牙龈炎诊断方法、用途和试剂盒技术

公开了一种用于评估人类患者是否具有牙龈炎的体外方法。方法基于确定生物标志物蛋白质的见解。因此，在患有牙龈炎的患者的唾液样本中，特定蛋白质组合的浓度被测量。一种这样的组合是α‑1‑酸性糖蛋白(A1AGP)以及以下中的至少一种：基质金属蛋白酶‑8(MMP8)、基质金属蛋白酶‑9(MMP9)、肝细胞生长因子(HGF)、血红蛋白β亚基(Hb‑β)和S100钙结合蛋白A8(S100A8)。基于所测量的浓度，反映所述蛋白质的联合浓度的值被确定。该值与阈值进行比较，阈值以相同方式反映与牙龈炎相关联的联合浓度。比较允许评估测试值是否指示所述患者的牙龈炎的存在。由此，通常，反映联合浓度低于由阈值反映的联合浓度的测试值指示患者的牙龈炎的不存在，并且反映联合浓度等于或高于由阈值反映的联合浓度的测试值指示患者患有牙龈炎。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】牙龈炎诊断方法、用途和试剂盒
本专利技术属于口腔护理领域，并且涉及基于唾液的牙周疾病的诊断。具体地，本专利技术涉及一种用于诊断牙龈炎的试剂盒、用途和方法。
技术介绍
牙龈发炎或牙龈炎是非破坏性的牙周疾病，主要由牙菌膜或牙菌斑附着至牙齿表面引起。如果不进行检测和治疗，可逆性牙龈炎通常会导致牙齿周围的组织(即，牙周组织)发炎，这种情况被定义为牙周炎，这种情况不可逆并导致组织破坏和牙槽骨脱落，并最终导致牙齿脱落。在牙龈疾病的发展期间，通常会有与其相关联的临床体征和症状，诸如，牙龈肿胀，颜色由粉红色变为深红色，牙龈出血，口臭以及牙龈触摸起来变得越来越脆弱或疼痛。牙周炎是由口腔微生物引起的慢性多因素的炎症疾病，并且其特征是逐步破坏硬(骨)以及软(牙周韧带)组织，最终导致牙齿松动和脱落。这需要区别于牙龈炎，牙龈炎是牙龈组织的可逆的感染和发炎。炎症牙周炎是最普遍的慢性人类疾病中的一种并且是成年人牙齿脱落的主要原因。除了牙周炎对口腔健康的实质性负面影响外，这里还有大量证据证明牙周炎具有全身性影响，并且它是多种全身性疾病的风险因素，包括心脏病(例如，动脉粥样硬化、中风)、糖尿病、妊娠并发症、类风湿关节炎以及呼吸道感染。因此，从口腔以及整体健康来看，牙周疾病的早期和准确诊断都很重要。在一般牙科实践中，牙周疾病的诊断仍然较差，导致相对较低的治疗干预率以及大量未经治疗的病例。当前的诊断依赖于牙科专业人员对口腔组织情况(颜色、肿胀、探查的出血程度、探查囊袋深度；以及来自口腔x射线的骨脱落)进行不精确的主观临床检查。这些传统方法耗时，并且所使用的某些技术(囊袋深度、x射线)反映了历史事件，诸如，过去的疾病活动，而不是当前的疾病活动或对进一步疾病的敏感性。因此，期望更客观、更快、准确、更易于使用的诊断，其优选地也可以由非专科医生执行。从而，期望测量当前的疾病活动以及可能的对象对进一步的牙周疾病的敏感性。唾液或口腔液长期以来被提倡作为口腔和一般疾病的诊断液，并且随着微型生物传感器(也称为芯片实验室)的出现，用于快速椅旁测试的即时诊断引起了更大的科学和临床兴趣。特别是针对牙周疾病检测，与组织炎症和分解相关联的炎症生物标志物可能会由于邻近而容易地结束在唾液中，这表明唾液具有用于牙周疾病检测的强大潜力。的确，这个领域因此引起了明显的兴趣并且提出了令人鼓舞的结果。例如，Ramseier等人(JPeriodontol.2009Mar；80(3):436-46)标识了与牙周疾病相关的宿主以及细菌衍生的生物标志物。然而，目前还没有确切的测试出现。生物标志物表示支持临床表现的生物学指标，因此，它们是诊断牙周疾病的临床结果的客观度量。最终，经过证明的生物标志物可以被用于评估未来疾病的风险，在最早阶段标识疾病，标识对初始治疗的反应并且允许实施预防策略。先前用于唾液生物标志物的即时测试发展的限制包括缺少适用于椅旁应用的技术以及无法分析各个样本中的多种生物标志物。而且，在这种测试中包括多种生物标志物的哪种的选择没有在文献中得到充分的解决，也没有在实际测试中实施。期望提供更简单的过程，具体地仅需要从患者获得(并且可能地由患者他或她自己获得)少量唾液样本的过程。期望将这种样本输入体外诊断设备中，它将基于测量允许对唾液样本进行分类，使得它可以返回患者被分类为患有牙龈炎的可能性的指示。
技术实现思路
