本发明专利技术公开了在五倍子制备预防或治疗猪繁殖和呼吸障碍综合征的药物中的用途；本发明专利技术利用计算机辅助药物设计方法预测猪繁殖与呼吸综合征病毒入胞关键蛋白CD163中第SRCR5结构域与PRRSV结合的潜在活性位点，通过计算机虚拟筛选得到与CD163 SRCR5结构域结合位点具有高度亲和力的中药单体茶黄素并获得富含相应中药单体的五倍子粗提取物，进一步利用CCK8试剂盒检测五倍子粗提取物对PAMs细胞的毒性，并在最大无毒剂量浓度下进行体外抗PRRSV试验，结果发现五倍子粗提取物具有确定的抗猪繁殖与呼吸综合征病毒效果，由此，本发明专利技术确定五倍子或其提取物具有预防或治疗猪繁殖与呼吸障碍综合征的新药理用途。
【技术实现步骤摘要】
五倍子在制备预防或治疗猪繁殖和呼吸障碍综合征的药物中的用途
本专利技术涉及五倍子的新药理用途，尤其涉及五倍子在制备预防或治疗猪繁殖和呼吸障碍综合征的药物中的新用途，属于五倍子的新药理用途领域。
技术介绍
猪繁殖与呼吸障碍综合征(PorcinereproductiveandrespiratorysyndromePRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PorcinereproductiveandrespiratorysyndromevirusPRRSV)引起的，是世界范围内现代猪生产中最经济有害的疾病之一(YangC,LanR,WangXC,etal.Integrinbeta3,aRACK1interactingprotein,iscriticalforporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirusinfectionandNF-kappaBactivationinMarc-145cells[J].VirusResearch,2020,282:12.)。它一种以妊娠母猪出现早产，流产，死胎，木乃伊胎，仔猪出现呼吸困难为主要症状的传染病。由于在发病过程中病猪会出现两耳发绀，所以该病又被称为蓝耳病。蓝耳病于20世纪80年代美洲，90年代在欧洲大爆发，给全球养猪业造成巨大损失。猪繁殖与呼吸综合征病毒病毒具有持续感染、隐性感染、病毒基因的突变率高、免疫抑制、以及抗体反应不能够抵抗病毒的再次感染等特点[2]。其主要的临床症状为发病猪精神抑郁、不进食，繁殖母猪生殖障碍，包括流产、死胎、木乃伊胎和仔猪严重的呼吸道症状。PRRSV是一种单链正性RNA包膜病毒，属于动脉炎病毒科，动脉炎病毒属，与马动脉炎病毒、小鼠乳酸脱氢酶病毒和猿类出血热病毒同属小动脉病毒科。其分为欧洲型或称1型Lelystadvirus和北美型或称2型(VR-2332)(安同庆.猪繁殖与呼吸综合征病毒与宿主细胞受体之间相互作用的研究及病毒遗传变异分析[D].City:中国农业科学院,2007.)。PRRSV的感染过程包括以下几个关键步骤：病毒的吸附、内化和基因组RNA的脱衣壳释放，非结构蛋白的翻译，基因组RNA的复制，mRNA的合成、转录和翻译以及病毒粒子的组装和释放。PRRSV受体存在于PAM细胞上的有硫酸乙酰肝素(Heparinsulfate，HS)、唾液酸粘附素(Sialoadhesin，Sn)、CD163等(李红.CD163及其它蛋白在PRRSV感染细胞过程中的相互作用[D].City:山东农业大学,2011)。PAMs是PRRSV在猪体内感染的靶细胞，CD163在PAMs的细胞表面和早期核内体中表达。CD163中的第5个SRCR结构域(SRCR5)被证明对PRRSV感染至关重要，而N端开始的前4个SRCR结构域(SRCR1～SRCR4)和细胞质尾部不是必须的，其余的SRCR结构域(SRCR6～SRCR9)也可能导致PRRSV感染，并且已有报道替换CD163SRCR6结构域会导致病毒感染效率降低(VanGorpH,VanBreedamW,VanDoorsselaereJ,etal.IdentificationoftheCD163ProteinDomainsInvolvedinInfectionofthePorcineReproductiveandRespiratorySyndromeVirus[J].84(6):3101-3105)。目前，已经成功解析的CD163SRCR5晶体结构，有研究表明位于SRCR5长环区561位的精氨酸残基(Arg561)对PRRSV感染是极其重要的，Arg561可能在病毒入侵时影响CD163与PRRSV的结合(MaH,JiangL,QiaoS,etal.Thecrystalstructureofthefifthscavengerreceptorcysteine-richdomainofporcineCD163revealsanimportantresidueinvolvedinporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirusinfection[J].2017,91(3):e01897-01816.)