一种水产品的人体外半动态模拟消化方法及装置制造方法及图纸

本发明专利技术公开了属于体外模拟消化技术领域的一种水产品的人体外半动态模拟消化方法及装置。包括口腔模拟：在水产品中加入口腔模拟消化液和CaCl

【技术实现步骤摘要】
一种水产品的人体外半动态模拟消化方法及装置
本专利技术属于体外模拟消化
，尤其涉及一种水产品的人体外半动态模拟消化方法及装置。
技术介绍
我国是水产大国，从20世纪90年代起，我国渔业产品的产量已经持续多年位列世界渔业产量榜首，2018年全国水产品总产量6457.66万吨，全国人均占有量已达到46.28千克。常见的水产品包括有鱼类、虾类、蟹类、贝类等产品，含有优质蛋白及不饱和脂肪酸，所含维生素种类丰富、碳水化合物较少，比起禽畜产品脂肪含量更低、更易于消化，营养价值较高。随着我国人民健康意识的增强、居民收入的提高，水产品消费市场有着不错的未来发展潜力，水产品蛋白将成为居民获取优质蛋白的重要来源。近年来，不少研究已表明人体内部复杂的消化过程对于食物营养成分的吸收利用有着不可忽视的影响作用，传统地基于营养物单一成分进行提取分析所得的研究结果，并不能充分地阐释某类食物的营养价值或生理功效，重要营养素蛋白质的相关研究更是如此，为了获取较高指导意义的研究结果，消化实验的建立使用是必要的。体内消化实验受活体对象选择的影响较大，由于个体差异明显、耗时较长、成本较高、涉及伦理道德问题等突出缺点，目前无法做到广泛使用。因而，具有省时省力、灵活性好、费用较低、重复性好、无个体差异影响等特点的体外模拟消化实验，在近年来受到广泛关注及应用。现已开发出不少体外动态消化模型，除人体外还模拟了其他动物，例如猪、鼠等；相较于体外静态消化模型而言，设备复杂繁多，搭建及维护麻烦，费用成本依旧偏高，难以达成大范围、低成本的推广使用。而关于体外静态消化方法的研究开发中，一般地采用磁力搅拌或者振荡摇床进行混匀，配制的模拟消化液也偏于简单，消化酶及无机盐等组分的选用还不够贴切人体真实情况，部分甚至缺乏口腔模拟阶段。模拟消化相关专利中，已有针对经济藻类、薏米、小麦面条、碳水化合物等物质的静态模拟消化方法内容公布侧重点大多偏向植物活性物质、碳水化合物等物质的变化，胃消化阶段常常出现胃脂肪酶的省略及pH值的几乎静态不变。国外LauraSams等人发布于Food&Function(2016)的研究中提出人胃pH值在进食后并非静态不变，而是先从1.0-1.5上升至5-7、再逐渐降低于3h后变回1.0-1.5，显然pH值变化会明显改变酶活以影响消化进程，而鱼虾贝类等为代表的水产品有着“高蛋白、低碳水、不饱和脂肪酸丰富”的成分含量特点，但对于水产品蛋白的体外半动态模拟消化方法尚未见报道。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术提出了一种水产品的人体外半动态模拟消化方法，包括以下步骤：1)口腔模拟：在预处理后的水产品中加入口腔模拟消化液，混合，加入CaCl2(H2O)2溶液后转至模拟消化装置的消化室内孵育，得到口腔模拟消化物；2)胃模拟：将胃模拟消化液加入口腔模拟消化物，混合，分批次加入盐酸溶液，所述盐酸溶液全部加入后，体系pH为2.0-1.2，盐酸溶液总加入量不超过5mL；用超纯水将胃模拟消化体系补充至20mL；加入CaCl2(H2O)2溶液后转至模拟消化装置的消化室内孵育，得到胃模拟消化物；3)肠模拟：在胃模拟消化物中加入肠模拟消化液，采用氢氧化钠溶液调pH值至6.9-7.4，所用氢氧化钠溶液不超过5mL；用超纯水将肠消化体系补足至40mL，混合，加入CaCl2(H2O)2溶液后转至模拟消化装置的消化室内孵育，得到肠模拟消化物。