为了更好地解决前述需求，在一个方面中，本专利技术涉及一种用于评估人类患者是否具有牙龈炎的体外方法，该方法包括：在来自所述人类患者的唾液样本中，检测以下蛋白质的浓度：(i)α-1-酸性糖蛋白(A1AGP)以及以下中的至少一种：基质金属蛋白酶-8(MMP8)、基质金属蛋白酶-9(MMP9)、肝细胞生长因子(HGF)、血红蛋白β亚基(Hb-β)和S100钙结合蛋白A8(S100A8)中的至少一种；或者(ii)肝细胞生长因子(HGF)以及以下蛋白质中的至少一种：基质金属蛋白酶-8(MMP8)和角蛋白4(K-4)；或者(iii)基质金属蛋白酶-8(MMP8)和以下蛋白质中的至少一种：白介素-1β(IL-1β)、角蛋白4(K-4)和抑制蛋白；确定反映针对所述蛋白质确定的联合浓度的测试值；以及将测试值与阈值进行比较，该阈值以相同方式反映与牙龈炎相关联的联合浓度，以便评估测试值是否指示所述患者患有牙龈炎。在另一方面中，本专利技术提出了第一方面的蛋白质在人类患者的唾液样本中作为用于评估患者是否具有牙龈炎的生物标志物的用途。可选地，患者的年龄也被用作生物标志物。在又一方面中，本专利技术在于一种用于评估人类患者是否具有牙龈炎的系统，该系统包括：-检测装置，其能够以及适于在人类患者的唾液样本中检测蛋白质：(i)α-1-酸性糖蛋白(A1AGP)以及以下中的至少一种：基质金属蛋白酶-8(MMP8)、基质金属蛋白酶-9(MMP9)、肝细胞生长因子(HGF)、血红蛋白β亚基(Hb-β)和S100钙结合蛋白A8(S100A8)；或者(ii)肝细胞生长因子(HGF)以及以下蛋白质中的至少一种：基质金属蛋白酶-8(MMP8)和角蛋白4(K-4)；或者(iii)基质金属蛋白酶-8(MMP8)和以下蛋白质中的至少一种：白介素-1β(IL-1β)、角蛋白4(K-4)和抑制蛋白；以及-处理器，其能够以及适于通过所述蛋白质的所确定的浓度确定患者具有牙龈炎的指示。该系统可选地包含到能够呈现信息的界面(特别是图形用户界面)的数据连接，优选地还能够输入诸如对象的年龄等信息、以及可选地诸如性别和/或BMI(身体质量指数)等其他信息，所述界面是系统的一部分或远程界面。可选地，前述项目中的一个或多个(特别是处理器)能够“在云中”运行，即，不是在固定机器上，而是借助于基于互联网的应用。在又一方面中，本专利技术提供了一种用于在人类患者的唾液样本中检测用于牙龈炎的至少两种生物标志物的试剂盒，所述试剂盒包括用于检测以下蛋白质的检测试剂：(i)α-1-酸性糖蛋白(A1AGP)以及以下中的至少一种：基质金属蛋白酶-8(MMP8)、基质金属蛋白酶-9(MMP9)、肝细胞生长因子(HGF)、血红蛋白β亚基(Hb-β)和S100钙结合蛋白A8(S100A8)；或者(ii)肝细胞生长因子(HGF)以及以下蛋白质中的至少一种：基质金属蛋白酶-8(MMP8)和角蛋白4(K-4)；或者(iii)基质金属蛋白酶-8(MMP8)和以下蛋白质中的至少一种：白介素-1β(IL-1β)、角蛋白4(K-4)和抑制蛋白。通常，使用两种或多种检测试剂，每种检测试剂结合不同的生物标志物。在一个实施例中，第一检测试剂能够结合A1AGP，并且第二检测试剂能够结合MMP8。在又一实施例中，第一检测试剂能够结合A1AGP，并且第二检测试剂能够结合MMP9。在一个其他实施例中，第一检测试剂能够结合A1AGP，第二检测试剂能够结合Hb-β，并且第三检测试剂能够结合MMP8、MMP9和K-4中的至少一种。在另一实施本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于评估人类患者是否具有牙龈炎的体外方法，其中所述方法包括：/n-在来自所述人类患者的唾液样本中检测以下蛋白质的浓度：/n(i)α-1-酸性糖蛋白(A1AGP)以及以下中的至少一种：基质金属蛋白酶-8(MMP8)、基质金属蛋白酶-9(MMP9)、肝细胞生长因子(HGF)、血红蛋白β亚基(Hb-β)和S100钙结合蛋白A8(S100A8)；或者/n(ii)肝细胞生长因子(HGF)以及以下蛋白质中的至少一种：基质金属蛋白酶-8(MMP8)和角蛋白4(K-4)；或者/n(iii)基质金属蛋白酶-8(MMP8)和以下蛋白质中的至少一种：白介素-1β(IL-1β)、角蛋白4(K-4)和抑制蛋白；/n-确定反映针对所述蛋白质确定的联合浓度的测试值；/n-将所述测试值与阈值进行比较，所述阈值以所述相同方式反映与牙龈炎相关联的联合浓度，以便评估所述测试值是否指示所述患者的牙龈炎。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180412 EP 18166943.31.一种用于评估人类患者是否具有牙龈炎的体外方法，其中所述方法包括：
-在来自所述人类患者的唾液样本中检测以下蛋白质的浓度：
(i)α-1-酸性糖蛋白(A1AGP)以及以下中的至少一种：基质金属蛋白酶-8(MMP8)、基质金属蛋白酶-9(MMP9)、肝细胞生长因子(HGF)、血红蛋白β亚基(Hb-β)和S100钙结合蛋白A8(S100A8)；或者
(ii)肝细胞生长因子(HGF)以及以下蛋白质中的至少一种：基质金属蛋白酶-8(MMP8)和角蛋白4(K-4)；或者
(iii)基质金属蛋白酶-8(MMP8)和以下蛋白质中的至少一种：白介素-1β(IL-1β)、角蛋白4(K-4)和抑制蛋白；
-确定反映针对所述蛋白质确定的联合浓度的测试值；
-将所述测试值与阈值进行比较，所述阈值以所述相同方式反映与牙龈炎相关联的联合浓度，以便评估所述测试值是否指示所述患者的牙龈炎。