，这扩展了对PRRSV入侵机制的认识，并为预防和控制该病毒提供了分子基础。计算机辅助药物设计(computeraideddrugdesign，CADD)是以计算机化学为基础，通过计算机的模拟计算药物与受体生物大分子之间的关系，设计和优化先导化合物的方法，其中包括活性位点分析、数据库虚拟筛选、全新药物设计等。计算机辅助药物设计已成为当今研发新药一个有效的手段，被越来越多的学者所重视。值得注意的是，CADD在中药活性成分筛选、靶标发现、毒性预测、处方作用机制研究等方面也表现出独特优势。对中药小分子数据库虚拟筛选具有高效、快速和经济等优势，不仅可以减少药物筛选的盲目性，减少研究开发时间，还可大大节约研究费用。中药提取物中含有对PRRSV生命周期不同阶段具有显著作用的分子，其作用机制各不相同。有的阻止PRRSV附着进入细胞，有的抑制病毒RNA或病毒颗粒的复制、组装和释放，也有的通过细胞因子调节作为免疫调节剂。根据不同的抗病毒策略，有些中药对PRRSV有较强的抗病毒活性。五倍子又名百虫仓、百药煎、棓子等，是中国传统中药材的一种。由漆树科植物(如盐肤木等)上的虫瘿(因五倍子蚜虫寄生而生)经炮制加工后而得。依照其外形的不同，五倍子分为“肚倍”和“角倍”。有研究表明五倍子主要有效成分为鞣质及没食子酸，具有很强的抗病毒，抗菌，抗癌和抗氧化活性等作用(杨逸.五倍子口服液的制备及其对小鼠分泌性腹泻的效果观察[D].City:四川农业大学,2018)。近年来，有文献报道五倍子具有抗HIV-1、TMV、乙型肝炎和HCV病毒的活性。迄今为止，未有五倍子具有抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒活性的报道。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供五倍子在制备预防或治疗猪繁殖和呼吸障碍综合征的药物中的新用途为解决上述技术问题，本专利技术所采用的技术方案包括：本专利技术利用计算机辅助药物设计(Computeraideddrugdesign,CADD)的方法预测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PorcinereproductiveandrespiratorysyndromevirusPRRSV)入胞关键蛋白CD163中第五个富含半胱氨酸清道夫受体(ScavengerreceptorcysteinerichSRCR)SRCR5结构域与PRRSV结合的潜在活性位点，通过计算机虚拟筛选得到与CD163SRCR5结构域结合位点具有高度亲和力的中药单体茶黄素(Digallate)并获得富含相应中药单体的五倍子中药粗提取物，利用CCK8试剂盒检测中药粗提取物对PAMs细胞的毒性，并在最大无毒剂量浓度下进行体外抗PRRSV试验，验证中药五倍子粗提取物的抗病毒效果；由此，本专利技术确定五倍子或五倍子提取物具有预防或治疗猪繁殖与呼吸障碍综合征的新用途。本专利技术中所述的五倍子提取物的主要活性本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.五倍子或五倍子提取物在制备预防或治疗猪繁殖与呼吸障碍综合征药物中的用途。/n
【技术特征摘要】
1.五倍子或五倍子提取物在制备预防或治疗猪繁殖与呼吸障碍综合征药物中的用途。
2.按照权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的五倍子提取物以茶黄素为主要活性成分。
3.按照权利要求1或2所述的用途，其特征在于，是以水为提取溶剂提取得到的提取物；或者时以有机溶剂为提取溶剂，采用回流法或超声方法提取得到的提取物。
4.按照按照权利要求3所述的用途，其特征在于，以为乙醇为提取溶剂，采用超声方法提取提取得到的提取物。
5.按照按照权利要求4所述的用途，其特征在于，以80％乙醇为提取溶剂，提取物料五倍子和提取溶剂的质量比例为1:10，在室温下采用超声提取方法提取得到五倍子提取物。
6.一种预防或治疗猪繁殖和呼吸障碍综合征的的药物组合物，其特征在于，包括预防或治疗上有效量的五倍子或五倍子提取物和药学上可接受的辅料或载体。
7.按照权利要求6所述的药物组合...
【专利技术属性】
技术研发人员：李艳华，于菲，张岳峰，韩笑，崔文强，刘艳艳，董春柳，张志云，白靖文，
申请(专利权)人：东北农业大学，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23
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