一种高价值用材树种香合欢组培快繁方法技术

本发明专利技术公开了一种高价值用材树种香合欢组培快繁方法，包括以下步骤：选出优良单株，进行伐桩或环割，萌芽后采集嫩枝作为外植体；对外植体进行清洗、杀菌、消毒后用灭过菌的吸水纸吸干水分；然后进行初代诱导，获取初始芽；对初始芽进行继代增殖培养，获取继代丛芽；对继代丛芽进行生根培养，获取组培生根苗；组培生根苗经炼苗后，移栽入消过毒的育苗容器，最后苗木出圃造林。本发明专利技术替换掉现有技术中采用种子繁殖的方式，解决了苗木遗传性状不稳定、苗木参差不齐、繁殖效率不高的问题。

【技术实现步骤摘要】
一种高价值用材树种香合欢组培快繁方法
本专利技术属于植物组织培养
，具体涉及一种高价值用材树种香合欢组培快繁方法。
技术介绍
香合欢(Albiziaodoratissima(L.f.)Benth)，又名牛角森、黑格，是豆科合欢属的高大落叶乔木，其主要分布于海南、四川、广东、广西、贵州、云南，多垂直分布于海拔800m以下的低山、丘陵的中下部，是广西的乡土树种。香合欢喜光，稍耐阴，较速生，心材比降香黄檀、格木成型更快。其幼龄时树皮浅灰色，具有皮孔，长大后变为黑褐色，呈鳞片状脱落。香合欢幼枝密被绒毛，长大后绒毛脱落。其叶为二回羽状复叶，叶柄基处有1枚腺体，小叶5～17对，基部偏斜，中脉明显。花为头状花序，黄色，且芳香，果为荚果，种子近圆形，暗褐有光泽，坚硬。香合欢树干通直，具有较高的观赏价值，且具有较好的抗逆性，可作为园林行道树使用。香合欢木材美观，纹理致密，材质坚硬而厚重，稳定性强，干燥后不易开裂、变形，心材耐腐及抗虫蛀能力强，是做上等家具、雕刻、建筑、造船等的绝佳材料。不仅如此，其树皮含鞣质12～15％，可作为栲胶原料。香合欢具有耐旱、耐高温、耐贫瘠、适应性强的特点，对改良土壤，改善生态环境具有良好的作用。香合欢的经济价值较高，又因其属于豆科植物，有与根瘤菌共生的特性，因而对改良土壤改善林建生态环境具有重要的作用。香合欢主要依靠种子繁殖，但由于其种子表皮坚硬致密，吸水能力差，阻碍种子的萌发。且种子具有特殊气味，容易引来昆虫啃食，导致种子繁殖效率不高。因此，对香合欢进行植物组织培养方面的研究，对合理开发利用香合欢具有重要的意义与价值。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种高价值用材树种香合欢组培快繁方法，能够提高初始芽诱导率、丛芽诱导率、生根率及缩短继代增殖周期，以替换掉现有技术中采用种子繁殖的方式，解决苗木遗传性状不稳定、苗木参差不齐、繁殖效率不高的问题。为了解决以上技术问题，本专利技术采用以下技术方案：一种高价值用材树种香合欢组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：A.优株选择：选择经审定的香合欢良种或天然群落中干形通直、生长茂盛、健康无病虫害的香合欢植株为优良单株；B.外植体选取及处理：对选出的优株进行伐桩或环割，萌芽后采集当年生、带有腋芽或顶芽、长度为3～6cm的嫩枝作为外植体，剪去大部分叶片，用清水冲洗干净，再用去磷洗衣粉浸泡5～15min，然后用软毛刷刷洗外植体，再用清水冲洗0.5～1.2h；在超净台上用浓度为75％的酒精浸泡10～20s，再用无菌水冲洗1～3次，将其放入浓度为0.1％的HgCl2溶液中浸泡15～20min，浸泡的过程中用玻璃棒不断搅拌，再用无菌水冲洗4～6次，用灭过菌的吸水纸吸干水分，备用；C.初代诱导：取吸干水分的外植体，在无菌条件下，将切口部分剪掉后，插入初代诱导培养基，暗培养5～10天，然后在温度为20～26℃、光照强度1500～2500Lx、光照时间10～12h/d下继续培养5～10天，获取初始芽；D.继代增殖培养：取芽高为1～5cm的初始芽，在超净台上接入继代增殖培养基，将芽体部分压入培养基中，芽与芽之间不接触，连续培养10-20天，获取继代丛芽；芽高不足1cm的初始芽及减掉初始芽之后的愈伤组织在无菌条件下接入初代诱导培养基继续诱导培养，待长到1cm以上时，再接入继代增殖培养基，进行继代增殖培养；E.生根培养：对继代丛芽进行筛选，选取生长健壮、芽高为2～5cm的单芽，在无菌条件下接种到生根培养基中，进行生根培养，培养15～20天，获取生长健壮的组培生根苗；F.