梨质子泵基因PbrVHA-c4及其在调控果肉柠檬酸含量中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一个梨质子泵基因PbrVHA‑c4及其在调控果肉柠檬酸含量中的应用，属于植物基因工程技术领域。所述的梨质子泵编码基因PbrVHA‑c4具有如序列表SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列；其编码的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:2所示。本发明专利技术从砀山酥梨中克隆得到一个新的VHA‑c4基因PbrVHA‑c4，利用农杆菌介导的遗传转化方法将该基因转化番茄，获得的转基因番茄果实中柠檬酸的含量明显增加，经生物学功能验证，表明本发明专利技术克隆的PbrVHA‑c4基因具有调控果实果肉柠檬酸含量的功能。本发明专利技术所述的梨质子泵编码基因PbrVHA‑c4可在果实酸度性状改良或构建高酸转基因果实中应用。

【技术实现步骤摘要】
梨质子泵基因PbrVHA-c4及其在调控果肉柠檬酸含量中的应用
本专利技术属于植物基因工程
，具体涉及一个梨质子泵基因PbrVHA-c4及其在调控果肉柠檬酸含量中的应用，具体涉及从白梨(Pyrusbretschneideri)中克隆得到一个编码V-ATPase(VacuolarH+-ATPase)c亚基的基因PbrVHA-c4，然后将该基因导入番茄中，获得的转基因番茄果实的柠檬酸含量明显提高。
技术介绍
有机酸在植物生长发育过程中发挥着关键的作用，他们参与植物体内的多种代谢，并能响应各类胁迫。不同的植物中，有机酸组分和含量也各不相同。在果树中，有机酸的种类和含量主导着果实的风味，而风味又是果实重要的品质性状之一。霍月清等(2009)对70个砂梨品种进行测定，结果显示，砂梨品种中存在苹果酸型和柠檬酸型两种类型。柠檬酸作为梨果实中主要的有机酸之一，对梨果实的风味品质的形成起非常重要的作用。在果树的生长发育过程中，有机酸通常在幼果期积累，随着果实的发育，呈现降低的趋势(Chenetal.,2009)。在果实早期发育过程中，柠檬酸在细胞质本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一个质子泵基因PbrVHA-c4，其具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。/n

【技术特征摘要】
1.一个质子泵基因PbrVHA-c4，其具有如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列。


2.权利要求1所述的质子泵基因PbrVHA-c4编码的蛋白质，其具有如SEQIDNO.2所示的氨基酸序列。


3.用于扩增权利要求1所述的质子泵基因PbrVHA-c4的引物对，其特征在于，它包括正向引物F1和反向引物R1；所述正向引物F1的序列如SEQIDNO.3所示；所述反向引物R1的序列如SEQIDNO.4所示。


4.含有权利要求1所述质子泵基因PbrVHA-c4的重组表达载体。


5.根据权利要求4所述的重组表达载体其特征在于，该重组表达载体是以pBI121为出发载体，将权利要求1所述质子泵基因PbrVHA-c4与载体pBI121连接得到的。


6.含有权利要求1所述的质子泵基因PbrVHA-c4的转基因重组菌。


7.根据权利要求6所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：张绍铃，许林林，谢智华，黄小三，齐开杰，郭志华，张雨馨，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32