检测番茄根结线虫抗性基因Mi-1.2的KASP引物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及分子生物学和番茄育种技术领域，特别是指检测番茄根结线虫抗性基因Mi‑1.2基因分型的KASP引物及其应用。基因Mi‑1.2在第9173碱基的位置存在一处SNP位点，该SNP位点碱基的突变导致Mi‑1.2基因对番茄根结线虫抗性的改变。本发明专利技术基于该SNP位点开发设计了一组可用于检测番茄根结线虫抗性基因Mi‑1.2基因分型的KASP引物和包含该KASP引物的试剂盒。本发明专利技术中的KASP引物和试剂盒可用于鉴定番茄中是否含有番茄根结线虫的抗性基因Mi‑1.2，区分含有Mi‑1.2基因的抗根结线虫的番茄和不含有Mi‑1.2基因的感根结线虫的番茄。本发明专利技术相比现有技术可对番茄植株在苗期快速、准确、高通量的进行番茄根结线虫抗性鉴定，降低苗期人工接种和田间抗虫性鉴定的工作量。

【技术实现步骤摘要】
检测番茄根结线虫抗性基因Mi-1.2的KASP引物及其应用
本专利技术涉及分子生物学和作物育种
，特别是指检测番茄根结线虫抗性基因Mi-1.2的KASP引物及其应用。
技术介绍
番茄(LycopersiconesculentumMill.)是茄科番茄属的一种一年生或多年生草本植物，起源于南美洲，是一种世界性的蔬菜作物，也是我国的主要栽培蔬菜之一。随着番茄栽培面积的扩大、栽培方式的多样化和连作障碍等影响，番茄病虫害也在不断加剧。根结线虫(Meloidogynespp.)是危害番茄的重要病原物之一，它种类繁多，分布广泛，危害严重，侵染的寄主范围广，传播途径多。随着保护地蔬菜生产的增加，由于复种和重茬严重，作为土传病害的根结线虫危害日趋严重。番茄是对根结线虫最敏感的作物之一，番茄抗根结线虫育种已成为番茄育种工作的重要目标之一，随着番茄育种技术的不断进步，番茄已经由传统育种转向现代分子标记辅助的育种研究，分子标记辅助选择是对目标性状在DNA水平上的选择，不受环境影响，不受等位基因显隐性关系干扰，选择结果准确可靠。目前国际植物新品种保护联盟本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.检测番茄根结线虫抗性基因Mi-1.2的KASP引物，其特征在于所述KASP引物序列包含：/n正向引物Mi-1.2-F1：5’-CTTGCATACGGATAATACAGATGT-3’，其序列如SEQ No.1；/n正向引物Mi-1.2-F2：5’-CTTGCATACGGATAATACAGATGC-3’，其序列如SEQ No.2；/n所述正向引物Mi-1.2-F1和正向引物Mi-1.2-F2分别与不同的标签序列相连接。/n

【技术特征摘要】
1.检测番茄根结线虫抗性基因Mi-1.2的KASP引物，其特征在于所述KASP引物序列包含：
正向引物Mi-1.2-F1：5’-CTTGCATACGGATAATACAGATGT-3’，其序列如SEQNo.1；
正向引物Mi-1.2-F2：5’-CTTGCATACGGATAATACAGATGC-3’，其序列如SEQNo.2；
所述正向引物Mi-1.2-F1和正向引物Mi-1.2-F2分别与不同的标签序列相连接。


2.根据权利要求1所述的检测番茄根结线虫抗性基因Mi-1.2的KASP引物，其特征在于合成所述正向引物Mi-1.2-F1时，在其5’端加上序列为：5’-GAAGGTGACCAAGTTCATGCT-3’的标签序列A，其序列如SEQNo.6；合成所述正向引物Mi-1.2-F2时，在其5’端加上序列为5’-GAAGGTCGGAGTCAACGGATT-3’的标签序列B，其序列如SEQNo.7。


3.根据权利要求1或2中所述的检测番茄根结线虫抗性基因Mi-1.2的KASP引物，其特征在于所述的KASP引物序列为：
正向引物1：5’-GAAGGTGACCAAGTTCATGCTCTTGCATACGGATAATACAGATGT-3’，其序列如SEQNo.3；
正向引物2：5’-GAAGGTCGGAGTCAACGGATTCTTGCATACGGATAATACAGATGC-3’，其序列如SEQNo.4。


4.根据权利要求1-3中任一项所述的检测番茄根结线虫抗性基因Mi-1.2的KASP引物，其特征在于所述KASP引物中还包括：
反向引物：5’-ACTATTCCTATGCTATGTTGTTTGC-3’，其序列如SEQNo.5。


5.用于检测番茄根结线虫抗性基因Mi-1.2...

【专利技术属性】
技术研发人员：李亚栋，吴志明，康忱，王鹏，田哲娟，王洪乐，邙光伟，杨超沙，王美娥，
申请(专利权)人：河北省农林科学院经济作物研究所，
类型：发明
国别省市：河北;13