所述步骤1)中水产品/g与口腔模拟消化液/mL的加入比例为1:1；所述步骤2)口腔模拟消化物/mL与胃模拟消化液/mL加入量比例为：2:1；所述步骤3)胃模拟消化物/mL与肠模拟消化液/mL加入量比例为：4:3。口腔模拟消化液配方：取1mL口腔电解质液后用超纯水补到5mL，添加150U/mL的α-淀粉酶或人体口腔唾液淀粉酶；胃模拟消化液配方：取2mL胃电解质液后用超纯水补到5mL，添加8000U/mL的猪胃粘膜胃蛋白酶、240U/mL兔胃脂肪酶或黑曲霉Aspergillusniger的脂肪酶；肠模拟消化液配方：取4mL肠电解质液后用超纯水补到10mL，添加400U/mL的猪胰蛋白酶、100U/mL的牛胰凝乳蛋白酶、800U/mL的猪胰α-淀粉酶、8000U/mL的猪胰脂肪酶、16000U/mL的猪胰辅脂肪酶，混合均匀得到溶液A；采用牛胆盐或猪胆盐，配备成80mM浓度的溶液B；将溶液A和溶液B按体积比2:1混合得到肠模拟消化液。所述溶液A是胰液素。口腔电解质液配方：70-80mmol/LKCl、17-20mmol/LKH2PO4、60-65mmol/LNaHCO3、5-6mmol/LNaCl、0.7-0.8mmol/LMgCl2(H2O)6、0.2-0.4mmol/L(NH4)2CO3；更优的，口腔电解质液配方：75.5mmol/LKCl、18.5mmol/LKH2PO4、62.6mmol/LNaHCO3、5.4mmol/LNaCl、0.75mmol/LMgCl2(H2O)6、0.3mmol/L(NH4)2CO3；胃电解质液配方：30-40mmol/LKCl、4-5mmol/LKH2PO4、45-50mmol/LNaHCO3、300-330mmol/LNaCl、0.5-0.7mmol/LMgCl2(H2O)6、2-3mmol/L(NH4)2CO3；更优的，胃电解质液配方：34.5mmol/LKCl、4.5mmol/LKH2PO4、47mmol/LNaHCO3、314mmol/LNaCl、0.6mmol/LMgCl2(H2O)6、2.5mmol/L(NH4)2CO3。肠电解质液配方：32-36mmol/LKCl、3.5-4.5mmol/LKH2PO4、370-400mmol/LNaHCO3、230-240mmol/LNaCl、1.6-1.7mmol/LMgCl2(H2O)6；更优的，肠电解质液配方：34mmol/LKCl、4mmol/LKH2PO4、383mmol/LNaHCO3、234mmol/LNaCl、1.65mmol/LMgCl2(H2O)6。所述CaCl2(H2O)2溶液浓度为0.15mol/L；所述混合过程采用涡旋振荡器，混合时间为1-8s；所述孵育时间为2.0-3.0h，孵育过程进行360°翻转震荡；所述步骤1)水产品/g与CaCl2(H2O)2溶液/mL的加入比例为1:0.01；口腔消化物最终体系中Ca2+添加浓度0.6-0.9mmol/L；所述步骤2)口腔模拟消化物/mL与CaCl2(H2O)2溶液/mL的加入比例为1:0.01；胃消化物最终体系中Ca2+添加浓度0.4-0.6mmol/L；所述步骤3)胃模拟消化物/mL与CaCl2(H2O)2溶液/mL的加入比例为20:0.08；肠消化物最终体系中Ca2+添加浓度0.4-0.7mmol/L。所述步骤1)之前，所需使用的试剂及样品预先在模拟消化装置的恒温室进行37℃水浴保温；消化室提取开启至温本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种水产品的人体外半动态模拟消化方法，其特征在于，包括以下步骤：/n1)口腔模拟：在预处理后的水产品中加入口腔模拟消化液，混合，加入CaCl

