一种菌落面积的测量方法及其应用技术

本发明专利技术涉及一种菌落面积的测量方法及其应用。本发明专利技术使用高像素照相机对待测菌落进行图像获取，然后使用image J图像处理软件对保存的图像进行分析计算，从而得出菌落面积数据，并能根据清晰图像，观察菌落边缘整齐度、菌落形状等指标。比传统利用直尺测量菌落直径计算面积、肉眼观察菌落形态等方式，大大提高了测量数据的精确度和准确度，同时，该测量方法操作简单便捷，便于实验室人员使用。尤其是在微生物培养基基质配方的筛选中，使用这种方法产生的试验数据可信度更高，不受人为因素影响，采用本方法对培养皿的大小几乎无限制要求，且取材方便，操作简单，机动性强，无需投入过多财力，即可满足一般实验室分析使用。

【技术实现步骤摘要】
一种菌落面积的测量方法及其应用
本专利技术涉及一种菌落面积的测量方法及其应用，属于微生物检测

技术介绍
在微生物培养、筛选，或者微生物培养基筛选中，微生物的菌落面积及菌落形态是研究的关键指标。如，秦俊哲等人根据菌丝形态、生长特性等的差异，初步鉴定8种不同来源的桑黄菌株的亲缘关系，将活化好的菌种按无菌操作的要求分别转接至斜面和平板培养基上，28℃恒温培养，每2d观察1次，记录菌丝萌发快慢、生长速度、菌落大小、菌丝颜色、长势等特征(秦俊哲等，8种不同来源桑黄菌菌丝生长特性研究，陕西科技大学学报，2020，28(6):56-58.)。根据微生物的菌落面积或者菌落形态特征的差异，可以对不同的微生物菌种进行初步鉴定。郭炜等人测定了不同碳源及氮源条件下秀珍菇的菌落直径、菌丝长势等，研究了不同碳源及氮源对秀珍菇菌丝生长的影响，通过每天观察菌落生长势，对菌落长势进行评分，菌落直径的测量用划线法，并计算出秀珍菇的菌丝生长速率，为秀珍菇的工厂化生产提供了依据(郭炜等，不同氮碳源对秀珍菇菌丝生长的影响，黑龙江农业科学，2018(8):82-84.)。徐丽丽等通过筛选出的碳源、氮源基础培养基，接种1d后，每天使用游标卡尺测量菌落直径并记录，计算出菌丝覆盖面达培养皿培养基表面50％、达培养皿培养基表面100％的天数，对菌丝形态、菌丝生长速度进行观察，确定出适宜的松乳菇菌种和固体培养基配方(徐丽丽等，松乳菇菌种固体培养基筛选初步研究，江苏林业科技，2020，47(1):29-31.)。龚光禄等人设计5种不同的母种培养基，研究了不同培养基对桑黄菌丝生长的影响，观察菌丝的生长特性，并用十字交叉法测定菌落直径，计算菌丝生长速度，为该菌株的驯化栽培、生理生化研究奠定基础(龚光禄等，药用真菌桑黄(I.sanghuang)母种培养基的筛选，北方园艺，2016(24):139-141.)。在培养基筛选中，菌落面积和菌落形态是一项重要的考察指标，在其他筛选变量保持不变时，根据单位时间内，微生物在特定培养基上生长的菌落面积及其菌落形态，可以初步筛选出适宜微生物生长的培养基基质配方。现有技术中，菌落面积的测量多采用尺子直接测量，菌落形态特征也是采用肉眼直接观察，得出的结果往往误差较大，对微生物培养、筛选，或者微生物培养基筛选易造成不良后果，加大了工作量，增加了实验误差。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种菌落面积的测量方法及其应用。本专利技术的技术方案如下：一种菌落面积的测量方法，包括如下步骤：(1)使用照相机对待测菌落进行图像获取，保存；(2)使用imageJ图像处理软件对保存的图像进行分析计算，得出菌落面积数据，并观察菌落形态。根据本专利技术优选的，步骤(1)中待测菌落与直尺共同置于照相机的取相范围内获得图像。