【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】制备稳定的蛋白质组合物的方法相关申请的交叉引用本申请要求2018年4月12日提交的美国临时申请号62/656,687的权益，将其通过引用并入本文。
本申请涉及用于制备稳定的蛋白质组合物的方法。本申请还涉及使用纯化程序去除一种或多种杂质来纯化目的蛋白的方法。
技术介绍
高效且经济地大规模纯化蛋白质(例如包括抗体的治疗性蛋白质)已成为生物技术和制药行业日益重要的考虑因素。由于通常使用细胞培养方法来生产蛋白质，例如，使用工程改造的哺乳动物或细菌宿主细胞以在合适的培养基中产生目的蛋白质，纯化蛋白质的过程包括许多不同的步骤，以从培养基成分和宿主细胞中除去杂质。尽管纯化蛋白质的过程可能会有所不同，这具体取决于纯化过程中特定目的蛋白质的性质，但所述过程通常至少包括从宿主细胞和/或细胞碎片回收蛋白质的步骤(例如，使用离心和/或过滤方法)和将蛋白质与各种杂质分离以纯化蛋白质的步骤(例如，使用一种或多种色谱法和/或过滤方法)。通常，蛋白质纯化过程包括最终的超滤和渗滤(UFDF)操作。在UFDF操作期间和之后，许多蛋白质会...
【技术保护点】
1.一种用于制备包含蛋白质的组合物的方法，所述方法包括：/n提供包含目的蛋白质的制剂，所述制剂是在对包含所述蛋白质和一种或多种杂质的样品进行纯化过程后获得，/n在最终的超滤和渗滤操作之前，将所述制剂的pH调节至目标pH，并且/n从所述最终的超滤和渗滤操作获得包含所述蛋白质的组合物，其中所述目标pH是或约是从所述最终的超滤和渗滤操作获得的包含所述蛋白质的所述组合物的pH。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180412 US 62/6566871.一种用于制备包含蛋白质的组合物的方法，所述方法包括：
提供包含目的蛋白质的制剂，所述制剂是在对包含所述蛋白质和一种或多种杂质的样品进行纯化过程后获得，
在最终的超滤和渗滤操作之前，将所述制剂的pH调节至目标pH，并且
从所述最终的超滤和渗滤操作获得包含所述蛋白质的组合物，其中所述目标pH是或约是从所述最终的超滤和渗滤操作获得的包含所述蛋白质的所述组合物的pH。
2.如权利要求1所述的方法，其中使用pH调节剂来调节所述pH。
3.如权利要求2所述的方法，其中所述pH调节剂是酸、碱或缓冲液。
4.如权利要求3所述的方法，其中所述酸选自由以下组成的组：乙酸、己二酸、海藻酸、抗坏血酸、天冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、硼酸、樟脑磺酸、柠檬酸、辛酸、甲酸、谷氨酸、盐酸、氢溴酸、羟基酸、透明质酸、乳酸、苹果酸、甲磺酸、硝酸、磷酸、丙酸、硫酸、磺酸、氨甲环酸和酒石酸。
5.如权利要求4所述的方法，其中所述酸选自由以下组成的组：乳酸、羟基酸和透明质酸。
6.如权利要求3所述的方法，其中所述碱选自由以下组成的组：氨溶液、碳酸铵、二乙醇胺、氢氧化钙、乙醇胺、赖氨酸、葡甲胺、聚赖氨酸、氢氧化钾、碳酸氢钠、硼酸钠、碳酸钠、氢氧化钠和三乙醇胺。
7.如权利要求3所述的方法，其中所述缓冲液选自由以下组成的组：乙酸盐缓冲液、天冬氨酸盐缓冲液、抗坏血酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、苯甲酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、甘氨酸缓冲液、HEPES缓冲液、MOPS缓冲液、MES缓冲液、N-(2-乙酰胺基)亚氨基二乙酸(ADA)缓冲液、组氨酸缓冲液、乳酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液、琥珀酸盐缓冲液、Tris缓冲液、Bis-tris缓冲液和酒石酸盐缓冲液。
