介质中的核酸聚合物,广泛存在于实验室桌面、仪器、耗材以及空气中,据计算一个气溶胶颗粒可含48000拷贝。核酸气溶胶与PCR过程相伴相生,操作时空气与液体面摩擦,离心机离心,剧烈地摇动反应管,反应管开盖,吸样时及移液器的反复吸样,污染物的外泄等途径,都会产生核酸气溶胶。除了PCR扩增方法外,目前核酸恒温扩增方法也逐步进入实验室。目前主要包括以下几种:环介导恒温扩增(loop-mediatedisothermalamplification,LAMP)、切口酶核酸恒温扩增(nickingenzymemediatedamplification,NEMA)、链替代扩增(stranddisplacementamplification,SDA)、滚环扩增(rollingcircleamplification,RCA)、依赖解旋酶的恒温基因扩增(helicase-dependentisothermalDNAamplification,HAD)、转录依赖的扩增系统(transcription-basedamplificationsystem,TAS)、依赖核酸序列的扩增(NASBA)又称自主序列复制系统(self-sustainedsequencereplication,3SR)、QB复制酶扩增(Q-betareplicase-amplifiedassay)等。恒温扩增摆脱了热循环的限制,使其应用范围大大增加,而且目前应用的恒温扩增方法都有较高的敏感性和特异性,在核酸检测中应用范围非常广。但敏感性高会带来扩增物污染和假阳性的问题,从而导致反应结果判读不准确。将核酸反应产物与样品来源的核酸进行差异化,从核酸反应试剂组分中来解决污染问题是很多试剂厂家在努力的方向,其中UNG酶的预防作用日益受到重视和肯定。在PCR产物或引物中用dU代替dT。这种dU化的PCR产物与UNG一起孵育,因UDG可裂解尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架间的N-糖基键,可除去dU而阻止Taq-DNA聚合酶的延伸,从而失去被再扩增的能力。UNG对不含dU的模板无任何影响。UNG可从单或双链DNA中消除尿嘧啶,而对RNA中的尿嘧啶和单一尿嘧啶分子则无任何作用。在扩增反应中用dUTP代替dTTP,使产物中掺入大量dU。在再次进行PCR扩增前,用UNG处理PCR混合液即可消除PCR产物的残留污染。由于UNG在PCR循环中的变性一步便可被灭活,因此不会影响含dU的新的PCR产物。但是由于酶的反应效率有限而消化反应时间往往只有5分钟,这种方式一般只能用UNG处理PCR混合液中的轻度PCR产物污染,不能彻底解决问题。合成引物时以dU代dT,这样PCR产物中仅5ˊ端带dU。UNG处理后,引物失去了结合位点而不能扩增。对长片段(1-2kb以上)的扩增用dUTP法效率较用dTTP低,而用dU法就可克服这一缺点。dU引物最好将dU设计在3ˊ端或近ˊ端。该法仅能用于引物以外试剂处理。目前的UNG酶污染方法只是关注了在核酸扩增反应前对扩增产物的酶解处理,没有考虑过在核酸扩增反应后直接将扩增产物进行酶解处理。
技术实现思路
为了解决上述问题,本技术的第一个目的是提供一种生化反应试管。本技术的第二个目的是提供一种基因扩增试剂盒。本技术的第三个目的是提供一种所述生化反应试管的使用方法。为实现上述目的,本技术采用如下技术方案:作为本技术的第一个方面,一种生化反应试管,包括管体及盖体,管体包括设于管体上的固定受托部,该固定受托部与生化反应仪器相匹配,所述固定受托部属于对称的圆柱体,可任意角度插入生化反应仪器中固定;所述管体包括第一腔体和第二腔体,在盖体扣紧管体密闭后,第一腔体与第二腔体的顶部能相互连通,第一腔体底部相比第二腔体底部至少凸出3mm,当固定受托部能被插入生化反应仪器内时,能从第一腔体的底面或邻近底面的侧面对腔体内溶液的生化反应结果进行光学信号采集检测;或者,所述固定受托部属于非对称的柱体,只能单一角度插入生化反应仪器中固定;所述管体包括第一腔体和第二腔体,在盖体扣紧管体密闭后,第一腔体与第二腔体的顶部能相互连通,当固定受托部能被插入生化反应仪器内时,第一腔体内的生化反应溶液能被从单一方向的生化反应仪器中的传感器采集光学信号检测反应结果。根据本技术,所述生化反应试管的第一腔体的底部溶液在固定受托部被生化反应仪器进行接触式传导加热,而第二腔体的底部溶液不被传导加热。根据本技术,所述生化反应试管的第二腔体底部溶液被接触式传导加热,而第一腔体的底部溶液不接触热源。根据本技术,所述生化反应试管靠近开口的管体柱状内壁的圆周面上设有上下两个凹槽;所述盖体的外周设有高低两个凸起密封环;当盖体被插入管体闭合时,所述盖体的高位置凸起密封环与管体内上下两个凹槽都能配合密封,例如,高位置凸起密封环与上凹槽配合;或者,高位置凸起密封环与下凹槽配合密封,低位置凸起密封环与上凹槽配合密封。当高位置凸起密封环与上凹槽配合时,所述盖体较容易重复开启;当高位置凸起密封环与下凹槽配合密封,低位置凸起密封环与上凹槽配合密封后,上下两个凹槽对两个凸起密封环有较大阻力,不容易被再次揭开盖体。根据本技术,生化反应试管的盖体与管体闭合后,除连接铰合条外,盖体顶面的外边缘没有超出管体顶部边缘的任何部分。根据本技术,生化反应试管的盖体与管体闭合后,在连接铰合条的对面,盖体顶面的外边缘伸出管体顶部边缘一定长度的凸起作为操作人员揭开盖体的辅助部件;当生化反应试管的材质为塑料时,该盖体的凸起的厚度不超过0.4mm,当盖体被插入管体密封闭合时,高位置凸起密封环与下凹槽配合密封,低位置凸起密本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.一种生化反应试管,包括管体及盖体,其特征在于,管体包括设于管体上的固定受托部,所述固定受托部属于对称的圆柱体,可任意角度插入生化反应仪器中固定;所述管体包括第一腔体和第二腔体,在盖体扣紧管体密闭后,第一腔体与第二腔体的顶部能相互连通,其中,第一腔体底部相比第二腔体底部至少凸出3mm,当固定受托部能被插入生化反应仪器内时,只能从第一腔体的底面或邻近底面的侧面对腔体内溶液的生化反应结果进行光学信号采集检测;或者,/n所述固定受托部属于非对称的柱体,只能单一角度插入生化反应仪器中固定;所述管体包括第一腔体和第二腔体,在盖体扣紧密闭后,第一腔体与第二腔体的顶部能相互连通,当固定受托部能被插入生化反应仪器内时,第一腔体内的生化反应溶液能被从单一方向的生化反应仪器中的传感器采集光学信号检测反应结果。/n

