具有经调节的聚糖谱的抗体制造技术

本发明专利技术涉及重组表达的迪诺舒单抗分子和调节迪诺舒单抗分子的聚糖谱的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有经调节的聚糖谱的抗体相关申请本申请根据35U.S.C.§119(e)要求2018年5月1日提交的美国临时申请号62/665,045的权益，将其通过引用以其全部内容并入本文。
本专利技术涉及重组表达的抗体和调节此类抗体的聚糖谱的方法。
技术介绍
糖蛋白的聚糖部分的结构和组成可影响治疗性蛋白质的安全性和功效，包括其免疫原性、溶解度和半衰期。哺乳动物细胞培养物中产生的蛋白质可含有不同水平的高甘露糖糖型，例如甘露糖5(Man-5)、甘露糖6(Man-6)、甘露糖7(Man-7)、甘露糖8(Man-8)和甘露糖9(Man-9)。具有高甘露糖含量的抗体已经引起人们的兴趣，因为具有Man-5聚糖和Man-7、8或9聚糖的抗体显示出治疗活性和清除率方面的差异。例如，用几夫碱(kifunensine)处理产生的高甘露糖抗体显示出更高的ADCC活性和对FCγRIIIA的更大亲和力(Zhou等人，(2008),BiotechnolBioeng[生物技术与生物工程]99(3):652-665)。类似地，Yu等人，据报道，Man-5和Man-8/9糖本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提高迪诺舒单抗分子上存在的高甘露糖水平的方法，其中所述迪诺舒单抗分子由哺乳动物宿主细胞重组表达，该方法包括：/n(a)在生长期期间在第一培养基中孵育所述哺乳动物宿主细胞直至细胞密度为至少1x10

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180501 US 62/6650451.一种提高迪诺舒单抗分子上存在的高甘露糖水平的方法，其中所述迪诺舒单抗分子由哺乳动物宿主细胞重组表达，该方法包括：
(a)在生长期期间在第一培养基中孵育所述哺乳动物宿主细胞直至细胞密度为至少1x106个活细胞/mL，其中所述第一培养基包含从1g/L至20g/L的葡萄糖；以及随后
(b)在生产期期间在第二培养基中孵育来自步骤(a)的宿主细胞以表达所述迪诺舒单抗分子，其中所述第二培养基包含从0g/L至10g/L的葡萄糖和从5g/L至20g/L的半乳糖；
其中从2％至14％的迪诺舒单抗分子在N-298位点包含高甘露糖聚糖。


2.如权利要求1所述的方法，其中在该生长期期间，通过推注供给或灌注将葡萄糖浓度维持在从4g/L至20g/L。


3.如权利要求2所述的方法，其中当在该生产期期间在该第二培养基中孵育这些宿主细胞时，通过推注供给或灌注将葡萄糖浓度维持在从0g/L至8g/L，并将半乳糖浓度维持在从7g/L至15g/L。


4.如权利要求1所述的方法，其中在该生产期期间，这些宿主细胞最初在该第一培养基中维持约3至约15天，以及随后通过灌注或推注供给转移至该第二培养基中。


5.如权利要求1所述的方法，其中在步骤(a)中，所述细胞密度为从5x106个活细胞/mL至12x106个活细胞/mL。


6.如权利要求1所述的方法，其中从约4％至约11％的迪诺舒单抗分子在N-298位点包含高甘露糖。


7.如权利要求1所述的方法，其中所述哺乳动物宿主细胞是CHO细胞。


8.如权利要求1所述的方法，其中所述哺乳动物宿主细胞是CS-9细胞。


9.如权利要求1所述的方法，其中所述第一培养基包含甲氨喋呤(MTX)。


10.如权利要求1所述的方法，该方法包括：
(a)在生长期期间在...

【专利技术属性】
技术研发人员：C·K·克洛维尔，J·吴，A·D·纳吉，N·A·基钦，A·J·吉勒斯皮，S·C·佩特罗文，M·C·布兰登斯泰因，
申请(专利权)人：美国安进公司，
类型：发明
国别省市：美国;US