炼苗移栽及苗木出圃：选取根数3条以上、根长达到1cm以、生长健壮的组培生根苗，移到室外育苗大棚进行炼苗3～7天，之后用清水洗掉根部培养基，移栽入育苗容器中，淋透水；待组培苗苗高达到30cm以上时，生长健壮、无病虫害的苗木可出圃造林。进一步，所述的步骤C中的初代诱导培养基由包括以下重量份的原料制备而成：改良MS3～5份、6-BA0.2～0.5份、白糖25～35份、琼脂3～5份。进一步，所述的步骤D中的继代增殖培养基由包括以下重量份的原料制备而成：改良MS3～5份、核黄素0.01～0.02份、抗坏血酸0.005～0.015份、2-iP1.5～3.0份、NAA0.4～0.8份、赤霉酸0.1～0.5份、水解蛋白0.1～0.5份、白糖25～35份、琼脂3～5份。进一步，所述的步骤E中的生根培养基由包括以下重量份的原料制备而成：改良MS1～3份、核黄素0.01～0.02份、IBA0.4～0.8份、GRR0.8～1.5份、GA30.1～0.5份、白糖25～35份、琼脂3～5份。进一步，所述的改良MS由包括以下重量份的原料制备而成：Na2SeO30.1-1份、Ce(NH4)2(NO3)60.5～1.5份、NH4NO31000～1500份、KNO31000～2000份、MgSO4·7H2O200～600份、CaCl2·2H2O400～500份、Ca(NO3)2·4H2O200～300份、KH2PO3150～200份、K2SO4100～200份、H3BO36～7份、MnSO4·4H2O20～25份、CuSO4·5H2O0.02～0.03份、ZnSO4·7H2O5～10份、CoCl2·6H2O0.02～0.03份、Na2MoO4·2H2O0.2～0.7份、KI0.5～1.0份、FeSO4·7H2O25～30份、EDTA-2Na30～40份、盐酸硫胺素0.05～0.15份、烟酸0.2～0.7份、甘氨酸1～3份、肌醇50～150份。进一步，所述的步骤C中的初代诱导培养基、步骤D中的继代增殖培养基、步骤E中的生根培养基的pH值均为5-6。进一步，控制继代增殖培养、生根培养的培养条件均为：温度为20～26℃，光照强度1500～2500Lx，光照时间10～12h/d。进一步，所述的步骤F中育苗基质由包括以下重量份的原料制备而成：黄心土20～70份、腐殖质土或火烧土1～5份、泥炭土30～50份、谷壳1～5份。进一步，所述的步骤F中的苗木移栽前一周，用代森锌或五氯硝基苯消毒，再装入育苗容器，1d后再用清水淋洒冲洗，正式移栽前一天淋透水；移栽后每天早晚各淋透水一次；一周后，用15-15-15水溶性复合肥喷淋，每10天喷淋1次，苗木生长后期施用磷、钾肥，出圃前20d停止施肥。进一步，所述的代森锌或五氯硝基苯的用量为每方基质用3～4g；所述的15-15-15水溶性复合肥的浓度为0.75～1.25％。本专利技术具有以下有益效果：1.本专利技术的组培快繁方法，打破常规，替换掉现有技术中采用种子繁殖的方式，解决了繁殖效率不高的问题，形成了高价值用材树种香合欢组培快繁育苗技术体系，能有效保持香合欢树种遗传性状的稳定性，对于推动香合欢产业的发展具有重要意义，适合推广应用。2.本专利技术对MS培养基进行改良，根据初代诱导培养、继代增殖培养、生根培养的特点，分别合理添加改良MS，制备初代诱导培养基、继本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高价值用材树种香合欢组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：/nA.优株选择：选择经审定的香合欢良种或天然群落中干形通直、生长茂盛、健康无病虫害的香合欢植株为优良单株；/nB.外植体选取及处理：对选出的优株进行伐桩或环割，萌芽后采集当年生带有腋芽或顶芽、长度为3～6cm的嫩枝作为外植体，剪去大部分叶片，用清水冲洗干净，再用去磷洗衣粉浸泡5～15min，然后用软毛刷刷洗外植体，再用清水冲洗0.5～1.2h；在超净台上用浓度为75％的酒精浸泡10～20s，再用无菌水冲洗1～3次，将其放入浓度为0.1％的HgCl