2.根据权利要求1所述的方法，其中所述人类患者被怀疑具有牙龈炎。


3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述对象的所述年龄被确定，并且所述测试值结合所述对象的所述年龄反映针对所述蛋白质确定的所述联合浓度。


4.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述阈值基于针对一个或多个参考样本中的所述蛋白质所确定的浓度，每个样本与牙龈炎的存在或牙龈炎的不存在相关联。


5.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述阈值基于样本集合中的所述蛋白质的浓度，所述样本集合包括来自具有牙龈炎的对象的样本以及来自没有牙龈炎的对象的样本。


6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述蛋白质包括：
MMP8、IL-1β、A1AGP和Hb-β；
MMP8、MMP9、A1AGP和Hb-β；
MMP8、A1AGP、Hb-β和K-4；或者
HGF、A1AGP、Hb-β和K-4。


7.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述蛋白质由以下组成：
MMP8、IL-1β、A1AGP和Hb-β；
MMP8、MMP9、A1AGP和Hb-β；
MMP8、A1AGP、Hb-β和K-4；或者
HGF、A1AGP、Hb-β和K-4。


8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所确定的所述浓度值被算术地处理为0和1之间的数字。


9.一种以下蛋白质在人类患者的唾液样本中作为生物标志物的用途：
(i)α-1-酸性糖蛋白(A1AGP)以及以下中的至少一种：基质金属蛋白酶-8(MMP8)、基质金属蛋白酶-9(MMP9)、肝细胞生长因子(HGF)、血红蛋白β亚基(Hb-β)和S100钙结合蛋白A8(S100A8)；或者
(ii)肝细胞生长因子(HGF)以及以下蛋白质中的至少一种：基质金属蛋白酶-8(MMP8)和角蛋白4(K-4)；或者
(iii)基质金属蛋白酶-8(MMP8)和以下蛋白质中的至少一种：白介素-1β(IL-1β)、角蛋白4(K-4)和抑制蛋白；
所述生物标志物用于评估所述患者是否具有牙龈炎。


10.根据权利要求9所述的用途，其中所述人类患者的所述年龄也被用作生物标志物。


11.一种用于评估人类患者是否具有牙龈炎的系统，所述系统包括：
-检测装置，能够以及适于在所述人类患者的唾液样本中检测以下蛋白质：
(i)α-1-酸性糖蛋白(A1AGP)以及以下中的至少一种：基质金属蛋白酶-8(MMP8)、基质金属蛋白酶-9(MMP9)、肝细胞生长因子(HGF)、血红蛋白β亚基(Hb-β)和S100钙结合蛋白A8(S100A8)；或者
(ii)肝细胞生长因子(HGF)以及以下蛋白质中的至少一种：基质金属蛋白酶-8(MMP8)和角蛋白4(K-4)；或者
(iii)基质金属蛋白酶-8(MMP8)和以下蛋白质中的至少一种：白介素-1β(IL-1β)、角蛋白4(K-4)和抑制蛋白；
-处理器，能够以及适于通过所述蛋白质的所确定的浓度确定所述患者具有牙龈炎的指示。


12.根据权利要求11所述的系统，还包括用于接收口腔液样本的容器，所述容器包括所述检测装置。


13.根据权利要求11或12所述的系统，还包括：
-用于向用户呈现所述指示的用户界面；以及
-所述处理器与所述用...

【专利技术属性】
技术研发人员：G·库伊杰曼，A·H·耳麦勒，C·格拉斯，M·K·J·德加格，I·L·C·察柏尔，M·M·格兰特，P·普雷肖，J·泰勒，M·A·范哈特斯坎普，
申请(专利权)人：皇家飞利浦有限公司，
类型：发明
国别省市：荷兰;NL