【技术特征摘要】
20190225 CN 201920239379X1.一种生化反应试管,包括管体及盖体,其特征在于,管体包括设于管体上的固定受托部,所述固定受托部属于对称的圆柱体,可任意角度插入生化反应仪器中固定;所述管体包括第一腔体和第二腔体,在盖体扣紧管体密闭后,第一腔体与第二腔体的顶部能相互连通,其中,第一腔体底部相比第二腔体底部至少凸出3mm,当固定受托部能被插入生化反应仪器内时,只能从第一腔体的底面或邻近底面的侧面对腔体内溶液的生化反应结果进行光学信号采集检测;或者,
所述固定受托部属于非对称的柱体,只能单一角度插入生化反应仪器中固定;所述管体包括第一腔体和第二腔体,在盖体扣紧密闭后,第一腔体与第二腔体的顶部能相互连通,当固定受托部能被插入生化反应仪器内时,第一腔体内的生化反应溶液能被从单一方向的生化反应仪器中的传感器采集光学信号检测反应结果。


2.如权利要求1所述的生化反应试管,其特征在于,该生化反应试管的第一腔体或第二腔体底部溶液在固定受托部被生化反应仪器进行接触式传导加热,而第二腔体或第一腔体的底部溶液不接触热源。


3.如权利要求1所述的生化反应试管,其特征在于,所述生化反应试管靠近开口的管体柱状内壁的圆周面上设有上下两个凹槽;所述盖体的外周设有高低两个凸起密封环;当盖体被插入管体闭合时,高位置凸起密封环与上凹槽配合;或者,当盖体被插入管体闭合时,高位置凸起密封环与下凹槽配合密封,低位置凸起密封环与上凹槽配合密封。


4.如权利要求3所述的生化反应试管,其特征在于,生化反应试管的盖体与管体闭合后,除连接铰合条外,盖体顶面的外边缘没有超出管体顶部边缘的任何部分。


5.如权利要求3所述的生化反应试管,其特征在于,生化反应试管的盖体与管体闭合后,在连接铰合条的对面,盖体顶面的外边缘伸出管体顶部边缘一定长度的凸起作为操作人员揭开盖体的辅助部件;当生化反应试管的材质为塑料时,该盖体的凸起的厚度不超过0.4mm,当盖体被插入管体闭合时,高位置凸起密封环与下凹槽配合密封,低位置凸起密封环与上凹槽配合密封。


6.如权利要求1所述的生化反应试管,其特征在于,第一腔体的凸出底部主体是一个长筒或柱形结构,第二腔体设置在第一腔体外侧的环形腔体内,第二腔体的溶液处在管体内壁与第一腔体外壁间的夹套内;
第一腔体的底部设置了与标准PCR管底部一致的锥形体结构,能匹配标准的PCR仪器加热座内孔。


7.如权利要求1所述的生化反应试管,其特征在于,所述盖体的内底面上设置了一个空心柱体;该空心柱体至少与盖体的外顶面接通作为上部开口,盖子顶面上设置了带不干胶的封口膜将上部开口封闭;和/或,
该空心柱体朝向管内的底面被接通作为下部开口;空心柱体的底面上被容易被戳破的封口膜将下部开口封闭,封口膜材质为带封口粘贴材质...

【专利技术属性】
技术研发人员:许向华何小明周中人张磊
申请(专利权)人:上海快灵生物科技有限公司上海快灵生物工程有限公司
类型:新型
国别省市:上海;31

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