CAR T细胞的使用方法技术

本公开涉及通过向患者施用包含CAR T细胞的组合物，并且向所述患者施用通过接头连接至靶向部分的小分子而治疗患有癌症的患者的方法，其中所述CAR T细胞包含CAR且所述CAR包含E2抗荧光素抗体片段。本公开还涉及用于在此类方法中使用的组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】CART细胞的使用方法相关申请的交叉引用根据35U.S.C.§119(e)，本申请要求2018年1月22日提交的美国临时申请序号62/620,414，2018年1月23日提交的美国临时申请序号62/620,706，2018年4月11日提交的美国临时申请序号62/656,233，2018年8月29日提交的美国临时申请序号62/724,171，2018年9月24日提交的美国临时申请序号62/735,627和2018年9月26日提交的美国临时申请序号62/736,727的优先权，上述所有申请均以其整体通过引用并入本文。
本公开涉及通过向患者施用包含CART细胞的组合物，并且向所述患者施用通过接头连接至靶向部分的小分子而治疗患有癌症的患者的方法，其中所述CART细胞包含CAR且该CAR包含E2抗荧光素抗体片段。本公开还涉及用于在此类方法中使用的组合物。
技术介绍
基于将淋巴细胞(例如，T细胞)过继转移至患者的免疫疗法是治疗癌症及其他疾病的有价值疗法。在开发基于淋巴细胞的过继转移的免疫疗法中，已取得许多重要进展。在许多不同类型的免疫治疗剂中，正在开发的最有前景的免疫治疗剂之一为表达嵌合抗原受体的T细胞(CART细胞)。嵌合抗原受体(CAR)为经基因工程改造的受体，其经设计以靶向特异性抗原(例如，肿瘤抗原)。此靶向可导致对肿瘤的细胞毒性，例如使得表达CAR的CART细胞可经由特异性肿瘤抗原靶向且杀死肿瘤。第一代CAR由以下构成：用于识别并结合至由肿瘤表达的抗原的识别区(例如，源自抗体的单链片段可变(scFv)区)、及活化信号结构域(例如，T细胞的CD3ζ链可充当CAR中的T细胞活化信号)。虽然CART细胞已显示体外的积极结果，但是其在临床试验中消除疾病(例如，癌症)方面取得的成功有限。一个问题在于不能在体内延长活化并扩增CART细胞群体。为解决此问题，已在第二代CAR中包含共刺激结构域(例如，CD137、CD28或CD134)以实现T细胞在体内的延长活化。共刺激结构域的添加增强含有CAR的T细胞的体内增殖及生存，并且初始临床数据已显示此类构建体是疾病(诸如癌症)治疗中的有前景治疗剂。虽然已于CART细胞疗法中作出改进，但是仍存在若干问题。首先，由于表达由CART细胞所靶向的抗原(例如，肿瘤相关抗原)的正常细胞，可发生“脱靶”毒性。其次，可发现不受调节的CART细胞活化，其中通过CART细胞快速及不受控消除疾病细胞(例如，癌细胞)诱导一系列被称作肿瘤溶解综合征或细胞因子释放综合征(CRS)的代谢紊乱，所述代谢紊乱对患者会是致命的。由于施用不可容易调节且不可控活化的CART细胞，可产生肿瘤溶解综合征及CRS。因此，虽然CART细胞显示作为疾病(诸如癌症)治疗中的工具的极大前景，但是需要提供降低的脱靶毒性及CART细胞活化的更精确控制的额外CART细胞疗法。
技术实现思路
专利技术人已发现降低脱靶毒性及更精确控制CART细胞活化的方法，所述方法提供CART细胞疗法中的重要进展。在本文中所述的各种实施方案中，使用通过接头连接至靶向部分的小分子配体作为癌症与表达CAR的CART细胞之间的桥，其中所述CAR包含E2抗荧光素抗体片段。所述桥将表达包含E2抗荧光素抗体片段的CAR的CART细胞指向癌症以改善癌症。在一个实施方案中，所述“小分子配体”可以是例如叶酸、DUPA、NK-1R配体、CAIX配体、γ谷氨酰基转肽酶、NKG2D配体或CCK2R配体，其各自为特异性结合癌细胞的小分子配体(即，这些配体的受体相较于正常组织在癌症上过表达)。在一个实施方案中，所述“小分子配体”连接至与CART细胞表达的CAR结合的“靶向部分”。在各个实施方案中，所述“靶向部分”可选自例如荧光素、异硫氰酸荧光素(FITC)、NHS-及/或荧光素。所述“靶向部分”结合至表达E2抗荧光素抗体片段的经基因工程改造的CAR的识别区。因此，CAR的识别区(例如，E2抗荧光素抗体片段的单链可变区(scFv)、Fab、Fv、Fc、(Fab')2片段等)被指向所述“靶向部分”。