根据本专利技术优选的，步骤(1)中照相机的参数为：2000万以上像素照相机，50mm，F1.8标准镜头，曝光时间：1/100秒，光圈值f/2，ISO为100，测光模式为点测光。根据本专利技术优选的，步骤(1)中图像为单色图像。上述菌落面积的测量方法在筛选微生物培养基基质配方中的应用。上述菌落面积的测量方法在微生物筛选中的应用。本专利技术的技术特点和有益效果：本专利技术使用高像素照相机对待测菌落进行图像获取，然后使用imageJ图像处理软件对保存的图像进行分析计算，从而得出菌落面积数据，并能根据清晰图像，观察菌落边缘整齐度、菌落形状等指标。比传统利用直尺测量菌落直径计算面积、肉眼观察菌落形态等方式，大大提高了测量数据的精确度和准确度，同时，该测量方法操作简单便捷，便于实验室人员使用。尤其是在微生物培养基基质配方的筛选中，使用这种方法产生的试验数据可信度更高，不受人为因素影响，采用本方法对培养皿的大小几乎无限制要求，且取材方便，操作简单，机动性强，无需投入过多财力，即可满足一般实验室分析使用。附图说明图1为实施例1中的待测菌落图像；图2为实施例1中的待测菌落面积分析图；图3为实施例1中待测菌落的细节图。具体实施方式下面结合实施例和附图对本专利技术的技术方案作进一步说明，但是本专利技术的保护范围并不仅限于此。实施例中涉及的药品及耗材，若无特殊说明，均为普通市售产品。实施例中使用的照相机参数：2000万像素单反照相机，50mm，F1.8标准镜头，手动模式下，曝光时间：1/100秒，光圈值：f/2，ISO：100，测光模式：点测光，照片风格：单色。实施例1一种菌落面积的测量方法，包括如下步骤：(1)取一个生长有微生物的培养皿，将该培养皿与直尺共同置于照相机的取相范围内，使用照相机对待测菌落进行图像获取，保存；获取的图像如图1所示，为单色图像；(2)使用imageJ图像处理软件对保存的图像中的菌落进行分析计算，imageJ软件分析菌落面积如图2所示，得出其菌落面积为585.579mm2，并观察菌落形态(图3)，菌落边缘较整齐规则，近似正圆形，菌丝浓密。仍以图1中菌落为例，在培养皿中用直尺采用十字交叉法测量，由于以肉眼很难分辨菌丝边缘界线，且该菌落为近似正圆形(非正圆形)，只能采用至少三次量取计算平均值的方法，求得菌落面积为772.54mm2(以菌丝边缘最外缘为界，按正圆形计算)，与本专利技术的测量方法相比，费时费力，人为误差很大，为接下来的数据分析提供的原始信息不精确，从而使试验结果可信度大大降低。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种菌落面积的测量方法，其特征在于，包括如下步骤：/n(1)使用照相机对待测菌落进行图像获取，保存；/n(2)使用image J图像处理软件对保存的图像进行分析计算，得出菌落面积数据，并观察菌落形态。/n

【技术特征摘要】
1.一种菌落面积的测量方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)使用照相机对待测菌落进行图像获取，保存；
(2)使用imageJ图像处理软件对保存的图像进行分析计算，得出菌落面积数据，并观察菌落形态。


2.如权利要求1所述的测量方法，其特征在于，步骤(1)中待测菌落与直尺共同置于照相机的取相范围内获得图像。


3.如权利要求1所述的测量方法，其特征在于，步骤(1)中...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋洪燕，郭光，乔鹏，王安皆，李化秀，
申请(专利权)人：山东省蚕业研究所，
类型：发明
国别省市：山东;37