【技术实现步骤摘要】
一种槲皮素纳米脂质体的制备及抗TMV活性研究方法
本专利技术涉及烟草病毒
，具体为一种槲皮素纳米脂质体的制备及抗TMV活性研究方法。
技术介绍
TMV是指烟草花叶病毒，为RNA病毒，是烟草花叶病等的病原体，属于Tobamovirus群，是目前烟草生产上分布最广、发生最为普遍的一类病害，对烟草的危害极大，烟草花叶病和番茄花叶病早为一般所了解。在现有技术中，烟草的的对TMV的抗性较差，叶上容易出现花叶症状，生长陷于不良状态，叶常呈畸形，影响到烟草的正常生长。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种槲皮素纳米脂质体的制备及抗TMV活性研究方法，解决了烟草的的对TMV的抗性较差的问题。为实现以上目的，本专利技术通过以下技术方案予以实现：一种槲皮素纳米脂质体的制备方法，包括以下步骤：S1：准备原料；S11：准确称取无水槲皮素0.01g溶于10mL甲醇溶液，磁力搅拌至完全溶解(室温，220rpm)，得到溶液A；S12：称取0.1g卵磷脂，0.02g胆固醇共...
【技术保护点】
1.一种槲皮素纳米脂质体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1：准备原料；/nS11：准确称取无水槲皮素0.01g溶于10mL甲醇溶液，磁力搅拌至完全溶解(室温，220rpm)，得到溶液A；/nS12：称取0.1g卵磷脂，0.02g胆固醇共溶于20mL三氯甲烷，磁力搅拌至完全溶解(室温，220rpm)，得到溶液B；/nS2：槲皮素纳米脂质体的制备；/nS21：将所述步骤S11中的溶液A缓慢倾倒入磁力搅拌的所述步骤S12的溶液B中，磁力搅拌至透明无颗粒状态；/nS22：将所述步骤S21中得到的溶液置于250mL旋蒸瓶中，再将旋蒸瓶置于旋蒸仪内，直至溶剂全部蒸干，旋蒸瓶...
【技术特征摘要】
1.一种槲皮素纳米脂质体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：准备原料；
S11：准确称取无水槲皮素0.01g溶于10mL甲醇溶液，磁力搅拌至完全溶解(室温，220rpm)，得到溶液A；
S12：称取0.1g卵磷脂，0.02g胆固醇共溶于20mL三氯甲烷，磁力搅拌至完全溶解(室温，220rpm)，得到溶液B；
S2：槲皮素纳米脂质体的制备；
S21：将所述步骤S11中的溶液A缓慢倾倒入磁力搅拌的所述步骤S12的溶液B中，磁力搅拌至透明无颗粒状态；
S22：将所述步骤S21中得到的溶液置于250mL旋蒸瓶中，再将旋蒸瓶置于旋蒸仪内，直至溶剂全部蒸干，旋蒸瓶底部瓶壁析出一层淡黄色薄膜，在旋蒸瓶中加入去离子水溶解薄膜，静置30min；
S23：将所述步骤S22中得到的溶液置于超声波细胞粉碎机中，得到槲皮素纳米脂质体的水溶液；其中槲皮素的浓度为0.1mM/L。
2.根据权利要求1所述的一种槲皮素纳米脂质体的制备方法，其特征在于：所述步骤S11和所述步骤S12均需要在室温下进行称量磁力搅拌，搅拌的转速需要达到220rpm。
3.根据权利要求1所述的一种槲皮素纳米脂质体的制备方法，其特征在于：所述步骤S22中，旋蒸仪设定30℃，30rpm，20min，所述步骤S23中，超声波细胞粉碎机功率调至30％，超声5s开，5s关，超声震荡2min。
4.一种槲皮素纳米脂质体TMV活性研究方法，其特征在于，包括以下步骤：
S3:TMV活性研究；
S31：实验材料准备，需要准备供试植物材料和供试毒源头；
S32：供试毒源，TMV经心叶烟枯斑纯化并在普通烟NC89上繁育，TMV-GFP的侵染性克隆由本实验室农杆菌保存。
S4：实验方法；
S41：TMV接种液制备，采用GOODING&HELBERT(1967)方法并稍作改进制备TMV接种溶液，取NC89上部带毒新叶，用0.01mol/L的PBS缓冲液(pH7.2-7.4)充分研磨，双层纱布过滤后4℃，10000×g离心20m...
【专利技术属性】
技术研发人员：王杰，雷霆，杨金广，罗倩茜，王勇，刘东阳，刘明宏，丁忠林，王凤龙，申莉莉，
申请(专利权)人：中国农业科学院烟草研究所，贵州省烟草公司黔南州公司，
类型：发明
国别省市：山东;37
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