8.如权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述目标pH是约pH4.0至约pH7.0。
9.如权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述目标pH是约pH4.0至约pH6.0。
10.如权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述方法进一步包括将所述制剂中的所述蛋白质浓缩至目标浓度。
11.如权利要求10所述的方法，其中浓缩步骤在pH调节步骤之前进行。
12.如权利要求10所述的方法，其中所述浓缩步骤在所述pH调节步骤之后且所述最终的UFDF操作之前进行。
13.如权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述最终的超滤和渗滤操作是使用基本不包含缓冲液的培养基进行。
14.如权利要求13所述的方法，其中从所述最终的超滤和渗滤操作获得的所述组合物包含浓度为约40mg/mL至约200mg/mL的蛋白质。
15.如权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述最终的超滤和渗滤操作是使用包含缓冲液的培养基进行。
16.如权利要求15所述的方法，其中所述培养基包含浓度为2mM至约300mM的缓冲液。
17.如权利要求15或权利要求16所述的方法，其中从所述最终的超滤和渗滤操作获得的所述组合物包含浓度为约1mg/mL至约200mg/mL的蛋白质。
18.如权利要求15所述的方法，其中所述培养基包含浓度为2mM至约10mM的缓冲液，并且其中从所述超滤和渗滤操作获得的所述组合物包含浓度为约1mg/mL至约50mg/mL的蛋白质。
19.如权利要求15所述的方法，其中所述培养基包含缓冲液，所述缓冲液的pH在所述缓冲液的缓冲能力范围之外，并且其中从所述超滤和渗滤操作获得的所述组合物包含浓度为约1mg/mL至约50mg/mL的蛋白质。
20.如权利要求1-19中任一项所述的方法，其中所述纯化过程包括以下步骤中的一个或多个：离心、微滤、TFF、病毒灭活、亲和色谱、阳离子交换色谱、阴离子交换色谱、疏水相互作用色谱、超滤、渗滤、SPTFF、深度过滤和混合模式色谱。
21.如权利要求20所述的方法，其中所述纯化过程包括病毒过滤步骤和以下步骤中的一个或多个：离心、微滤、TFF、病毒灭活、亲和色谱、阳离子交换色谱、阴离子交换色谱、疏水相互作用色谱、混合模式色谱、超滤、渗滤、SPTFF和深度过滤，并且
其中所述制剂从所述病毒过滤步骤获得。
22.如权利要求20所述的方法，其中所述纯化过程包括阳离子交换色谱步骤和以下步骤中的一个或多个：离心、微滤、TFF、病毒灭活、亲和色谱、阴离子交换色谱、疏水相互作用色谱、混合模式色谱、超滤、渗滤、SPTFF、病毒过滤和深度过滤，并且
其中所述制剂从所述阳离子交换色谱步骤获得。
23.如权利要求20所述的方法，其中所述纯化过程包括阴离子交换色谱步骤和以下步骤中的一个或多个：离心、微滤、TFF、病毒灭活、亲和色谱、阳离子交换色谱、疏水相互作用色谱、混合模式色谱、超滤、渗滤、SPTFF、病毒过滤和深度过滤，并且
其中所述制剂从所述阴离子交换色谱步骤获得。
24.如权利要求20所述的方法，其中所述纯化过程包括疏水相互作用色谱步骤和以下步骤中的一个或多个：离心、微滤、TFF、病毒灭活、亲和色谱、阳离子交换色谱、阴离子交换色谱、混合模式色谱、超...
【专利技术属性】
技术研发人员：W·卡拉汉，L·德桑蒂亚戈，C·塔利，Y·维克斯勒科亨，J·阿贝尔，R·考施克，N·M·雅各布，C·陈，N·鲍尔，M·戈斯，
申请(专利权)人：美国安进公司，
类型：发明
国别省市：美国;US
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