新生动物神经元新生日期的检测方法和5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷标记胚胎的方法技术

本申请提供了一种新生动物神经元新生日期的检测方法，包括：根据怀孕动物的体重配制含5‑乙炔基‑2’脱氧尿嘧啶核苷的溶液，其中溶液中5‑乙炔基‑2’脱氧尿嘧啶核苷的质量为10mg/kg体重‑25mg/kg体重；将溶液注射至怀孕动物体内，记录注射时怀孕动物的怀孕天数；饲养怀孕动物至分娩，得到新生动物；对新生动物进行处理，得到新生动物的脑切片；对脑切片进行染色，根据注射时间和染色的结果，获得新生动物的神经元新生日期。该方法操作简单，新生动物的存活率高，检测结果可信度高，对于研究动物的脑部以及神经元发育过程具有重要的意义。本申请还提供了5‑乙炔基‑2’脱氧尿嘧啶核苷标记胚胎的方法。

【技术实现步骤摘要】
新生动物神经元新生日期的检测方法和5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷标记胚胎的方法
本专利技术涉及生物
，具体涉及新生动物神经元新生日期的检测方法和5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷标记胚胎的方法。
技术介绍
脑是神经系统最高调控中心，脑发育异常往往会导致癫痫等神经系统或者全身性疾病。因此标记新生神经元，研究特定类型神经元的生成时间，以及脑区的发育情况，对研究脑部疾病有着至关重要的作用。目前可以采用放射自显影法和免疫组织化学法标记新生细胞，进而研究脑区神经元情况。由于放射自显影法存在放射性危害，越来越多的研究采用免疫组织化学法。在免疫组织化学法中最常用到5-溴-2’脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)进行标记，该过程耗时短、无放射性危险，但由于BrdU抗体穿透力不足，细胞需要酸性高温变性处理才可以暴露BrdU基团，会造成细胞结构的破坏，导致结果可信性降低。
技术实现思路
为解决上述问题，本申请提供了一种新生动物神经元新生日期的检测方法，通过采用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷标记怀孕的动物，新生动物的存活率高；通过对新生动本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种新生动物神经元新生日期的检测方法，其特征在于，包括：/n根据怀孕动物的体重配制含5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷的溶液，其中所述溶液中，所述5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷的质量为10mg/kg体重-25mg/kg体重；/n将所述溶液注射至所述怀孕动物体内，记录注射时所述怀孕动物的怀孕天数；/n饲养所述怀孕动物至分娩，得到新生动物；/n对所述新生动物进行处理，得到所述新生动物的脑切片；/n对所述脑切片进行染色，根据所述注射时间和所述染色的结果，获得所述新生动物的神经元新生日期。/n

【技术特征摘要】
1.一种新生动物神经元新生日期的检测方法，其特征在于，包括：
根据怀孕动物的体重配制含5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷的溶液，其中所述溶液中，所述5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷的质量为10mg/kg体重-25mg/kg体重；
将所述溶液注射至所述怀孕动物体内，记录注射时所述怀孕动物的怀孕天数；
饲养所述怀孕动物至分娩，得到新生动物；
对所述新生动物进行处理，得到所述新生动物的脑切片；
对所述脑切片进行染色，根据所述注射时间和所述染色的结果，获得所述新生动物的神经元新生日期。


2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，对所述脑切片进行染色，包括：
将所述脑切片置于点击化学反应液中孵育染色，其中，所述点击化学反应液中包括荧光标记物，所述荧光标记物的浓度为10μM-25μM。


3.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述点击化学反应液还包括铜盐、维生素C钠和三(3-羟丙基三唑甲基)胺，其中，所述铜盐的浓度为5mM-10mM，所述维生素C钠的浓度为30mM-60mM，所述三(3-羟丙基三唑甲基)胺的浓度为1mM-2mM。


4.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述荧光标记物包括花青2-叠氮化物、花青3-叠氮化物和花青5-叠氮化物中的至少一种。

【专利技术属性】
技术研发人员：方超，王虹，罗伯特·诺曼，
申请(专利权)人：深圳先进技术研究院，
类型：发明
国别省市：广东;44