因此，通过接头连接至靶向部分的小分子配体充当癌症与表达E2抗荧光素抗体片段的CART细胞之间的桥，将所述CART细胞指向癌症以改善癌症。在一个实施方案中，提供一种治疗癌症的方法。该方法包括i)向患者施用化合物或其药学上可接受的盐，其中该化合物包含通过接头连接至靶向部分的小分子配体，ii)向该患者施用第一剂量的包含CART细胞的CART细胞组合物，其中所述CART细胞包含指向靶向部分的CAR且其中所述CAR包含E2抗荧光素抗体片段，及iii)向该患者施用第二剂量的包含CART细胞的CART细胞组合物，其中所述CART细胞包含指向靶向部分的CAR且其中所述CAR包含E2抗荧光素抗体片段。在另一个实施方案中，提供一种治疗癌症的方法。该方法包括i)向患者施用化合物或其药学上可接受的盐，其中该化合物包含通过接头连接至靶向部分的小分子配体，及ii)向该患者施用CART细胞组合物，其中该CART细胞组合物包含CART细胞，其中所述CART细胞包含指向靶向部分的CAR，其中该CAR包含E2抗荧光素抗体片段，且其中该CART细胞组合物包含所述CART细胞及非转化T细胞的混合物。在又另一个实施方案中，提供一种治疗癌症的方法。该方法包括i)对患者施用化合物或其药学上可接受的盐，其中该化合物包含通过接头连接至靶向部分的小分子配体，ii)向该患者施用CART细胞组合物，其中该CART细胞组合物包含CART细胞，其中所述CART细胞包含指向靶向部分的CAR且其中该CAR包含E2抗荧光素抗体片段，及iii)向该患者施用叶酸类化合物、包含叶酸类化合物的缀合物(其中该包含叶酸类化合物的缀合物不包括靶向部分)或抑制CART细胞的活化的药剂。在仍另一个实施方案中，提供一种治疗癌症的方法。该方法包括i)向患者施用化合物或其药学上可接受的盐，其中该化合物包含通过接头连接至靶向部分的小分子配体，其中向该患者施用至少第一剂量及第二剂量的该化合物或其药学上可接受的盐，其中该第一剂量与该第二剂量是不同的，其中该第二剂量的化合物或其药学上可接受的盐的量比该第一剂量的化合物或其药学上可接受的盐多约2倍至约15000倍，及ii)向该患者施用包含CART细胞的CART细胞组合物，其中所述CART细胞包含指向靶向部分的CAR且其中该CAR包含E2抗荧光素抗体片段。在另一个说明性实施方案中，提供一种治疗癌症的方法。该方法包括i)向患者施用第一剂量的化合物或其药学上可接受的盐，其中该化合物包含通过接头连接至靶向部分的小分子配体，ii)向该患者施用至少第二剂量的该化合物或其药学上可接受的盐，其中该第二剂量的化合物或其药学上可接受的盐的量比该第一剂量的化合物或其药学上可接受的盐的量低至少约50%；及iii)向该患者施用一个剂量的包含CART细胞的CART细胞组合物，其中所述CART细胞包含指向该靶向部分的CAR且其中该CAR包含E2抗荧光素抗体片段。在另一个实施方案中，提供一种治疗癌症的方本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种治疗癌症的方法，所述方法包括：/ni) 向患者施用化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物包括经由接头连接至靶向部分的小分子配体；/nii) 向所述患者施用第一剂量的包含CAR T细胞的CAR T细胞组合物，其中所述CAR T细胞包含指向所述靶向部分的CAR且其中所述CAR包含E2抗荧光素抗体片段；和/niii) 向所述患者施用第二剂量的包含CAR T细胞的CAR T细胞组合物，其中所述CAR T细胞包含指向所述靶向部分的CAR且其中所述CAR包含E2抗荧光素抗体片段。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180122 US 62/620414;20180123 US 62/620706;2018041.一种治疗癌症的方法，所述方法包括：
i)向患者施用化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物包括经由接头连接至靶向部分的小分子配体；
ii)向所述患者施用第一剂量的包含CART细胞的CART细胞组合物，其中所述CART细胞包含指向所述靶向部分的CAR且其中所述CAR包含E2抗荧光素抗体片段；和
iii)向所述患者施用第二剂量的包含CART细胞的CART细胞组合物，其中所述CART细胞包含指向所述靶向部分的CAR且其中所述CAR包含E2抗荧光素抗体片段。


