C反应蛋白化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种C反应蛋白化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法和应用，包括：M试剂、R试剂、发光底物液和校准品，其中M试剂为包被抗体M的磁珠试剂，R试剂为连接抗体R的酶标记试剂，抗体M和抗体R均可与C反应蛋白特异结合，所述抗体M和抗体R的亲和力常数的比值为1×10

【技术实现步骤摘要】
C反应蛋白化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法和应用
本专利技术属于免疫学检测体外诊断试剂
，具体涉及C反应蛋白化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法和应用。
技术介绍
C反应蛋白(Creactiveprotein，CRP)由肝细胞合成，在胎儿期产生，非母体胎盘传递。其产生机理是：当机体受感染或组织受损伤时巨噬细胞和其他白细胞等被激活，产生白细胞介素-6、白细胞介素-1、肿瘤坏死因子TNF-a等细胞因子及其他介导物，这些细胞因子和介导物到达肝脏，刺激肝细胞和上皮细胞合成CRP。在结构上，CRP含5个多肽链亚单位，非共价地结合为盘形多聚体，分子量为11.5万～14万，CRP是一种典型的急性时相蛋白。参考值通常被认为是临床上含量高于10mg/L。在健康人群血液中CRP水平低于5mg/L，而在各种条件下，急性炎症4～8小时内，CRP值达到约20至500mg/L。CRP对于炎症感染评估，CRP为10-50mg/L提示轻度炎症，CRP含量＞100mg/L，提示较为严重的细菌感染，病毒感染通常≤50mg/L，可排除病毒感染，提供炎症性疾病的诊断，治疗和监控本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种C反应蛋白化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，包括：M试剂、R试剂、发光底物液和校准品，其中所述M试剂为包被抗体M的磁珠试剂，R试剂为连接抗体R的酶标记试剂，抗体M和抗体R均可与C反应蛋白特异结合，所述抗体M和抗体R的亲和力常数的比值为1×10

【技术特征摘要】
1.一种C反应蛋白化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，包括：M试剂、R试剂、发光底物液和校准品，其中所述M试剂为包被抗体M的磁珠试剂，R试剂为连接抗体R的酶标记试剂，抗体M和抗体R均可与C反应蛋白特异结合，所述抗体M和抗体R的亲和力常数的比值为1×10-7～1×10-2或1×102～1×107。


2.根据权利要求1所述的一种C反应蛋白化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述抗体M的亲和力常数为1×10-7～1×10-5时，所述抗体R的亲和力常数为1×10-12～1×10-9。


3.根据权利要求1所述的一种C反应蛋白化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述抗体M的亲和力常数为1×10-12～1×10-9时，所述抗体R的亲和力常数为1×10-7～1×10-5。


4.如权利要求1所述的C反应蛋白化学发光免疫检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述方法包括：
S1、M试剂的制备：将磁珠清洗活化后，加入抗体M和偶联缓冲液进行偶联反应，然后加入封闭缓冲液封闭，再用M稀释液稀释即得所述M试剂；
S2、R试剂的制备：将抗体R和酶分别活化后，混合进行酶联反应，得到酶标抗体复合物，再用R稀释液稀释即得所述R试剂；
S3、发光底物液的制备：将发光底物用缓冲液溶解得到发光底物液；
S4、校准品的制备：将C反应蛋白抗原用校准品稀释液配置成多种浓度得到校准品；
S5、将上述包被抗体M的磁珠试剂、连接抗体R的酶标记试剂、发光底物液和校准品独立置于包装容器内，得到C反应蛋白化学发光免疫检测试剂盒。


5.根据权利要求4所述的C反应蛋白化学发光免疫检测试剂盒的制备方法，其特征在于，步骤S1具体为：(1)取粒径1～3μm，浓度10～100mg/mL的磁珠10～100μL，用1～3mL磁珠清洗液进行磁性分离洗涤后，用1～3mL磁珠活化剂于20～30℃活化20-30min；
(2)向磁珠中加入0.1～0.5mg抗体M和0.5～3mL偶联缓冲液，于20～30℃偶联2-3h；
(3)继续加入0.5～3mL封闭缓冲液，于20～30℃反应1-3h，去除上清液并洗涤，得到磁珠...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘鑫，来祥兵，张雪娇，舒芹，
申请(专利权)人：武汉生之源生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42