【技术实现步骤摘要】
血浆中丙泊酚的快速固相萃取检测方法
本专利技术涉及一种血浆中丙泊酚浓度的快速固相萃取检测方法。
技术介绍
丙泊酚被广泛用于诱导和维持麻醉。丙泊酚因其在快速诱导和消除、效果持续时间短、麻醉后恢复温和、副作用少以及未发现致畸作用方面的卓越表现,而通常被认为是最适合短期镇静的静脉麻醉药。在先前的研究报道中,细胞色素P450酶的基因型、患者的体重指数(BMI)及年龄等与丙泊酚的药代动力学参数具有相关性的影响因素导致丙泊酚麻醉存在显著的个体间差异且频繁被报道。除医疗用途外,滥用丙泊酚引起的成瘾和死亡在世界范围内也非常广泛。使用过高剂量或过低剂量丙泊酚可分别引起丙泊酚输注综合征和术中知晓的发生,从而给患者带来生理和心理伤害。综上所述,血浆丙泊酚浓度的检测对于药物代谢动力学以及法医毒理学研究是非常重要的。气相色谱-质谱联用(GC-MS)和液相色谱-质谱联用(LC-MS)是一种特异性、灵敏度和准确度高的新技术,常被应用于丙泊酚血浆浓度的监测。血浆需经过样品前处理之后,才能用于液相色谱-质谱联用分析。固相萃取(solid-phasee ...
【技术保护点】
1.血浆中丙泊酚的快速固相萃取检测方法,其特征是包括以下步骤:/n1)、C18移液器吸头固相萃取:/nC18移液器吸头内含有C18硅胶填料,包括以下步骤:/n1.1)、先利用50%乙腈水溶液湿润并激活吸头内的C18硅胶填料,再利用1%甲酸水溶液平衡吸头内的C18硅胶填料,得预处理后的C18移液器吸头;/n1.2)、在1ml待测血浆中加入10μL 50μg/mL的丙泊酚-d
【技术特征摘要】
1.血浆中丙泊酚的快速固相萃取检测方法,其特征是包括以下步骤:
1)、C18移液器吸头固相萃取:
C18移液器吸头内含有C18硅胶填料,包括以下步骤:
1.1)、先利用50%乙腈水溶液湿润并激活吸头内的C18硅胶填料,再利用1%甲酸水溶液平衡吸头内的C18硅胶填料,得预处理后的C18移液器吸头;
1.2)、在1ml待测血浆中加入10μL50μg/mL的丙泊酚-d17内标溶液,调节pH至(4±0.2),得血浆样品;
1.3)、取100μL血浆样品,利用步骤1.1)所得的预处理后的C18移液器吸头对其进行反复吸入并排出的操作;
1.4)、先用0.1%甲酸水溶液对步骤1.3)结束后的吸头内的C18硅胶填料进行冲洗;
再以甲醇为洗脱溶剂,对吸头内的C18硅胶填料进行洗脱,得样品溶液;
1.5)、将样品溶液于(8±1)℃离心,离心所得的上清液进行后续的液相色谱-质谱分析;
2)、液相色谱-质谱分析;
3)、将步骤2)所得的丙泊酚峰面积与丙泊酚-d17峰面积的比值作为x,带入y=0.0588x+0.0053,y为待测血浆中丙泊酚的浓度,单位为μgmL-1。
2.根据权利要求1所述的血浆中丙泊酚的快速固相萃取检测方法,其特征是所述步骤2)中:
2.1)液相色谱分离:
上清液的进样量为5μL,在分析过程中,柱温保持在30℃;
洗脱溶剂由洗脱溶剂A和洗脱溶剂B组成,洗脱溶剂A为0.1%甲酸水溶液,洗脱溶剂B为乙腈,线性梯度洗脱的流速设置为0.4mLmin-1;
色谱分离条件如下:
0.0分钟~0.5分钟,20%A~5%A;
0.5分钟~2.0分钟,5%A;
2.0分钟~2.1分钟,5%A~20%A;
2.1分钟~4.0分钟,20%A;
2.2)、质谱分析:
大气压化学电离被用作分析丙泊酚和丙泊酚-d17的离子源;
设定参数如下:离子源温度为150℃,毛细管电压-4.5kV,去溶剂化温度500℃,去溶剂化气体流量800L/h,锥孔气体流量50L/h;三重四极杆质谱仪以选择反应监测SRM模式运行;m/z...
【专利技术属性】
技术研发人员:王海星,林函,
申请(专利权)人:温州医科大学附属第二医院,温州医科大学附属育英儿童医院,
类型:发明
国别省市:浙江;33
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