2.如权利要求1的方法，其中所述化合物或其药学上可接受的盐不是抗体，且不包含抗体片段。


3.如权利要求1的方法，其中所述靶向部分不包含肽表位。


4.如权利要求1的方法，其中所述癌症为表达叶酸受体的癌症。


5.如权利要求1的方法，其中降低或预防CRS且所述方法导致所述患者的肿瘤体积减少。


6.如权利要求1的方法，其中所述CART细胞具有中枢记忆/效应记忆表型。


7.如权利要求1的方法，其中所述CART细胞的CD8:CD4比率为约1:1。


8.如权利要求1的方法，其中降低或预防因为CRS所致的体重损失。


9.如权利要求1的方法，其中所述癌症包括肿瘤且其中获得对所述肿瘤的完全反应。


10.一种治疗癌症的方法，所述方法包括：
i)向患者施用化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物包括经由接头连接至靶向部分的小分子配体；和
ii)向所述患者施用CART细胞组合物，其中所述CART细胞组合物包含CART细胞，其中所述CART细胞包含指向所述靶向部分的CAR，其中所述CAR包含E2抗荧光素抗体片段，且其中所述CART细胞组合物包含所述CART细胞和非转化T细胞的混合物。


11.如权利要求10的方法，其中所述CART细胞组合物包含选自以下比率的所述CART细胞和非转化T细胞的混合物：约1:5的所述CART细胞对非转化T细胞、约1:4的所述CART细胞对非转化T细胞、约1:3的所述CART细胞对非转化T细胞、约1:2的所述CART细胞对非转化T细胞、及约1:1的所述CART细胞对非转化T细胞。


12.如权利要求10的方法，其中所述CART细胞组合物包含所述CART细胞与非转化T细胞的混合物，其中所述CART细胞与非转化T细胞的比率为约1:1至约1:5。


13.如权利要求10的方法，其中在约10百万个所述CART细胞与约40百万个非转化T细胞的混合物中，施用CART细胞。


14.如权利要求10的方法，其中在以约15百万个所述CART细胞与约35百万个非转化T细胞的混合物中，施用CART细胞。


15.如权利要求10的方法，其中在以约20百万个所述CART细胞与约30百万个非转化T细胞的混合物中，施用CART细胞。


16.一种治疗癌症的方法，所述方法包括：
i)向患者施用化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物包括经由接头连接至靶向部分的小分子配体；
ii)向所述患者施用CART细胞组合物，其中所述CART细胞组合物包含CART细胞，其中所述CART细胞包含指向所述靶向部分的CAR且其中所述CAR包含E2抗荧光素抗体片段；和
iii)向所述患者施用叶酸类化合物；包含叶酸类化合物的缀合物，其中所述包含叶酸类化合物的缀合物不包括靶向部分；或抑制CART细胞的活化的药剂。


17.如权利要求16的方法，其中施用叶酸类化合物，并且所述叶酸类化合物是叶酸或甲酰四氢叶酸。


18.如权利要求16的方法，其中施用包含叶酸类化合物的缀合物，其中所述包含叶酸类化合物的缀合物不包括靶向部分。


19.如权利要求16的方法，其中施用抑制CART细胞的活化的药剂且所述药剂为阻断CART细胞结合至所述化合物或其药学上可接受的盐，但是不结合至所述癌症的药剂。


20.如权利要求16的方法，其中施用抑制CART细胞的活化的药剂。


21.如权利要求19的方法，其中所述药剂为荧光素胺、FITC或荧光素钠。


22.如权利要求16的方法，其中施用抑制CART细胞的活化的药剂且当CRS等级达到3或4时，施用所述抑制CART细胞的活化的药剂。


23.一种治疗癌症的方法，所述方法包括：
i)向患者施用化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物包含通过接头连接至靶向部分的小分子配体，且其中所述化合物或其药学上可接受的盐以约10nmol/kg患者体重至约2500nmol/kg患者体重的剂量施用，和
ii)向所述患者施用包含CART细胞的CART细胞组合物，其中所述CART细胞包含CAR，其中所述CAR包含E2抗荧光素抗体片段，且其中所述CART细胞的剂量为约1百万个CART细胞至约15百万个CART细胞。


24.如权利要求23的方法，其中所述化合物或其药学上可接受的盐以约10nmol/kg患者体重至约100nmol/kg患者体重的剂量施用。


25.如权利要求23的方法，其中所述化合物或其药学上可接受的盐以约10nmol/kg患者体重至约50nmol/kg患者体重的剂量施用。


26.如权利要求23的方法，其中所述化合物或其药学上可接受的盐以约10nmol/kg患者体重至约20nmol/kg患者体重的剂量施用。


27.如权利要求23的方法，其中所述化合物或其药学上可接受的盐以约10nmol/kg患者...

【专利技术属性】
技术研发人员：P·S·罗，H·朱，Y·J·卢，C·P·利蒙，L·W·惠勒二世，M·C·詹森，J·马特伊，
申请(专利权)人：恩多塞特公司，普渡研究基金会，西雅图儿童医院dba西雅图儿童研究所，
类型：发明
国别省市：美国;US