【技术特征摘要】
1.一种高价值用材树种香合欢组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：
A.优株选择：选择经审定的香合欢良种或天然群落中干形通直、生长茂盛、健康无病虫害的香合欢植株为优良单株；
B.外植体选取及处理：对选出的优株进行伐桩或环割，萌芽后采集当年生带有腋芽或顶芽、长度为3～6cm的嫩枝作为外植体，剪去大部分叶片，用清水冲洗干净，再用去磷洗衣粉浸泡5～15min，然后用软毛刷刷洗外植体，再用清水冲洗0.5～1.2h；在超净台上用浓度为75％的酒精浸泡10～20s，再用无菌水冲洗1～3次，将其放入浓度为0.1％的HgCl2溶液中浸泡15～20min，浸泡的过程中用玻璃棒不断搅拌，再用无菌水冲洗4～6次，用灭过菌的吸水纸吸干水分，备用；
C.初代诱导：取吸干水分的外植体，在无菌条件下，将切口部分剪掉后，插入初代诱导培养基，暗培养5～10天，然后在温度为20～26℃、光照强度1500～2500Lx、光照时间10～12h/d下继续培养5～10天，获取初始芽；
D.继代增殖培养：取芽高为1～5cm的初始芽，在超净台上接入继代增殖培养基，将芽体部分压入培养基中，芽与芽之间不接触，连续培养10-20天，获取继代丛芽；芽高不足1cm的初始芽及减掉初始芽之后的愈伤组织在无菌条件下接入初代诱导培养基继续诱导培养，待长到1cm以上时，再接入继代增殖培养基，进行继代增殖培养；
E.生根培养：对继代丛芽进行筛选，选取生长健壮、芽高为2～5cm的单芽，在无菌条件下接种到生根培养基中，进行生根培养，培养15～20天，获取生长健壮的组培生根苗；
F.炼苗移栽及苗木出圃：选取根数3条以上、根长达到1cm以上、生长健壮的组培生根苗，移到室外育苗大棚进行炼苗3～7天，之后用清水洗掉根部培养基，移栽入育苗容器中，淋透水；待组培苗苗高达到30cm以上时，生长健壮、无病虫害的苗木可出圃造林。


2.根据权利要求1所述的高价值用材树种香合欢组培快繁方法，其特征在于，所述的步骤C中的初代诱导培养基由包括以下重量份的原料制备而成：
改良MS3～5份、6-BA0.0002～0.0005份、白糖25～35份、琼脂3～5份。


3.根据权利要求1所述的高价值用材树种香合欢组培快繁方法，其特征在于，所述的步骤D中的继代增殖培养基由包括以下重量份的原料制备而成：
改良MS3～5份、核黄素0.01～0.02份、抗坏血酸0.005～0.015份、2-iP0.0015～0.003份、NAA0.0004～0.0008份、赤霉酸0.0001～0.0005份、水解蛋白0.1～0.5份、白糖25～35份、琼脂3～5份。


4.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：张烨，韦铄星，刘海龙，李松海，欧汉彪，韦海航，
申请(专利权)人：广西壮族自治区林业科学研究院，
类型：发明
国别省市：广西;45