用于威尔森病的寡核苷酸疗法制造技术

本公开提供了反义寡核苷酸、组合物和方法，所述反义寡核苷酸、组合物和方法靶向ATP7B外显子6或侧翼内含子，从而调节ATP7B前体mRNA的剪接以增加具有外显子6的ATP7BmRNA分子的水平，例如，以提供威尔森病的疗法。本公开提供了反义寡核苷酸，所述反义寡核苷酸包含与外显子6、5'‑侧翼内含子、3'‑侧翼内含子，或外显子6与5'‑侧翼内含子或3'‑侧翼内含子的组合中的ATP7B靶序列至少70％互补的核碱基序列。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于威尔森病的寡核苷酸疗法专利
本专利技术涉及寡核苷酸的领域及其在疾病治疗中的用途。特别地，本专利技术涉及可用于治疗威尔森(Wilson)病的反义寡核苷酸。
技术介绍
威尔森病是一种通常在年龄介于5至35岁之间的患者中被诊断出的致命的铜稳态病症，因游离铜的蓄积导致肝脏和神经系统症状。威尔森病的患病率估计为30,000个个体中就有1例。受损的铜肝胆排泄可能是肝细胞中反式高尔基铜转运蛋白ATP7B的缺陷所致。ATP7B是铜从细胞质转运到内膜隔室所必需的，随后铜经由囊泡转运从高尔基体被释放到胆汁中和/或铜被加载到铜蓝蛋白(CP)中用于血流转运。游离铜蓄积对生物分子(DNA、脂质、线粒体)造成直接的氧化性损伤，并且氧化性损伤/应激触发细胞凋亡。威尔森病的当前治疗指南建议使用螯合游离铜并导致其排泄的螯合剂进行初始治疗，然后用阻止肠吸收的螯合剂或锌盐作维持治疗。传统上需用螯合剂进行初始治疗(2-12个月)来除去患者体内过多的铜。恶化的肝脏状况可能导致铜从死肝细胞上的释放增加，因此只有达到稳定的肝脏状况时方可开始维持治疗。然而，锌盐的维持治疗因依从性本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种反义寡核苷酸，其包含与外显子6、5'-侧翼内含子、3'-侧翼内含子，或所述外显子6与所述5'-侧翼内含子或所述3'侧翼内含子的组合中ATP7B靶序列至少70％互补的核碱基序列。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180214 US 62/630,5651.一种反义寡核苷酸，其包含与外显子6、5'-侧翼内含子、3'-侧翼内含子，或所述外显子6与所述5'-侧翼内含子或所述3'侧翼内含子的组合中ATP7B靶序列至少70％互补的核碱基序列。


2.如权利要求1所述的反义寡核苷酸，其中所述ATP7B靶序列使剪接因子与所述5'-侧翼内含子或3'-侧翼内含子中内含子剪接沉默子的结合降低。


3.如权利要求1所述的反义寡核苷酸，其中所述ATP7B靶序列包含至少一个位于SEQIDNO:1中位置54672-54680间的核苷酸。


4.如权利要求1所述的反义寡核苷酸，其中所述ATP7B靶序列包含至少一个位于SEQIDNO:1中位置54691-54701间的核苷酸。


5.如权利要求1所述的反义寡核苷酸，其中所述ATP7B靶序列包含至少一个位于SEQIDNO:1中位置54492-54506间的核苷酸。


6.如权利要求1所述的反义寡核苷酸，其中所述ATP7B靶序列包含至少一个位于SEQIDNO:1中位置54472-54516、54522-54593和54665-54718间的核苷酸。


7.如权利要求1所述的反义寡核苷酸，其中所述核碱基序列与所述5'-侧翼内含子内的序列互补。


8.如权利要求1所述的反义寡核苷酸，其中所述ATP7B靶序列位于SEQIDNO:1中高达54517的位置间的5'-侧翼内含子内。


9.如权利要求1所述的反义寡核苷酸，其中所述核碱基序列与SEQIDNO:119、120、121、122、123或124具有至少70％的序列同一性。


10.如权利要求1所述的反义寡核苷酸，其中所述核碱基序列与SEQIDNO:122具有至少70％的序列同一性。


11.如权利要求1所述的反义寡核苷酸，其中所述ATP7B靶序列位于SEQIDNO:1中位置54522至54581间的5'-侧翼内含子内。


12.如权利要求1所述的反义寡核苷酸，其中所述核碱基序列与SEQIDNO:3、4、5、6、7、8、9或10具有至少70％的序列同一性。


13.如权利要求1所述的反义寡核苷酸，其中所述ATP7B靶序列位于所述5'-侧翼内含子和外显子6的组合内。


14.如权利要求1所述的反义寡核苷酸，其中所述ATP7B靶序列位于SEQIDNO:1中位置54562至54593间的5'-侧翼内含子和外显子6的组合内。


15.如权利要求1所述的反义寡核苷酸，其中所述核碱基序列与SEQIDNO:11具有至少70％的序列同一性。


16.如权利要求1所述的反义寡核苷酸，其中所述ATP7B靶序列位于外显子6或所述3'-侧翼内含子与外显子6的组合内。


17.如权利要求1所述的反义寡核苷酸，其中所述ATP7B靶序列位于SEQIDNO:1中的位置54631至54677间。


18.如权利要求1所述的反义寡核苷酸，其中所述核碱基序列与SEQIDNO:22、23、24或25具有至少70％的序列同一性。


19.如权利要求1所述的反义寡核苷酸，其中所述ATP7B靶序列位于所述3'-侧翼内含子内。


20.如权利要求1所述的反义寡核苷酸，其中所述ATP7B靶序列位于SEQIDNO:1中的位置54655至54738间。


21.如权利要求5、6、19或20所述的反义寡核苷酸，其中所述寡核苷酸的5'-端核苷酸与SEQIDNO:1的位置54695或54696均不互补。


22.如权利要求1所述的反义寡核苷酸，其中所述核碱基序列与SEQIDNO:28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154或155具有至少70％的序列同一性。


23.如权利要求1所述的反义寡核苷酸，其中所述核碱基序列与SEQIDNO:39、48、49、50、61、63、64、65、66、67、76、77、78、79、80、81、90、91、92、93、94、95、100、103、104、121和149具有至少70％的序列同一性。


24.如权利要求9、10、12、15、18、22、或23所述的反义寡核苷酸，其中所述序列同一性是至少90％。

【专利技术属性】
技术研发人员：F·施米特格斯，D·梅里科，E·维恩霍尔兹，M·奥哈拉，
申请(专利权)人：深度基因组学公司，
类型：发明
国别省市：加拿大;CA