【技术特征摘要】
1.一种水产品的人体外半动态模拟消化方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)口腔模拟：在预处理后的水产品中加入口腔模拟消化液，混合，加入CaCl2(H2O)2溶液后转至模拟消化装置的消化室内孵育，得到口腔模拟消化物；
2)胃模拟：将胃模拟消化液加入口腔模拟消化物，混合，分批次加入盐酸溶液，所述盐酸溶液全部加入后，体系pH为2.0-1.2，盐酸溶液总加入量不超过5mL；用超纯水将胃模拟消化体系补充至20mL；加入CaCl2(H2O)2溶液后转至模拟消化装置的消化室内孵育，得到胃模拟消化物；
3)肠模拟：在胃模拟消化物中加入肠模拟消化液，采用氢氧化钠溶液调pH值至6.9-7.4，所用氢氧化钠溶液不超过5mL；用超纯水将肠消化体系补足至40mL，混合，加入CaCl2(H2O)2溶液后转至模拟消化装置的消化室内孵育，得到肠模拟消化物。


2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，
所述步骤1)中水产品/g与口腔模拟消化液/mL的加入比例为1:1；
所述步骤2)口腔模拟消化物/mL与胃模拟消化液/mL加入量比例为：2:1；
所述步骤3)胃模拟消化物/mL与肠模拟消化液/mL加入量比例为：4:3。


3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，
口腔模拟消化液配方：取1mL口腔电解质液后用超纯水补到5mL，添加150U/mL的α-淀粉酶或人体口腔唾液淀粉酶；
胃模拟消化液配方：取2mL胃电解质液后用超纯水补到5mL，添加8000U/mL的猪胃粘膜胃蛋白酶、240U/mL兔胃脂肪酶或黑曲霉Aspergillusniger的脂肪酶；
肠模拟消化液配方：取4mL肠电解质液后用超纯水补到10mL，添加400U/mL的猪胰蛋白酶、100U/mL的牛胰凝乳蛋白酶、800U/mL的猪胰α-淀粉酶、8000U/mL的猪胰脂肪酶、16000U/mL的猪胰辅脂肪酶，混合均匀得到溶液A；采用牛胆盐或猪胆盐，配备成80mM浓度的溶液B；将溶液A和溶液B按体积比2:1混合得到肠模拟消化液。


4.根据权利要求3所述方法，其特征在于，所述溶液A是胰液素。


5.根据权利要求3所述方法，其特征在于，
口腔电解质液配方：70-80mmol/LKCl、17-20mmol/LKH2PO4、60-65mmol/LNaHCO3、5-6mmol/LNaCl、0.7-0.8mmol/LMgCl2(H2O)6、0.2-0.4mmol/L(NH4)2CO3；
胃电解质液配方：30-40mmol/LKCl、4-5mmol/LKH2PO4、45-50mmol/LNaHCO3、300-330mmol/LNaCl、0.5-0.7mmol/LMgCl2(H2O)6、2-3mmol/L(NH4)2CO3；
肠电解质液配方：32-36mmol/LKCl、3.5-4.5mmol/LKH2PO4、370-400mmol/LNaHCO3、230-240mmol/LNaCl、1.6-1.7mmol/LMgCl2(H2O)6。


6.根据权利要求1所述方法，其特征在于，
所述CaCl2(H2O)2溶液浓度为0.15mol/L；
所述混合过程采用涡旋振荡器，混合时间...

【专利技术属性】
技术研发人员：洪惠，冯淳淞，焦亚丹，罗永康，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：北京;11