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一种基于原位生成的2,3-二氨基吩嗪荧光检测碱性磷酸酶的方法技术

技术编号:26415276 阅读:54 留言:0更新日期:2020-11-20 14:09
本发明专利技术提供一种基于原位生成的2,3‑二氨基吩嗪荧光检测碱性磷酸酶的方法,将AgON

【技术实现步骤摘要】
一种基于原位生成的2,3-二氨基吩嗪荧光检测碱性磷酸酶的方法
本专利技术属于酶检测
,具体涉及一种基于原位生成的2,3-二氨基吩嗪荧光检测碱性磷酸酶的方法。
技术介绍
碱性磷酸酶(ALP)广泛分布于人体许多组织中,其含量异常水平与许多疾病密切相关。因此,发展简单、快速、高效且准确方法用于ALP的检测具有重要意义。荧光光谱法具有仪器操作简单、检测时间短及高灵敏度等优势,引起人们广泛关注。目前荧光光谱法检测ALP大多利用有机荧光探针、荧光共聚物、半导体量子点等。但有机荧光探针水溶性较差,荧光共聚物的制备较为费时,半导体量子点毒性较大限制了它们的应用。通过将化学试剂混合即可原位生成荧光材料用于ALP的检测具有操作简单并且省时等优点。赵等人利用L-抗坏血酸和邻苯二胺原位生成的荧光分子实现了ALP的检测(Anal.Chem.2019,91,2978-2984)。刘等人基于原位生成的聚合物量子点检测ALP(Sci.ChinaChem.2020,63,554-560)。尽管这两种方法相比提前制备纳米材料检测ALP的方法操作较为简单,但它本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于原位生成的2,3-二氨基吩嗪荧光检测碱性磷酸酶的方法,其特征在于,将AgON

【技术特征摘要】
1.一种基于原位生成的2,3-二氨基吩嗪荧光检测碱性磷酸酶的方法,其特征在于,将AgON3与邻苯二胺溶液、对硝基苯磷酸酯混合后,420nm激发时,在570nm处有较强的荧光发射峰;将待测样品将入上述溶液中,若体系荧光强度没有明显变化,则待测样品中没有碱性磷酸酶;若体系荧光强度明显降低,则待测样品中含有碱性磷酸酶。


2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,待测样品中含有碱性磷酸酶,可以进一步测试含量,具体包括以下步骤:
(1)向离心管中依次加入80μL10mM、pH=10的80μLTris-HCl缓冲溶液、10μL对硝基苯磷酸酯及10μLALP,混合均匀后置于37℃水浴锅内孵育60min;接着,向离心管中加入880μL磷酸缓冲溶液,10μLAgNO3,10μLOPD,混合均匀后置于...

【专利技术属性】
技术研发人员:逯一中倪朋娟陈传霞姜媛媛张成会王波
申请(专利权)人:济南大学
类型:发明
国别省市:山东;37

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